杜 輝，陸雪芳，朱艷梅

（南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司，江蘇南通 226017）

螺蟲乙酯是拜耳公司研發(fā)的一種季酮酸類殺蟲殺螨劑，殺蟲譜廣、持效期長(zhǎng)[1]。氯噻啉是南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司研發(fā)的、具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的一種用于防治蚜蟲、飛虱等害蟲的新煙堿類殺蟲劑，具有強(qiáng)內(nèi)吸性、不受溫度高低限制、無(wú)抗性、低毒廣譜、成本低等優(yōu)勢(shì)。螺蟲乙酯與氯噻啉復(fù)配懸浮劑產(chǎn)品，由兩種不同作用機(jī)制的有效成分組成，具有明顯的協(xié)同增效作用，防治效果優(yōu)于單劑單獨(dú)使用，同時(shí)減少了農(nóng)藥使用量，可降低農(nóng)藥在農(nóng)作物上的殘留，減輕對(duì)環(huán)境的污染，延緩病蟲害抗藥性的產(chǎn)生[2]。螺蟲乙酯、氯噻啉單劑或與其他藥劑復(fù)配制劑的分析方法已有報(bào)道[1，3-4]，但螺蟲乙酯與氯噻啉復(fù)配制劑的兩種有效成分在同一色譜條件下進(jìn)行同柱分析的方法尚未見公開報(bào)道。

筆者采用C18反相色譜柱和紫外可調(diào)波長(zhǎng)檢測(cè)器檢測(cè)復(fù)配制劑中的螺蟲乙酯和氯噻啉，探討這兩種有效成分在同一色譜條件下進(jìn)行同柱分析的方法。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

Agilent 1260高效液相色譜儀（配有紫外檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣器及色譜工作站），美國(guó)安捷倫公司；Sartorius BP 211D十萬(wàn)分之一電子天平；北京歷元UPW-30S超純水器；過濾器（濾膜孔徑0.45 μm）；乙腈（色譜純），美國(guó)天地公司；超純水（電阻率：25℃，18.2 MΩ·cm）；螺蟲乙酯標(biāo)準(zhǔn)品（質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.0%），沈陽(yáng)化工研究院；氯噻啉標(biāo)準(zhǔn)品（質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.0%）、22.4%螺蟲乙酯·氯噻啉懸浮劑，南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 色譜操作條件

液相色譜柱：Agilent Zorbax Eclipse C18；不銹鋼柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；柱溫：室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm；流動(dòng)相采用梯度洗脫（表1），進(jìn)樣體積：5 μL；氯噻啉保留時(shí)間約為4.0 min，螺蟲乙酯保留時(shí)間約為9.3 min。

表1 梯度洗脫參數(shù)

螺蟲乙酯和氯噻啉標(biāo)樣和試樣的典型液相色譜圖見圖1和圖2。

圖1 標(biāo)樣中螺蟲乙酯和氯噻啉液相色譜圖

圖2 22.4%螺蟲乙酯·氯噻啉懸浮劑液相色譜圖

1.2.2 測(cè)定步驟

（1）標(biāo)準(zhǔn)溶液配制。稱取螺蟲乙酯標(biāo)準(zhǔn)品約0.05 g（精確至0.000 02 g）于100 mL容量瓶中，同時(shí)稱取氯噻啉標(biāo)樣約0.015 g（精確至0.000 02 g）于此瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，超聲溶解，冷卻至室溫，搖勻備用。

（2）試樣溶液的配制。稱取約含螺蟲乙酯0.05g的22.4%螺蟲乙酯·氯噻啉懸浮劑試樣（精確至0.000 02 g）于100 mL容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，超聲溶解，搖勻備用。

（3）測(cè)定。在上述操作條件下，待分析條件滿足后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

（4）結(jié)果與計(jì)算。螺蟲乙酯（氯噻啉）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w（%）按下列公式計(jì)算。

式中：A1為標(biāo)樣溶液中螺蟲乙酯（或氯噻啉）峰面積的平均值，mAU；A2為試樣溶液中螺蟲乙酯（或氯噻啉）峰面積的平均值，mAU；m1為螺蟲乙酯（或氯噻啉）標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2為試樣的質(zhì)量，g；P為標(biāo)樣中螺蟲乙酯（或氯噻啉）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與分析

2.1 溶劑和流動(dòng)相的選擇

根據(jù)螺蟲乙酯和氯噻啉的性質(zhì)，螺蟲乙酯和氯噻啉在乙腈中溶解性較好且比較穩(wěn)定。筆者測(cè)試了不同比例的流動(dòng)相（乙腈∶水），當(dāng)乙腈比例增加時(shí)，氯噻啉出峰比較早，雜質(zhì)得不到有效分開；而采用梯度洗脫，試樣中的有效成分和雜質(zhì)既得到有效分離，又能保證兩個(gè)有效成分的保留時(shí)間比較適中。

2.2 檢驗(yàn)波長(zhǎng)的選擇

通過Agilent 1260高效液相色譜儀的光譜數(shù)據(jù)采集功能，對(duì)配成一定濃度的螺蟲乙酯和氯噻啉溶液進(jìn)行紫外波長(zhǎng)掃描，發(fā)現(xiàn)在254 nm處，氯噻啉的靈敏度比較高，螺蟲乙酯也有一定的吸收，且產(chǎn)品中各雜質(zhì)在該波長(zhǎng)時(shí)不影響產(chǎn)品的測(cè)定，故選擇254 nm作為本方法的最適檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.3 樣品前處理

稱取一定量的試樣，單獨(dú)用乙腈或水溶解，會(huì)出現(xiàn)不溶或有一定量渾濁的現(xiàn)象；而用流動(dòng)相溶解試樣，樣品能溶解，但不透明，用0.45 μm濾膜過濾試液澄清后進(jìn)樣。

2.4 分析方法的線性相關(guān)性測(cè)定

依據(jù)上述液譜條件，按照螺蟲乙酯和氯噻啉有效成分含量配成5個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在前述操作條件下進(jìn)樣，得出5個(gè)相應(yīng)的峰面積（表2）。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)分別作螺蟲乙酯和氯噻啉的線性關(guān)系圖（圖3和圖4）。螺蟲乙酯和氯噻啉線性回歸方程分別為y=3 531.1 x＋38.802和y=23324x-942.94；相關(guān)系數(shù)分別為0.9995和0.9994。

表2 分析方法的線性相關(guān)性測(cè)定結(jié)果

圖3 螺蟲乙酯線性關(guān)系圖

圖4 氯噻啉線性關(guān)系圖

2.5 方法的精密度測(cè)定

稱取同一個(gè)22.4%螺蟲乙酯和氯噻啉試樣，在上述條件下進(jìn)行5次平均測(cè)定樣分析，結(jié)果見表3，螺蟲乙酯和氯噻啉的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.059和0.047，變異系數(shù)分別為0.35%和0.83%。

表3 精密度測(cè)定結(jié)果

2.6 方法的準(zhǔn)確度測(cè)定

準(zhǔn)確稱取5個(gè)22.4%螺蟲乙酯·氯噻啉懸浮劑試樣，加入一定量的螺蟲乙酯和氯噻啉標(biāo)準(zhǔn)品，按上述處理辦法和相同的操作條件進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得螺蟲乙酯和氯噻啉的平均回收率分別為99.72%和99.59%（表4）。

表4 準(zhǔn)確度測(cè)定結(jié)果

3 結(jié)論

結(jié)果表明，本方法在保證良好分離度的前提下，線性關(guān)系良好，精密度和準(zhǔn)確度高，一根柱子能夠同時(shí)測(cè)定試樣中兩種有效成分，不僅減少了流動(dòng)相試劑消耗，而且為日常檢測(cè)節(jié)省了時(shí)間，提高了工作效率。