黃 亮，金 立

(安徽豐樂農(nóng)化有限責(zé)任公司，安徽 合肥 231600)

螺蟲乙酯(Spirotetramat)是季酮酸類化合物，有獨(dú)特的作用特征，是迄今具有雙向內(nèi)吸傳導(dǎo)性能的現(xiàn)代殺蟲劑之一。該化合物可以在整個(gè)植物體內(nèi)向上向下移動(dòng)，抵達(dá)葉面和樹皮，從而防治如生菜和白菜內(nèi)葉上，及果樹皮上的害蟲。這種獨(dú)特的內(nèi)吸性能可以保護(hù)新生莖、葉和根部，防止害蟲的卵和幼蟲生長(zhǎng)。其另一個(gè)特點(diǎn)是持效期長(zhǎng)，可提供長(zhǎng)達(dá)8周的有效防治[1]。

噻蟲啉(Thiacloprid)原藥由德國(guó)拜耳農(nóng)化公司和日本拜耳農(nóng)化公司合作開發(fā)，是新型氯代煙堿類殺蟲劑。主要作用于昆蟲神經(jīng)接合后膜，通過與煙堿乙酰膽堿受體結(jié)合，干擾昆蟲神經(jīng)系統(tǒng)正常傳導(dǎo)，引起神經(jīng)通道的阻塞，造成乙酰膽堿的大量積累，從而使昆蟲異常興奮，全身痙攣、麻痹而死。具有較強(qiáng)的內(nèi)吸、觸殺和胃毒作用[2]。

關(guān)于螺蟲乙酯和噻蟲啉的檢測(cè)方法已有報(bào)道[3-5]。但螺蟲乙酯和噻蟲啉在同一色譜條件同時(shí)分析的方法還尚未見報(bào)道。由于22%螺蟲乙酯·噻蟲啉懸浮劑為復(fù)配制劑，在實(shí)際生產(chǎn)中，如果兩個(gè)組分單獨(dú)測(cè)定易耗費(fèi)時(shí)間。經(jīng)過試驗(yàn)，摸索出一個(gè)在同一條件同時(shí)測(cè)定螺蟲乙酯和噻蟲啉的分析方法。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，此分析方法具有較好的準(zhǔn)確度和精確度。

1 材料儀器

1.1 樣品和試劑 甲醇：色譜純；水：新蒸二次蒸餾水，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾；螺蟲乙酯標(biāo)樣：已知準(zhǔn)確質(zhì)量分?jǐn)?shù)，≥99.0%；噻蟲啉標(biāo)樣：已知準(zhǔn)確質(zhì)量分?jǐn)?shù)，≥99.0%，國(guó)家農(nóng)藥質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心(沈陽)。

1.2 儀器 島津高效液相色譜儀LC-20A，具有二極管陣列檢測(cè)器；色譜數(shù)據(jù)處理工作站；色譜柱：250mm×4.6(id)mm不銹鋼柱，內(nèi)裝InertsilODS-SP填充物，粒徑5μm；超聲波清洗器；自動(dòng)進(jìn)樣器；微孔過濾器：濾膜孔徑約0.45μm。

1.3 高效液相色譜操作條件 流動(dòng)相：ψ(甲醇+水)=75+25(V+V)，經(jīng)過濾膜過濾，并進(jìn)行脫氣；流速：1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm；柱溫：室溫；進(jìn)樣體積：5μL；保留時(shí)間：噻蟲啉約4.0min，螺蟲乙酯約8.1min；上述操作參數(shù)是典型的，可根據(jù)儀器的特點(diǎn)，對(duì)給定的操作參數(shù)做適當(dāng)調(diào)整，以期獲得最佳效果，典型的螺蟲乙酯(噻蟲啉)高效液相色譜圖(圖1)。

圖1 22%螺蟲乙酯·噻蟲啉懸浮劑高效液相色譜圖注：1-噻蟲啉，2-螺蟲乙酯

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 標(biāo)樣溶液的配置 稱取螺蟲乙酯(噻蟲啉)標(biāo)樣各0.05g(精確至0.000 2g)，置于100mL容量瓶中，加入適量甲醇，超聲3min使之溶解，冷卻至室溫，用甲醇定容，搖勻、過濾備用。

2.2 試樣溶液的配置 稱取約0.45g(精確至0.000 2g)的試樣，置于100mL容量瓶中，加入適量甲醇，超聲3min使之溶解，冷卻至室溫，用甲醇定容，搖勻、過濾備用。

2.3 試樣的測(cè)定 在上述高效液相色譜操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，待相鄰2針螺蟲乙酯(噻蟲啉)的峰面積相對(duì)響應(yīng)值變化<1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

2.4 試樣中有效含量的計(jì)算 將測(cè)得的兩針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中螺蟲乙酯(噻蟲啉)峰面積分別進(jìn)行平均，試樣中螺蟲乙酯(噻蟲啉)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)X1(%)，按式(1)計(jì)算：

(1)

式中：

A1——標(biāo)樣溶液中螺蟲乙酯(噻蟲啉)峰面積的平均值；

A2——試樣溶液中螺蟲乙酯(噻蟲啉)峰面積的平均值；

m1——螺蟲乙酯(噻蟲啉)標(biāo)樣的質(zhì)量，g；

m2——試樣的質(zhì)量，g；

p1——標(biāo)樣中螺蟲乙酯(噻蟲啉)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

3 結(jié)果與討論

3.1 分析方法的線性相關(guān)性實(shí)驗(yàn) 配置5個(gè)不同濃度梯度的噻蟲啉、螺蟲乙酯標(biāo)準(zhǔn)溶液，按本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法進(jìn)樣，每個(gè)濃度分析兩次，求其峰面積平均值。以噻蟲啉、螺蟲乙酯的峰面積為縱坐標(biāo)，以噻蟲啉、螺蟲乙酯的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)作圖，結(jié)果(表1)，(表1)可知，本標(biāo)準(zhǔn)方法在噻蟲啉為0.087～0.940mg/mL的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)、螺蟲乙酯為0.085～0.905mg/mL的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)均具有較好的線性相關(guān)性。

表1 噻蟲啉、螺蟲乙酯線性數(shù)據(jù)

3.2 分析方法的精密度實(shí)驗(yàn) 按本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法對(duì)同一樣品中的噻蟲啉、螺蟲乙酯的質(zhì)量分?jǐn)?shù)進(jìn)行五次平行測(cè)定，并進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)偏差及變異系數(shù)的統(tǒng)計(jì)運(yùn)算，結(jié)果(表2)。由(表2)得到，本方法對(duì)噻蟲啉分析的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.032%，變異系數(shù)為0.227%，對(duì)螺蟲乙酯分析的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.026%，變異系數(shù)為0.231%。

表2 螺蟲乙酯、噻蟲啉精密度測(cè)定

同時(shí)通過運(yùn)用修改的Horwits公式對(duì)本產(chǎn)品中的噻蟲啉、螺蟲乙酯作理論上的變異系數(shù)(即理論RSD)的計(jì)算，結(jié)果(表3)，并與其實(shí)測(cè)的變異系數(shù)值(即實(shí)測(cè)的RSD)進(jìn)行比較。可知，本方法分析噻蟲啉、螺蟲乙酯的精密度較好，能對(duì)有效成分進(jìn)行精確的分析。

表3 22%螺蟲乙酯噻蟲啉分析方法精密度評(píng)價(jià)

3.3 分析方法的準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn) 按配方比例要求，將除原藥以外的所有助劑混勻，作制劑空白，在制劑空白中加入5組已經(jīng)稱量好的噻蟲啉、螺蟲乙酯標(biāo)準(zhǔn)品適量。測(cè)定本標(biāo)準(zhǔn)方法的準(zhǔn)確度，具體實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)(表4)，其對(duì)噻蟲啉分析的平均回收率99.83%，對(duì)螺蟲乙酯分析的平均回收率99.52%，可見本標(biāo)準(zhǔn)方法對(duì)噻蟲啉、螺蟲乙酯的準(zhǔn)確度能滿足定量要求。

表4 準(zhǔn)確度測(cè)定數(shù)據(jù)

3.4 非分析物干擾實(shí)驗(yàn) 為確定本分析方法下助劑輔料和有效成分螺蟲乙酯，噻蟲啉有無明顯干擾，配制相應(yīng)空白溶劑溶液、原藥溶液、標(biāo)樣溶液以及制劑試樣，不含有助劑的螺蟲乙酯和噻蟲啉的原藥按照標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的方法進(jìn)行液相色譜的分析，不存在與有效成分的保留時(shí)間重合的非分析物。因此，按照標(biāo)準(zhǔn)中方法分析有效成分，無非分析物的干擾(圖2～5)。

圖3 不含有助劑的噻蟲啉、螺蟲乙酯原藥色譜圖

圖4 噻蟲啉、螺蟲乙酯標(biāo)樣色譜圖

圖5 試樣中噻蟲啉、螺蟲乙酯色譜圖

所以，本分析方法下助劑輔料和螺蟲乙酯、噻蟲啉之間無明顯雜質(zhì)干擾。

3.5 分析方法的特異性 按照標(biāo)準(zhǔn)中噻蟲啉和螺蟲乙酯的含量配制一定濃度的噻蟲啉和螺蟲乙酯的標(biāo)樣和試樣溶液，按標(biāo)準(zhǔn)中方法對(duì)標(biāo)樣溶液進(jìn)行液相色譜、全波段掃描，并對(duì)其色譜圖進(jìn)行峰純度分析，其色譜圖(圖6～11)(同時(shí)對(duì)試樣也進(jìn)行液相色譜、全波段掃描，并對(duì)其色譜圖進(jìn)行峰純度分析)，(圖6～11)可見，在該色譜條件下，標(biāo)樣和樣品的保留時(shí)間和峰趨勢(shì)基本一致，有效成分噻蟲啉和螺蟲乙酯均能得到很好的檢測(cè)，二者的分離度能達(dá)到100%，二者在同一檢測(cè)條件下無相互干擾，其它雜質(zhì)的峰面積干擾程度<3%。

圖6 螺蟲乙酯+噻蟲啉的標(biāo)樣液相色譜圖

圖7 標(biāo)樣噻蟲啉的吸收紫外光譜圖

圖8 標(biāo)樣螺蟲乙酯的紫外吸收光譜圖

圖9 螺蟲乙酯+噻蟲啉的試樣液相色譜圖

圖10 試樣噻蟲啉的吸收紫外光譜圖

圖11 試樣螺蟲乙酯的吸收紫外光譜圖

4 結(jié)論

本文建立了22%螺蟲乙酯·噻蟲啉懸浮劑中有效成分的分析方法。該方法準(zhǔn)確度和精密度較高，線性關(guān)系良好。由于一次即可測(cè)定螺蟲乙酯和噻蟲啉的含量，使得該方法快速、簡(jiǎn)便，適合于產(chǎn)品的質(zhì)量檢測(cè)和控制。