郭 梅

龍巖人民醫(yī)院，福建省龍巖市 364000

目前，ABO血型不合新生兒溶血病的血清學(xué)檢測方法主要為三項(xiàng)試驗(yàn)，即紅細(xì)胞直接抗球蛋白試驗(yàn)、血清游離抗體檢測試驗(yàn)、紅細(xì)胞放散液鑒定試驗(yàn)[1]。臨床多采用試管法抗人球蛋白試驗(yàn)(Tube anti-human globulin test，TAT)，雖具有良好診斷效能，但其操作步驟多、時間長，且易受操作者熟練程度等主觀因素影響[2]。近年來，微柱凝膠卡式檢測法(Microcolumn gel cassette detection，MGCP)在國內(nèi)外交叉配血中得到規(guī)范應(yīng)用，其操作相對簡便、準(zhǔn)確度高，為新生兒溶血病的早期診斷指明了新方向[3]。本文選取我院疑似ABO血型不合新生兒溶血病患兒80例，均行MGCP、TAT新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)，旨在探究MGCP對ABO血型不合新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)陽性檢出率的影響。報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年9—10月我院疑似ABO血型不合新生兒溶血病患兒80例作為觀察對象，其中女31例，男49例，胎齡37～42周，平均胎齡(39.60±1.06)周。

1.2 儀器與試劑 (1)儀器：戴安娜微柱凝膠抗人球蛋白卡購自溫州東亞醫(yī)療器械有限公司，37 ℃孵育器、專用低速離心機(jī)均由溫州東亞醫(yī)療器械有限公司提供。(2)試劑：抗人球蛋白試劑、ABO標(biāo)準(zhǔn)血清、ABO標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞，均由上海血液生物制品有限公司生產(chǎn)；單特異性抗-C3、單特異性抗-IgG、多特異性抗人球蛋白試劑，均購自上海血液中心。

1.3 方法 采集所有患兒靜脈血2ml，行乙二胺四乙酸(Ethylenediamine tetraacetic acid，EDTA)抗凝處理，分別行MGCP、TAT新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)。

1.3.1 TAT：操作由專業(yè)人員嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行，其中放散試驗(yàn)采用熱放散，肉眼或顯微鏡下可見的凝集為陽性反應(yīng)。

1.3.2 MGCP：操作由專業(yè)人員嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，以紅細(xì)胞聚集在凝膠帶上部或凝膠中為陽性。

1.3.3 結(jié)果判定：三項(xiàng)試驗(yàn)同時陽性可確診陽性；三項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果有陰性時，以放散試驗(yàn)陽性為診斷標(biāo)準(zhǔn)；若直抗及游離試驗(yàn)1項(xiàng)或2項(xiàng)陽性判定為可疑陽性，需結(jié)合臨床具體分析。

1.4 觀察指標(biāo) (1)MGCP、TAT新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)陽性檢出率。(2)分析MGCP、TAT新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)的靈敏度、檢測所用時間、操作條件要求、不同操作者判定結(jié)果的差異。(3)分析MGCP、TAT檢測的凝集強(qiáng)度。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所得數(shù)據(jù)處理采用SPSS22.0軟件分析處理，計(jì)數(shù)資料以[n(%)]表示，行χ2檢驗(yàn)；P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 MGCP、TAT新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)陽性檢出率比較 80例血液標(biāo)本中，采用TAT行紅細(xì)胞直接抗球蛋白試驗(yàn)、血清游離抗體檢測試驗(yàn)、紅細(xì)胞放散液鑒定試驗(yàn)，合計(jì)檢出陽性61例；采用MGCP試驗(yàn)檢出陽性74例；兩種檢測方法的新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)陽性檢出率對比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 MGCP、TAT新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)陽性檢出率對比[n(%)]

2.2 MGCP、TAT新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)的靈敏度及方法學(xué)特點(diǎn)比較 本組共80例疑似ABO血型不合新生兒溶血病患兒，其中MGCP紅細(xì)胞放散液鑒定試驗(yàn)檢出的74例患兒，出生后1周內(nèi)出現(xiàn)皮膚鞏膜黃染，血紅蛋白水平降低，檢測血清膽紅素值明顯高于正常值，并伴有新生兒溶血病臨床特征，診斷為新生兒溶血病，并以此設(shè)立陽性診斷標(biāo)準(zhǔn)，MGCP新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)診斷新生兒溶血病的靈敏度較TAT高(P<0.05)，檢測所用時間較TAT短，操作條件要求、不同操作者判定結(jié)果的差異較TAT低。見表2。

表2 MGCP、TAT新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)的靈敏度及方法學(xué)特點(diǎn)對比

2.3 MGCP、TAT檢測的凝集強(qiáng)度比較 采用TAT行紅細(xì)胞直接抗球蛋白試驗(yàn)、血清游離抗體檢測試驗(yàn)、紅細(xì)胞放散液鑒定試驗(yàn)檢出新生兒溶血病陽性血液標(biāo)本，經(jīng)MGCP檢測全部為陽性，此外，MGCP同時檢出TAT紅細(xì)胞直接抗球蛋白試驗(yàn)、血清游離抗體檢測試驗(yàn)、紅細(xì)胞放散液鑒定試驗(yàn)的12例、12例、13例陰性血液標(biāo)本，判讀結(jié)果時，MGCP檢測的凝集強(qiáng)度較TAT高1+～2+。

3 討論

母嬰ABO血型不合是引起新生兒溶血病的常見因素之一，主要表現(xiàn)為核黃疸、貧血、黃疸等，其臨床后果雖然沒RhD血型不合新生兒溶血病嚴(yán)重，但其發(fā)生率較高，對新生兒的危害性更大，盡早確診并給予有效治療對防止發(fā)生嚴(yán)重后遺癥具有重要意義[4]。

三項(xiàng)試驗(yàn)作為臨床檢測ABO血型不合新生兒溶血病的主要血清學(xué)方法，其中血清游離抗體檢測試驗(yàn)可檢出IgG的存在，其結(jié)果陽性表示患兒血液中存在針對紅細(xì)胞抗原的抗體，可起到良好輔助診斷作用[5]。紅細(xì)胞直接抗球蛋白試驗(yàn)、紅細(xì)胞放散液鑒定試驗(yàn)主要用于檢查紅細(xì)胞是否受到IgG抗體致敏，但患兒紅細(xì)胞A、B抗原較少，且發(fā)育不成熟，致使直抗檢測反應(yīng)較弱，有時甚至無法檢出，而紅細(xì)胞放散液鑒定試驗(yàn)為三項(xiàng)試驗(yàn)敏感度最高的試驗(yàn)，因?yàn)槠湓囼?yàn)中應(yīng)用的紅細(xì)胞比直抗試驗(yàn)多數(shù)百倍，相關(guān)研究指出，放散試驗(yàn)一旦檢出陽性結(jié)果，則可明確診斷為ABO血型不合新生兒溶血病[6]。因此，如何提高ABO血型不合新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)陽性檢出率及敏感度，一直是臨床研究的重點(diǎn)之一。TAT作為臨床檢測新生兒溶血病的常規(guī)方法，能較敏感檢出紅細(xì)胞膜上的不完全抗體及補(bǔ)體，但其操作繁瑣、耗時、重復(fù)性差，對操作者要求高，結(jié)果無法保存，難以標(biāo)準(zhǔn)化，致使其應(yīng)用具有一定局限性[7]。而MGCP屬于改良的抗人球蛋白試驗(yàn)，省略了洗滌步驟，有效縮短檢測用時，且具有血清量少、靈敏度高、操作便捷、結(jié)果清晰、可修復(fù)性好等優(yōu)勢，有逐漸取代TAT的趨勢[8]。本文將MGCP、TAT應(yīng)用于新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)，結(jié)果顯示，MGCP最終檢出新生兒溶血病陽性74，陽性檢出率為92.50%，明顯高于TAT的61例、76.25%，且采用MGCP行新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)的診斷靈敏度均高于TAT(P<0.05)?？梢奙GCP顯著提高ABO血型不合新生兒溶血病陽性檢出率，可有效減少漏診。檢測方法學(xué)方面，MGCP檢測所用時間短于TAT，操作條件要求低于TAT，不同操作者判定結(jié)果的差異小于TAT，判讀結(jié)果時，MGCP檢測的凝集強(qiáng)度較TAT高1+～2+。進(jìn)一步證實(shí)MGCP更適合應(yīng)用于ABO血型不合新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)。

綜上可知，采用MGCP行新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)的靈敏度較高，能顯著提高ABO血型不合新生兒溶血病陽性檢出率，可有效減少漏診，且MGCP檢測更簡單、便捷、直觀，可為臨床診斷新生兒溶血病提供可靠依據(jù)，具有較高應(yīng)用價值。