劉銀蘭 ，李國勤，葉 軒，李 昂，李浙烽，趙 威，馮佩詩，顧天天，田 勇，盧立志*

（1.福建農(nóng)林大學動物科學學院，福建福州 350000；2.浙江省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所，浙江杭州 310021 ；3.浙江省仙居種雞場，浙江仙居 311719；4.杭州康德權飼料有限公司，浙江杭州 311107）

紅豆杉（Taxus chinensis）屬紅豆杉科，紅豆杉屬植物，是世界上公認的瀕臨滅絕的天然珍稀植物，距今已有250 萬年歷史[1]，被稱為植物王國里的“活化石”，具有極高的開發(fā)價值[2]。從紅豆杉的樹皮和枝葉中提取的紫杉醇具有抗癌效應，既能夠抑制腫瘤細胞的分裂，使細胞有絲分裂停留在G 期和M 期，阻止癌細胞的快速繁殖直至死亡；還可以抑制腫瘤細胞的遷移[3]。何曉燕等[4]研究發(fā)現(xiàn)，東北紅豆杉水煎液對二甲苯致小鼠耳廓腫脹及甲醛致小鼠足腫脹均有顯著抑制作用；Aquila 等[5]研究發(fā)現(xiàn)，紅豆杉黃酮類物質(zhì)可以抑制環(huán)氧合酶（Cyclooxygenase，COX-2）和一氧化氮合成酶（Nitric oxide synthase，iNOS）的誘導活性，顯示抗炎活性。此外，紅豆杉具有顯著的抗氧化作用，但其抗氧化成分的研究較少，其中從紅豆杉中分離得到的紫杉烷類和黃酮類等化合物均具有顯著的抗氧化活性[6]。李英等[7]用南方紅豆杉總黃酮提取物的乙酸乙酷萃取液、正丁醇萃取液和混懸液殘，發(fā)現(xiàn)3 種組分的抗氧化能力與其黃酮含量有一定的相關性，表明南方紅豆杉中3 種黃酮組分均具有較強的抗氧化能力，對體外自由基有較好的清除作用。趙燕等[8]發(fā)現(xiàn)飼糧中添加紅豆杉干粉可促進肉雞生長，改善肉質(zhì)性狀，降低血清、肝臟及胸肌中膽固醇含量。但目前將紅豆杉干粉作為添加劑使用在家禽方面的研究報道極少。本試驗旨在研究在日糧中添加不同水平的紅豆杉干粉對仙居雞生產(chǎn)性能、血清脂質(zhì)代謝和抗氧化功能的影響，為紅豆杉干粉在家禽飼料中的利用、研發(fā)蛋雞功能性飼料提供合理依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 試驗用紅豆杉干粉為上年度自紅豆杉樹修剪下的枝葉，自然光照曬干后粉粹而成，紫杉醇含量為19.6 μg/g，由浙江武義曼地亞紅豆杉開發(fā)研究有限公司提供。

1.2 試驗設計及日糧組成 試驗選取140 日齡，健康狀況良好的仙居雞400 只，隨機分成4 組，每組5 個重復，每個重復20 只。對照組飼喂基礎日糧，試驗組在基礎飼糧的基礎上分別添加2%、3% 和4% 紅豆杉干粉?；A日糧由浙江省仙居種雞場提供，日糧組成及營養(yǎng)成分見表1。試驗雞只采用雙層立體籠養(yǎng)，雞舍為半封閉式，自然光照和通風。預試期7 d，正試期 90 d，其中1～30 d 為試驗初期，31～60 d 為試驗中期，61～90 d 為試驗后期。整個試驗期間，雞只自由采食粉狀飼料、自由飲水，按雞場正常免疫程序進行免疫和消毒，飼養(yǎng)管理條件保持一致。試驗過程詳細記錄各組健康情況。

表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)成分

1.3 測定指標及方法

1.3.1 生產(chǎn)性能 試驗期間每天記錄各個重復的加料量和剩料量、總產(chǎn)蛋數(shù)、總蛋重，每15 d 統(tǒng)計1 次平均日采食量（ADFI）、平均蛋重、日產(chǎn)蛋率、料蛋比。分別于0、45、90 d 的08：00 對全部試驗雞只進行空腹稱重，稱重前一天 20：00 禁食，自由飲水，計算試驗期1～45 d 及46～90 d 的平均日增重（ADG）和耗料增重比（F/G）。

1.3.2 血清脂質(zhì)代謝指標和抗氧化指標 在90 d 試驗結(jié)束前，每個重復隨機挑選1 只蛋雞，每組5 只蛋雞，禁食24 h 后，翅靜脈采集4～6 mL 血液，靜置凝固，分離血清，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

血清脂質(zhì)代謝指標：膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）采用 Beckman CoulterOlymPus AU2700 全自動生化分析儀（OLYMPUS 公司）測定。

血清抗氧化指標：總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、（過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）、還原型谷胱甘肽（GSH）含量的測定均使用試劑盒（購自南京建成生物工程研究所）進行檢測，按照產(chǎn)品說明書進行嚴格操作。

1.4 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)使用 Excel 2007 進行整理，采用 SPSS 17.0 軟件對整理數(shù)據(jù)進行方差分析，并采用LSD 和Duncan's 檢驗法進行各組間差異顯著性檢驗，P＜0.05 為差異顯著。試驗數(shù)據(jù)以平均值±標準差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 紅豆杉干粉對仙居雞生產(chǎn)性能的影響 由表2 可知，在試驗初期（1～30 d），各試驗組ADFI 低于對照組（P＜0.05），且4%紅豆杉干粉組顯著低于3%紅豆杉干粉組；3%、4% 紅豆杉干粉組平均蛋重低于對照組（P＞0.05）；4%紅豆杉干粉組產(chǎn)蛋率低于對照組（P＜0.05）；但各組間的料蛋比差異不顯著。在試驗中期（31～60 d），各處理組的ADFI、平均蛋重差異不顯著，4%紅豆杉干粉組產(chǎn)蛋率高于對照組（P＜0.05），料蛋比低于對照組（P＜0.05），對照組、2%、3%紅豆杉干粉組間的料蛋比差異不顯著。在試驗后期（61～90 d），3% 紅豆杉干粉組ADFI 高于對照組和2% 紅豆杉干粉組（P＜0.05），3%紅豆杉干粉組的平均蛋重低于對照組（P＜0.05），4% 紅豆杉干粉組產(chǎn)蛋率高于對照組（P＜0.05），料蛋比低于3%紅豆杉干粉組（P＜0.05），對照組、2% 紅豆杉干粉組、3% 紅豆杉干粉組間的料蛋比差異不顯著。

由表3 可知，在試驗期1～45 d，試驗組ADG 與對照組差異不顯著，試驗組的F/G 呈降低趨勢，以3%紅豆杉干粉組最低。在試驗期46～90 d，與對照組相比，2%紅豆杉干粉組ADG 較對照組顯著降低，而3%、4%紅豆杉干粉組差異不顯著，試驗組的F/G 呈升高趨勢，以2%紅豆杉干粉組最高。

2.2 紅豆杉干粉對仙居雞血清生化指標和抗氧化狀態(tài)的影響 如表4 所示，與對照組相比，試驗組的TG、LDL 和TC 水平差異均不顯著，但3%和4%紅豆杉干粉組的HDL 水平減低（P＜0.05）；2% 和3% 紅豆杉干粉組CAT 水平降低（P＜0.05），3%、4% 紅豆杉干粉組T-AOC 水平升高（P＜0.05），2%、3% 紅豆杉干粉組的SOD 水平降低（P＜0.05）。而各組GSH-PX 和MDA 水平差異不顯著。

表2 紅豆杉干粉對仙居雞蛋雞生產(chǎn)性能的影響

表3 紅豆杉干粉對仙居雞ADG 和F/G 的影響

表4 紅豆杉干粉對仙居雞蛋雞血液生化指標和抗氧化指標的影響

3 討 論

3.1 紅豆杉干粉對仙居雞生產(chǎn)性能和體重變化的影響本研究發(fā)現(xiàn)，試驗初期（1～30 d）飼喂紅豆杉干粉組仙居雞的ADFI 明顯下降，并且紅豆杉干粉添加水平越高，ADFI 越低，而F/G 在試驗期1～45 d 呈降低趨勢，這可能與紅豆杉干粉本身帶有的苦味和仙居雞對添加了紅豆杉干粉的飼料有一定的適應過程有關，導致采食量下降，但對體重無影響。紅豆杉干粉添加量對仙居雞的ADG影響不顯著，而在試驗期46～90 d，添加紅豆杉量越少，F(xiàn)/G 越高，可能添加少量紅豆杉促進其采食，紅豆杉本身含有的黃酮類物質(zhì)具有苦味限制了體重增長。在試驗初期（1～30 d）和中期（31～60 d），各組平均蛋重差異不顯著，4%紅豆杉干粉組的產(chǎn)蛋率和料蛋比均顯著高于對照組；在試驗后期（61～90 d），3%紅豆杉干粉組的ADFI 顯著高于對照組。趙燕等[9]研究發(fā)現(xiàn)，紅豆杉的最適添加量為3%，具有促進肉雞采食作用，與本試驗結(jié)果基本一致。本試驗表明紅豆杉干粉對仙居雞產(chǎn)蛋初期的產(chǎn)蛋率和料蛋比具有一定的促進作用，可能與其含有的黃酮類化合物有關。左瑞華等[10]報道，日糧中添加不同水平的蕨菜黃酮均可提高肉雞的ADFI、ADG，降低F/G。趙鳳岐等[11]研究表明，大豆黃酮可以提高蛋雞產(chǎn)蛋率、降低料蛋比。由此推測，紅豆杉干粉提高仙居雞的產(chǎn)蛋率、降低料蛋比可能與紅豆杉干粉含有的總黃酮有關，但仍需進一步驗證。從經(jīng)濟效益考慮，紅豆杉干粉的最適添加劑量為4%。

3.2 紅豆杉干粉對仙居雞血清脂質(zhì)代謝和抗氧化狀態(tài)的影響 董志巖等[12]研究表明，TG 含量降低表明脂肪沉積下降，說明TC、TG 可以反映脂質(zhì)代謝的情況。劉曉輝等[13]研究發(fā)現(xiàn)，東風菜功效成分總黃酮、總多糖能夠降低試驗性糖尿病小鼠血清TG 濃度。HDL 和LDL 可反映體內(nèi)脂類轉(zhuǎn)運情況。LDL 把內(nèi)源性膽固醇運輸?shù)饺砀魈幖毎?，促進膽固醇沉積，而HDL 將周圍組織膽固醇逆向運送至肝臟并分解為膽汁酸[14]。本試驗中添加紅豆杉粉后HDL 呈降低趨勢，LDL 無明顯變化，可能由于仙居雞已是成年雞，體內(nèi)脂類代謝較慢。尤翠蘭等[15]研究表明，黃芩莖葉總黃酮能顯著降低高脂血癥以及大鼠的血清低密度脂蛋白膽固醇濃度，顯著升高高密度脂蛋白膽固醇濃度，其調(diào)脂機制初步認為與提高血清卵磷脂膽固醇?；D(zhuǎn)移酶活性及抗氧化作用有關，說明植物黃酮類物質(zhì)能夠調(diào)控動物體內(nèi)的脂類代謝。

史彩霞等[16]報道，紅豆杉能預防治療冠心病與心肌梗塞等心血管疾病。這可能與紅豆杉的抗氧化作用有關。T-AOC、SOD、GSH-Px 和MDA 是反映機體抗氧化能力的重要指標，SOD、GSH-Px與機體的抗氧化能力呈正相關，MDA 含量與機體的抗氧化能力呈負相關[17-18]，其中SOD是機體內(nèi)清除氧自由基最有效的酶，能夠清除機體內(nèi)有氧代謝的中間產(chǎn)物，用來保護機體內(nèi)的細胞、組織、器官等免受自由基傷害[19]。MDA 是機體內(nèi)重要的脂質(zhì)氧自由基，為不飽和脂肪代謝產(chǎn)物，具有強毒性，在機體內(nèi)會與蛋白質(zhì)與核酸結(jié)構(gòu)上自由基發(fā)生交聯(lián)反應，致使正常生態(tài)結(jié)構(gòu)中蛋白質(zhì)和核酸遭到破壞，導致它們失去原有的功能[20]。SOD 與MDA 含量通?？梢苑从硻C體內(nèi)清除自由基及脂質(zhì)過氧化的程度，MDA 的活性變化通?？梢蚤g接反映出運動中自由基的生成量和體內(nèi)物質(zhì)的代謝情況[21]。本試驗發(fā)現(xiàn)4%紅豆杉組雞SOD 水平較對照組差異不顯著，但T-AOC 水平顯著提高。李石清等[22]通過體外1，1-二苯基-2-苦肼基（DPPH）自由基清除試驗、總抗氧化活性測定試驗、Fe3+還原能力測試試驗表明，南方紅豆杉枝葉中的黃酮具有較強的抗氧化能力，對體外自由基有較好的清除作用。所以添加紅豆杉干粉后T-AOC 的提高可能與紅豆杉干粉中含有的黃酮類物質(zhì)有關。

4 結(jié) 論

飼料中添加紅豆杉干粉對仙居雞平均采食量、產(chǎn)蛋率、料蛋比具有一定的促進作用，并可以提高血清抗氧化能力。本試驗條件下，紅豆杉干粉的最適添加量為4%。