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        重度子癇前期孕婦脂聯(lián)素及胎兒臍血流對圍產(chǎn)兒結(jié)局的預(yù)測

        2019-10-15 02:43:10雷劉燕周麗紅吳曉薇周淑君
        中國婦幼健康研究 2019年9期
        關(guān)鍵詞:產(chǎn)兒脂聯(lián)素子癇

        雷劉燕,周麗紅,吳曉薇,周淑君

        (麗水市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科,浙江 麗水 323000)

        子癇前期是指妊娠前血壓正常的孕婦在妊娠20孕周后,以孕婦出現(xiàn)蛋白尿及高血壓為特征的妊娠期特發(fā)性疾病,其發(fā)病率可高達(dá)8%,是導(dǎo)致孕婦和胎兒死亡的重要因素,但其發(fā)病機(jī)制目前尚未明確[1]。有關(guān)文獻(xiàn)報道,脂聯(lián)素具有抗炎、改善機(jī)體胰島素抵抗、抗動脈粥樣硬化的作用,對重度子癇前期等多種疾病的發(fā)生發(fā)展具有一定的保護(hù)作用[2]。胎兒從母體獲取營養(yǎng)的唯一途徑是臍動脈,因此通過檢測臍動脈阻力指數(shù)(umbilical artery resistance index,UA-RI)、臍動脈搏動指數(shù)(umbilical artery pulsatility index,UA-PI)及臍動脈收縮期和舒張期血流比值(umbilical arterysystolic/diastolic ratio,UA-S/D)可充分了解胎盤-胎兒循環(huán)有無出現(xiàn)病變及病變嚴(yán)重程度。有關(guān)研究顯示,通過實(shí)時監(jiān)測臍動脈超聲血流變化可顯著降低高危孕婦及圍產(chǎn)兒的死亡率[3]。因此,本研究對正常足月妊娠產(chǎn)婦和重度子癇前期孕婦的胎盤組織進(jìn)行分析,旨在探討重度子癇前期孕婦胎盤組織脂聯(lián)素表達(dá)水平與胎兒臍動脈超聲血流指數(shù)對圍產(chǎn)兒結(jié)局的預(yù)測價值,為重度子癇前期的臨床診斷和治療提供重要的觀察指標(biāo)及血流動力學(xué)判斷依據(jù)。

        1資料與方法

        1.1研究對象

        隨機(jī)選取2015年6月至2017年1月在麗水市中心醫(yī)院就診的54例正常足月妊娠產(chǎn)婦為對照組,54例重度子癇前期孕婦為研究組。研究組納入標(biāo)準(zhǔn):①孕婦符合重度子癇前期的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[4];②單胎,年齡≥18歲;③自愿簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):①妊娠前合并嚴(yán)重高血壓、糖尿病、冠心病等基礎(chǔ)疾?。虎诤喜?yán)重肝腎功能不全;③胎兒畸形或多囊卵巢綜合征者。對照組納入標(biāo)準(zhǔn):于本院定期產(chǎn)檢,足月妊娠;單胎,年齡≥18歲。排除標(biāo)準(zhǔn):伴有妊娠并發(fā)癥或合并癥;既往伴有嚴(yán)重急慢性疾??;伴有胎兒發(fā)育不全或先天性疾病等。

        1.2研究方法

        1.2.1收集資料及臍動脈血流的檢測

        收集兩組孕婦的年齡、孕次、產(chǎn)次、分娩孕周、孕前身體質(zhì)量指數(shù)(body mass index,BMI)及新生兒體重、身長、胎盤重量等資料。通過GE Vivid7彩色多普勒超聲儀監(jiān)測兩組孕婦分娩前一天胎兒的臍動脈血流情況,探頭頻率為3.5MHz,取容積<2mm,臍動脈與脈沖多普勒取樣線間夾角為60°,選擇5個清晰脈沖頻,檢測胎兒的UA-RI、UA-PI、UA-S/D。

        1.2.2胎盤的取材

        于產(chǎn)婦娩出胎盤后切取一塊1.0cm×1.0cm×1.0cm的組織,采用0.9%NaCl溶液清洗干凈后,采用10%甲醛溶液固定,包埋,切片,用于檢測胎盤組織中脂聯(lián)素蛋白的表達(dá)水平。另切除一塊0.5cm×0.5cm×0.5cm的新鮮胎盤組織,采用0.9%NaCl溶液清洗干凈后,于-80℃的冰箱保存,用于檢測胎盤組織中脂聯(lián)素mRNA相對表達(dá)量。

        1.2.3脂聯(lián)素蛋白表達(dá)的檢測

        采用免疫組織化學(xué)法檢測胎盤組織中脂聯(lián)素蛋白的表達(dá)情況。通過兔抗人脂聯(lián)素多克隆抗體(由上海閃晶分子生物科技有限公司提供)對胎盤組織行SP染色。通過奧林巴斯熒光顯微鏡(由上海賴氏電子科技有限公司提供)采集照片。若滋養(yǎng)細(xì)胞中的細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜呈現(xiàn)黃褐色顆粒或棕黃色顆粒為陽性表達(dá)。選擇5個視野觀測組織細(xì)胞,并計算平均光密度值。

        1.2.4脂聯(lián)素mRNA表達(dá)的檢測

        采用定量聚合酶聯(lián)反應(yīng)(real-time polymerasechain reaction,PCR)檢測脂聯(lián)素蛋白mRNA的表達(dá)情況。通過RNA提取試劑(由深圳市康初源有限公司提供)提取總RNA,完成逆轉(zhuǎn)錄后,通過燃料法行定量PCR檢測。本研究中的各種引物均由北京萬生優(yōu)達(dá)生物科技有限公司提供。以2-△△Ct值對目的基因相對表達(dá)量進(jìn)行定量分析。

        1.3統(tǒng)計學(xué)方法

        2結(jié)果

        2.1兩組孕婦和圍產(chǎn)兒的一般資料比較

        研究組孕婦年齡、孕前BMI均較對照組高(均P<0.01);研究組孕婦分娩孕周顯著低于對照組(P<0.01);研究組胎盤重量、新生兒出生體重均較對照組低(均P<0.01),身長較對照組短(P<0.01);兩組的孕次、產(chǎn)次比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05),見表1。

        2.2兩組胎兒臍動脈血流參數(shù)的比較

        研究組UA-RI、UA-PI及UA-S/D均較對照組高(均P<0.01),見表2。

        表1 兩組孕婦和圍產(chǎn)兒一般資料的比較結(jié)果

        表2 兩組胎兒臍動脈血流參數(shù)的比較結(jié)果

        2.3兩組孕婦胎盤組織中脂聯(lián)素mRNA、蛋白表達(dá)的比較

        研究組孕婦胎盤組織中脂聯(lián)素mRNA和蛋白表達(dá)水平均較對照組明顯升高(均P<0.01),見表3。

        表3 兩組孕婦胎盤組織中脂聯(lián)素mRNA和蛋白表達(dá)的比較結(jié)果

        2.4相關(guān)性分析

        研究組脂聯(lián)素mRNA表達(dá)量與發(fā)病孕周、新生兒出生體重及分娩孕周均呈負(fù)相關(guān)(均P<0.01),與UA-S/D及孕前BMI均呈正相關(guān)(均P<0.01),見表4;研究組UA-S/D與發(fā)病孕周、新生兒出生體重及分娩孕周均呈負(fù)相關(guān)(均P<0.01),見表5。

        表4 脂聯(lián)素mRNA表達(dá)量的相關(guān)性分析

        表5 UA-S/D的相關(guān)性分析

        3討論

        3.1子癇前期的病理機(jī)制

        關(guān)于子癇前期的病理機(jī)制目前雖尚未明確,然而有研究指出子宮動脈擴(kuò)張障礙及滋養(yǎng)細(xì)胞侵入不足均可增加子宮胎盤循環(huán)阻力,導(dǎo)致胎盤灌注不足,出現(xiàn)缺血缺氧的情況,降低系統(tǒng)性血管內(nèi)皮功能,出現(xiàn)高血壓、蛋白尿等臨床癥狀[5]。

        3.2脂聯(lián)素與重度子癇前期發(fā)病的相關(guān)性

        脂聯(lián)素是一種存在于脂肪組織且含量豐富的蛋白因子,對妊娠期孕婦具有較好的保護(hù)作用,同時具有抗炎、改善機(jī)體胰島素抵抗、抗動脈粥樣硬化的作用,其在脂肪酸氧化與血糖代謝等過程中發(fā)揮著重要作用[6]。由于子癇前期與血管內(nèi)皮炎癥反應(yīng)、損傷及胰島素抵抗等關(guān)系密切,故脂聯(lián)素可作為研究子癇前期發(fā)病機(jī)制的重要蛋白因子之一。有關(guān)文獻(xiàn)報道,通過脂聯(lián)素可誘導(dǎo)一氧化氮及血管內(nèi)皮氧化酶的分泌,參與到子癇前期的發(fā)病過程中,而24孕周至孕足月期間,臍血中脂聯(lián)素的表達(dá)水平顯著高于母血,可見脂聯(lián)素的主要來源是胎盤[7]。

        本研究發(fā)現(xiàn),兩組的脂聯(lián)素蛋白在胎盤組織絨毛細(xì)胞中均有表達(dá),且主要分布在胎盤絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞中,但是研究組孕婦胎盤組織中脂聯(lián)素蛋白表達(dá)量(0.34±0.11)較對照組(0.11±0.03)高,推測與緩解機(jī)體內(nèi)炎癥反應(yīng)相關(guān)。研究組孕婦胎盤組織中脂聯(lián)素mRNA表達(dá)量(4.12±1.33)較對照組(1.09±0.32)高,可見脂聯(lián)素高表達(dá)于重度子癇前期孕婦胎盤組織中。有研究報道,當(dāng)重度子癇前期患者的血清脂聯(lián)素下降時,可有效提高其生存率[8]。另有研究發(fā)現(xiàn),重度子癇前期患者的血清脂聯(lián)素是上升的,這是由于患者為降低機(jī)體內(nèi)堆積過多脂肪產(chǎn)生的一種應(yīng)激反應(yīng)[9]。本研究發(fā)現(xiàn),研究組脂聯(lián)素mRNA表達(dá)量與發(fā)病孕周、新生兒出生體重及分娩孕周均呈負(fù)相關(guān),與UA-S/D及孕婦BMI均呈正相關(guān),其原因可能是脂聯(lián)素誘導(dǎo)胎盤組織分泌相應(yīng)的受體,調(diào)節(jié)葡萄糖代謝機(jī)制,改善胰島素抵抗,從而影響宮內(nèi)胎兒的生長發(fā)育。

        3.3臍動脈超聲血流指數(shù)異常與重度子癇前期發(fā)病的相關(guān)性

        重度子癇前期是造成圍產(chǎn)兒不良結(jié)局的致病因素之一。目前臨床上主要通過彩色多普勒超聲檢測胎兒臍動脈血流情況,以加強(qiáng)對重度子癇前期圍產(chǎn)兒的監(jiān)測,減少剖宮產(chǎn)、引產(chǎn)的發(fā)生率,提高圍產(chǎn)兒的生存率。目前臨床上主要通過檢測UA-RI來評估胎盤血流灌注情況。本研究通過檢測胎兒UA-RI、UA-PI、UA-S/D來監(jiān)測臍動脈血流情況,發(fā)現(xiàn)研究組的UA-RI、UA-PI及UA-S/D均較對照組高,且研究組脂聯(lián)素mRNA表達(dá)量與UA-S/D及孕婦BMI均呈正相關(guān);研究組UA-S/D與發(fā)病孕周、新生兒出生體重及分娩孕周均呈負(fù)相關(guān),其原因可能是子癇前期損傷血管內(nèi)皮功能,引發(fā)胎盤絨毛小動脈發(fā)生痙攣、血管腔狹窄、水腫及梗死,導(dǎo)致胎盤絨毛毛細(xì)血管面積顯著下降,影響胎盤的正常功能,減少了臍動脈舒張末期血流量,使UA-RI升高,引發(fā)子宮肌層及蛻膜層血管硬化,進(jìn)而出現(xiàn)大片胎盤絨毛水腫及胎盤小葉梗死,減少營養(yǎng)供給,從而影響宮內(nèi)胎兒的生長發(fā)育。

        綜上所述,重度子癇前期孕婦胎盤組織的脂聯(lián)素mRNA、蛋白表達(dá)量及胎兒臍動脈超聲血流指數(shù)均顯著增加,提示圍產(chǎn)兒產(chǎn)生不良結(jié)局幾率較大。重度子癇前期孕婦分娩孕周較正常妊娠孕婦明顯下降,而胎兒臍動脈超聲血流指數(shù)與孕周密切相關(guān)。因此胎兒臍動脈超聲血流指數(shù)異常是因重度子癇前期孕婦孕周下降引起的,亦或是因重度子癇前期的發(fā)病而引起,目前仍未完全明確,需今后排除孕周的影響以進(jìn)一步分析。

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