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        木犀草素的測定與分析

        2019-10-14 04:15:51范娜
        西部論叢 2019年20期
        關(guān)鍵詞:黃酮

        黃酮類化合物在植物界分布很廣,是一類重要的天然有機化合物,約20%的植物都含有黃酮類化合物,例如銀杏葉中富含蘆丁,山楂中槲皮素含量較高,木犀草素是白毛夏枯草或青蘭的有效成分。常見的黃酮類物質(zhì)有蘆丁、槲皮素、桑色素,木犀草素等。

        1、木犀草素的介紹

        木犀草素為黃色針狀結(jié)晶,熔點228℃~230℃,分子式為C15H10O6,分子量為286.24,木犀草素化學(xué)名為3,4,5,7-四羥基黃酮。因最初從木犀草科木犀草屬草本植物木犀草的葉、莖、枝中分離出而得名,是一種天然色素組分。可溶于甲醇、乙醇、乙醚等有機溶劑及堿性溶液,微溶于熱水,溶于濃硫酸生成鋅鹽,呈暗紅黃色。木犀草素分子因存在酚羥基,故其水溶液呈微弱酸性,木犀草素能與鐵、鎂、鈣、銅、鋁、鋯等金屬離子生成帶色絡(luò)合物,是一種重要黃酮化合物,在自然界以糖甙型或游離型存在。木犀草素在自然界分布廣泛,目前發(fā)現(xiàn)主要存在于金銀花、菊花、荊芥、白毛夏枯草、洋薊、紫蘇屬、黃芩屬等天然藥物和芹菜、甜椒、辣椒、落花生等蔬菜果實中,其它如橄欖油和紅酒及野鳳仙花、百里香草、唇形科植物筋骨草等也含有木犀草素。

        2、木犀草素生理功能

        (1)抗氧化:體內(nèi)存在許多清除自由基和抑制自由基物質(zhì),使體內(nèi)自由基生成和消除維持相對平衡。以木犀草素等為代表黃酮類化合物具有自由基清除劑作用,它主要通過酚羥基與自由基反應(yīng)生成較穩(wěn)半醌式自由基,從而終止自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。

        (2)抑菌:一定濃度木犀草素可抑制葡萄球菌、枯草桿菌、啤酒酵母和大腸桿菌生長,對卡他菌、白色念珠菌、變形桿菌也有抑制作用,可用作食品防腐保鮮劑。

        (3)抗炎:木犀草素具有抗炎癥作用,炎癥發(fā)生與體內(nèi)T細胞、B細胞、NK細胞、巨噬細胞等密切相關(guān),木犀草素等黃酮類化合物抗炎主要通過影響細胞分泌過程、有絲分裂基細胞間相互作用及減少殺傷性T細胞產(chǎn)生而起效。

        (4)抗腫瘤:木犀草素誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡作用主要是通過靶向調(diào)節(jié)細胞生長中信號轉(zhuǎn)遞、基因表達、酶活化或抑制而實現(xiàn),有較廣抗癌譜。木犀草索抗腫瘤機制,既可直接作用于腫瘤細胞干擾細胞代謝,抑制細胞生長,誘導(dǎo)或增敏細胞凋亡;還可通過增強機體免疫功能,發(fā)揮抗腫瘤作用,是一種非常有前途的潛在抗腫瘤藥物,可減少結(jié)腸癌和卵巢癌發(fā)病率。

        3、黃酮類化合物的分析方法

        紫外光譜是分析黃酮化合物的重要手段,該方法樣品需要量少,用特殊試劑使黃酮母核上一個或幾個官能團發(fā)生反應(yīng),大大增加了從紫外光譜上得到的結(jié)構(gòu)信息的數(shù)量。大多數(shù)黃酮類化合物的紫外光譜有兩個主要吸收峰組成,其中之一出現(xiàn)在240-280nm范圍內(nèi)(帶Ⅱ),另一個在300-400nm范圍內(nèi)(帶Ⅰ)。一般來說帶Ⅱ是A環(huán)苯酰系統(tǒng)引起,而帶Ⅰ則是B環(huán)肉桂酰系統(tǒng)引起。將果茶樣品經(jīng)由乙醚浸泡除雜,用甲醇索式抽提,并以蘆丁為對照品,采用吸光光度法測定總黃酮的含量。

        分光光度法,以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品,通過三氯化鋁等衍生體系,分別在412nm和499nm處測定枳具子總黃酮含量。采用光譜法在抗壞血酸存在下直接檢測槲皮素,通過優(yōu)化溶劑、pH 、波長等實驗條件,大大提高了槲皮素的檢測限?;贜aOH 堿性介質(zhì)中鐵氰化鉀可以直接氧化蘆丁和桑色素產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光,建立了高效液相色譜分離柱,采用化學(xué)發(fā)光法測定桑葉中蘆丁和桑色素含量,取得了很好的效果。采用電化學(xué)檢測毛細管電泳法同時測定了蘆丁和槲皮素,研究了緩沖液濃度、注射時間、檢測電位對測定的影響,并成功用于中草藥中蘆丁和槲皮素的測定。采用β-環(huán)糊精修飾區(qū)帶毛細管電泳-內(nèi)標(biāo)定量法分析槐花和槐米中蘆丁和槲皮素。在優(yōu)化實驗條件下,蘆丁和槲皮素在7min內(nèi)得到基線分離。該方法分析實際樣品對槐花和槐米的藥用開發(fā)具有重要的參考價值。各種分析方法都發(fā)揮了積極的作用,但仍然存在一定問題。一般來說,光譜法雖然簡單,但靈敏度不夠高,容易受到有色物質(zhì)的干擾;色譜法在多組分分離上具有很大優(yōu)勢,但是色譜柱的制備一般比較麻煩,而且儀器操作復(fù)雜,成本較高。鑒于黃酮類化合物的分子結(jié)構(gòu)中具有電活性基團-酚羥基,特別是B環(huán)上的酚羥基,易脫氫失去電子被還原,適宜采用電化學(xué)方法進行檢測。該方法成本低、操作簡便、響應(yīng)迅速、靈敏度高。關(guān)于黃酮類的電化學(xué)研究正成為人們關(guān)注的熱點。以滴汞電極為工作電極,應(yīng)用線性掃描和循環(huán)伏安法研究了蘆丁的電化學(xué)行為,以滴汞線性掃描法測定甘草內(nèi)黃酮的含量,靈敏度及準(zhǔn)確度均明顯提高,結(jié)果令人滿意。當(dāng)然,電化學(xué)法也存在一些不足,最主要的電極的重復(fù)性和穩(wěn)定性有待提高。尤其是汞電極法,其電極毒性已經(jīng)使該方法應(yīng)用逐漸減少。盡管如此,通過采用新材料對電極表面進行修飾,改善電極的穩(wěn)定性、重復(fù)性,提高電極的靈敏度、選擇性,在現(xiàn)有方法的基礎(chǔ)上,化學(xué)修飾電極必將發(fā)揮重要的作用。

        黃酮類化合物在治療各種疾病,改善飲食結(jié)構(gòu)、提高生活質(zhì)量方面發(fā)揮了越來越大的作用。因此,對天然產(chǎn)物和藥品中黃酮類物質(zhì)的檢測具有很大的實際意義,人們正積極進行這方面的研究。

        作者簡介:范娜,出生于1986年5月1日,山東省壽光市人,大學(xué)本科,主要研究方向是化工。

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