陸小玲

214500江蘇省靖江市第二人民醫(yī)院結(jié)核科，江蘇鎮(zhèn)江

耐多藥結(jié)核分枝桿菌的出現(xiàn)為臨床治療結(jié)核病增加了難度，治療結(jié)核的藥物選擇依賴于藥敏試驗結(jié)果，因傳統(tǒng)藥敏試驗所需要的時間較長，臨床醫(yī)生多采用常規(guī)一線抗結(jié)核藥物進行治療，在經(jīng)驗治療過程中耐多藥結(jié)核分枝桿菌應(yīng)用常規(guī)抗結(jié)核藥物無效，最終導(dǎo)致病情延誤[1]。臨床中急需快速準確的藥敏試驗篩查耐多藥結(jié)核分枝桿菌，從而盡早制定有效的臨床治療方案。Xpert MTB/RIF也被簡稱為Xpert法，是一種基因擴增技術(shù)，被用于檢測結(jié)核分枝桿菌DNA 和利福平耐藥基因，檢測過程在一個反應(yīng)盒中進行，檢測時間均不超過2 h，能夠有效提高利福平耐藥性的特異性和靈敏度[2]。本次研究收集80 例痰標本培養(yǎng)檢出結(jié)核分枝桿菌菌株，用Xpert MTB/RIF和藥敏試驗進行檢測，以藥敏試驗作為金標準評價Xpert法檢測耐藥性準確性。

資料與方法

收集我院2017年8月-2018年12月進行痰培養(yǎng)檢出結(jié)核分枝桿菌菌株80例。

儀器和試劑：采用Xpert MTR/RIF反應(yīng)盒、GeneXpert檢測系統(tǒng)、SR痰培養(yǎng)處理液，檢測儀器為全自動分枝桿菌檢測藥敏系統(tǒng)，MGIT 分枝桿菌培養(yǎng)管，MGIT藥敏試劑盒。

檢測方法：采用Xpert MTB/RIF檢測和結(jié)核液體藥敏試驗檢測，比較2 種診斷檢測方法對利福平耐藥性陽性檢出率的一致性，利福平耐藥結(jié)核桿菌診斷指標的可行性。患者充分漱口后用力咳痰，收集下呼吸道痰液并及時送樣檢查，一式三份，分別采用抗酸染色涂片鏡檢、Xpert MTB/RIF 技術(shù)檢測、羅氏固體培養(yǎng)法檢測?？顾崛旧科土_氏土體培養(yǎng)檢測相關(guān)試劑均由儀器供應(yīng)商提供，并參考《結(jié)核病實驗室標準化操作與網(wǎng)絡(luò)建設(shè)》中的相關(guān)規(guī)程[3]，Xpert MTB/RIF 檢測試劑由儀器廠家提供，參照說明書步驟嚴格操作。

臨床觀察：比較抗酸染色涂片鏡檢、Xpert MTB/RIF 技術(shù)檢測、羅氏固體培養(yǎng)法檢測利福平耐藥性陽性檢出率[4]。

統(tǒng)計學(xué)方法：數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 2.1軟件處理；計數(shù)資料以[n(%)]表示，采用χ2檢驗；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

表1 3種檢驗方法檢出陽性率比較

結(jié) 果

80 份痰樣本，抗酸染色涂片法檢測，陽性率為31.25%；羅氏固體培養(yǎng)法檢測，陽性率為37.5%；Xpert MTR/RTF法檢測，陽性率為41.25%。Xpert MTR/RTF 法陽性檢出率明顯高于抗酸染色涂片法和羅氏固體培養(yǎng)法，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

討 論

肺結(jié)核為發(fā)病率較高的傳染性疾病，全球的感染率和死亡率均較高，直接威脅人類健康和生命安全，是醫(yī)學(xué)界關(guān)注的重點問題[5]。世界衛(wèi)生組織在《全球結(jié)核病報告》中指出，我國肺結(jié)核患者數(shù)量在全球范圍內(nèi)較高，我國肺結(jié)核病的防治工作依然是我國公共衛(wèi)生的重要部分。

結(jié)核分枝桿菌是導(dǎo)致結(jié)核病的主要病原微生物，其可侵犯全身各器官，以肺部感染患者數(shù)量最多。結(jié)核分枝桿菌的生長速度較慢，在感染后18 h 才能分裂一代，而大多數(shù)細菌在幾分鐘或幾十分鐘就可分裂一代，導(dǎo)致結(jié)核桿菌因起病較慢而被臨床患者所忽略，結(jié)核桿菌這一特點為臨床檢驗帶來困難。目前對結(jié)核病檢驗的實驗室方法多種多樣，但臨床檢驗效果并不一致，在《全國結(jié)核病防治規(guī)劃》中指出[6]，通過應(yīng)用新方法和新技術(shù)提高患者臨床檢出水平，對結(jié)核病的傳播和疾病管理起到重要作用。目前結(jié)核病的診斷傾向于“眼見為實”的細菌學(xué)檢查和影像學(xué)檢查方法?？顾崛旧R檢查是最基礎(chǔ)和最有效的診斷方法，但是該種方法的靈敏度較低，一般在20%～30%；熒光染色法鏡下檢測的靈敏度較高，但由于檢測儀器價格較昂貴不能在臨床中廣泛普及。涂片鏡下檢測方法的特異性和敏感性波動較大，無法區(qū)別死菌或活菌。羅氏固體培養(yǎng)檢測法是目前結(jié)核病診斷的金標準，通常臨床檢測多采用涂片鏡下檢測方法作為臨床用藥依據(jù)，但是涂片檢測培養(yǎng)時間較長，需要4～8 周才能得出結(jié)果，臨床實用型較差，并且陽性率僅在40%左右。另外細菌學(xué)檢查還對檢測人員和環(huán)境的生物安全構(gòu)成威脅。

近些年隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，該技術(shù)給結(jié)核病的檢查帶來了新方向，Xpert MTB/RIF 檢測作為結(jié)核病的主要診斷方法，通過熒光定量PCR技術(shù)，實現(xiàn)對結(jié)核桿菌的快速檢測并進行定量分析，并且對利福平耐藥情況給予參考，整個檢測結(jié)果在2 h 內(nèi)完成，人工操作時間不超過5 min，并且檢測均在密封環(huán)境中進行，減少了檢測操作者和對環(huán)境生物性的影響，提高了檢測安全性。本次研究結(jié)果顯示，80 份痰樣本，Xpert MTR/RTF 法陽性檢出率明顯高于抗酸染色涂片法和羅氏固體培養(yǎng)法。說明Xpert MTR/RTF法在肺結(jié)核快速診斷中具有較好的效果，并且陽性檢出率高于抗酸染色檢測方法。

綜上所述，Xpert MTB/RIF 檢測肺結(jié)核患者痰樣本的敏感性較高，效果明顯優(yōu)于羅氏固體培養(yǎng)法和抗酸染色涂片法，利于臨床診斷和治療，值得在臨床中廣泛應(yīng)用。