雷 瀟， 陳定安， 吳勝蓮， 邵晨霞， 唐少軍， 賀月林， 許 雋*

(1.湖南省微生物研究院， 湖南 長沙 410009； 2.常德市鼎城區(qū)農(nóng)業(yè)科學研究所， 湖南 常德 415100)

秀珍菇(Pleurotusgeesteranus)別稱袖珍菇、環(huán)柄側(cè)耳及小平菇等，屬擔子菌綱傘菌目側(cè)耳科側(cè)耳屬[1]。秀珍菇不僅肉質(zhì)脆嫩，纖維含量少，味道鮮美，且營養(yǎng)豐富，富含優(yōu)質(zhì)菌體蛋白和人體所需的17種氨基酸及多種微量元素，其所含多醣體被證實具有抗腫瘤的功能，是一種營養(yǎng)價值較高的藥食用菌[2-3]。目前，秀珍菇夏季規(guī)模栽培發(fā)展迅速，但市場上缺乏穩(wěn)定的秀珍菇高溫品種，同時受棉籽殼、木屑等原料成本價格上升的影響，栽培秀珍菇的利潤普遍較低[4-6]。關(guān)于秀珍菇種質(zhì)資源和栽培配方的研究已有文獻報道。秦延春等[7]通過比較7個秀珍菇菌株的菌絲生長、出菇溫度及子實體形態(tài)等生物學特性發(fā)現(xiàn)，羅秀1號菌株適宜在桂東南地區(qū)推廣栽培。閆靜等[8]比較11個秀珍菇菌株的栽培特性發(fā)現(xiàn)，福建羅源秀珍菇、秀珍菇188和秀珍菇195適宜夏季設施栽培。李維煥等[9]綜合比較12個秀珍菇菌株的生長特性發(fā)現(xiàn)，魯大秀珍1號的菌絲生長、發(fā)菌速度、污染率、生物轉(zhuǎn)化率及子實體等農(nóng)藝性狀均表現(xiàn)良好，適宜在當?shù)赝茝V栽培。王燦琴等[10]從引進的13個高溫秀珍菇菌株中篩選出菌株1672、夏秀990、LO-6、LO-4和LO-5等5個適合桂南地區(qū)推廣栽培的優(yōu)良新菌株，并淘汰當?shù)卦耘嗟木昊?005和黑側(cè)五。黃卓忠等[3]從保存及引進的7個秀珍菇高溫菌株中篩選出菌絲生長快、長勢旺，菇形及商品性好，生物學效率高，綜合表現(xiàn)好，且適宜在南寧地區(qū)推廣種植的菌株平菇P54、夏豐一號及基因2005。薛璟等[11]研究發(fā)現(xiàn)，木薯渣(酒糟)和醋糟渣作為主要培養(yǎng)原料栽培高溫秀珍菇的最佳配方為木薯渣60%+醋糟渣30%+麩皮10%+水分65%，pH 7～7.5 ，在此條件下，菌絲萌發(fā)快，發(fā)菌時間較對照(棉子殼98%+石灰2%)縮短5～6 d，栽培過程中雜菌污染率低；兩潮菇的生物轉(zhuǎn)化率達107.50%，較對照(93.75%)提高13.75%。陳國龍等[12]分析培養(yǎng)料中添加棉籽殼、苦楝木屑或桑枝屑對秀珍菇生長發(fā)育及主要營養(yǎng)成分的影響。蔡志英[13]通過灰色關(guān)聯(lián)度分析秀珍菇數(shù)量性狀與麩皮用量的關(guān)系，并進行不同方法的營養(yǎng)評價。郭煒等[14-15]分析培養(yǎng)基中不同碳氮源對秀珍菇菌絲及子實體生長的影響。高為民[16]選擇不同配比的棉籽殼與木糠栽培秀珍菇，比較其經(jīng)濟效益。盧政輝[17]通過優(yōu)化雜木屑、棉籽殼等主要栽培基質(zhì)的配比，得到1個經(jīng)濟效益較高的栽培配方：陳化木屑50%+棉籽殼35%+麩皮15%。吳登等[18-20]通過添加不同比例桑枝屑栽培秀珍菇，獲得高產(chǎn)栽培配方。目前，湖南本地的秀珍菇品種耐高溫性能較差，急需選育適宜當?shù)叵募驹耘嗟男阏涔絻?yōu)良菌株。近年來，由于棉籽殼價格不斷上漲，選用棉籽殼為主料栽培食用菌的成本持續(xù)上升，所以，篩選能夠替代棉籽殼的栽培基質(zhì)具有重要意義。鑒于此，以8株不同來源的秀珍菇菌株為研究對象，采用單因素試驗與雙因素試驗相結(jié)合的方法，篩選適合夏季栽培的秀珍菇高溫品種，并在此基礎上篩選適宜高溫菌株生長的栽培配方，旨在為秀珍菇夏季規(guī)模化生產(chǎn)提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1秀珍菇8個不同來源的秀珍菇菌株，供試菌株名稱及來源詳見表1，菌株由湖南省微生物研究院菌種保藏中心提供。

1.1.2原料馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂、棉籽殼、麥麩、石灰、石膏、木屑及蓮子殼，市購。

表1秀珍菇菌株及其來源

Table 1 Source and name of testedP.Geesteranusstrains

菌株編號Serial number菌株名稱Strain name來源Source1秀26馬來西亞2秀58馬來西亞3秀珍菇168湖南(本地品種)4羅秀3號福建5川8號四川6天都8號江蘇7臺灣秀珍菇福建8杭秀1號江蘇

1.2方法

1.2.1培養(yǎng)基配制母種培養(yǎng)基(PDA)：馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂20 g和水1 000 mL。原種培養(yǎng)基：棉籽殼78%、麥麩20%、石灰1%和石膏1%。

1.2.2秀珍菇高溫菌株篩選

1) 初篩。所有供試菌株分別打孔接種在PDA試管培養(yǎng)基中，每個菌株接種10支試管，置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，測量觀察菌絲生長速率及菌絲活力(長勢和密度)；培養(yǎng)5 d 后開始定時觀察，每3 d劃線并測量，直至菌絲長滿斜面，然后接種至原種培養(yǎng)料中，分別在25℃、30℃和35℃恒溫培養(yǎng)箱中進行袋料培養(yǎng)，觀察不同培養(yǎng)溫度下的出菇情況。

2) 復篩。選取上述試驗中在35℃條件下能正常出菇的秀珍菇菌株在長沙7～8月進行高溫袋料栽培試驗，通過比較菌株原基形成時間、轉(zhuǎn)潮期和生物學轉(zhuǎn)化率篩選高溫適栽菌種。每個菌株接種100包栽培袋料，每包約1.2 kg干料。2018年夏季在栽培大棚進行袋料栽培，按常規(guī)方法進行栽培管理和出菇采收，記錄各菌株的原基形成時間和轉(zhuǎn)潮期，同時計算其生物學轉(zhuǎn)化率。

生物學轉(zhuǎn)化率=(子實體總產(chǎn)量/栽培料干料重)×100%

1.2.3栽培配方優(yōu)化以生物轉(zhuǎn)化率最高的菌株為供試菌株，以棉籽殼、木屑、蓮子殼、麥麩、石膏和石灰為栽培料，按表2的設計配制栽培料，在常規(guī)食用菌栽培條件下進行出菇試驗，通過比較秀珍菇出菇情況篩選適宜的栽培配方。

表2 秀珍菇栽培配方

2結(jié)果與分析

2.1秀珍菇的菌絲生長和出菇情況

從表3看出秀珍菇不同菌株的菌絲生長和出菇存在差異。菌絲生長速度：PDA培養(yǎng)基上2號菌株菌絲生長最快，為1.35 cm/d；5號菌株次之，為1.26 cm/d；8號菌株最慢，僅0.81 cm/d。3號菌株為湖南本地品種，其菌絲生長速度為1.05 cm/d。1號、2號和5號菌株的菌絲生長速度顯著高于3號菌株，7號和8號菌株則顯著低于3號菌株，4號、6號菌株與3號菌株間差異不顯著。菌絲活力：4號、6號、7號和8號菌株的菌絲密度較低、菌絲顏色較淡，而1號、2號、3號和5號菌株的菌絲濃密、潔白且爬壁有力。出菇溫度：25℃時8株供試菌株均能正常出菇；30℃時除6號和8號菌株外，其余菌株均能正常出菇；栽培溫度升至35℃時僅1號、2號、3號和5號菌株能夠正常出菇。因此，選取1號、2號、3號和5號菌株進行后續(xù)試驗。

表3 秀珍菇不同菌株的菌絲生長和出菇情況

注："+"表示菌絲密度稀，長勢弱；"++"表示菌絲濃密、潔白。同列不同小寫字母表示不同菌株間差異顯著(P<0.05)，下同。

Note: "+" and "++" indicate weak growth vigor of mycelium with low density and white mycelium with dense density respectively. Different lowercase letters in the same column indicate significance of difference between differentP.Geesteranusstrains. The same below

2.2秀珍菇的出菇特性和產(chǎn)量

從表4看出秀珍菇不同菌株的出菇特性和產(chǎn)量存在差異。1號和2號菌株原基形成時間較短，為26 d；3號菌株最長，為33 d。1號和2號菌株的原基形成時間較3號和5號菌株顯著縮短；5號菌株的原基形成時間也顯著短于3號菌株。4個菌株的轉(zhuǎn)潮時間在5～7 d，相互間無顯著差異。產(chǎn)量以2號菌株的最高，為1.12 kg/袋；1號和5號菌株其次，分別為1.09 kg/袋和1.06 kg/袋；3號菌株最低，僅0.92 kg/袋。1號、2號和5號與3號菌株間差異顯著。1號和2號菌株的生物學轉(zhuǎn)化率較高，分別為91.2%和93.3%，顯著高于其余2個菌株；5號菌株次之，為88.3%，顯著高于3號菌株；3號菌株最低，僅76.7%。綜合看，選取2號菌株(秀58)進行后續(xù)栽培配方優(yōu)化試驗。

表4 秀珍菇不同菌株的出菇特性和產(chǎn)量

2.3秀珍菇栽培配方優(yōu)化

從表5看出，秀58的產(chǎn)量以配方D最高，為1.31 kg/袋；配方E其次，為1.23 kg/袋；配方B最低，僅1.02 kg/袋。配方D和配方E的產(chǎn)量顯著高于其余配方，較CK分別提高24.76%和17.14%；配方C和配方F的產(chǎn)量顯著高于配方A，分別較CK提高10.48%和7.62%。生物學轉(zhuǎn)化率以配方D和配方E的最高，分別為109.2%和102.8%，二者均顯著高于其余配方；其次是配方C和配方F分別為96.7%和94.2%；配方A和配方B的較低，僅為87.5%和85.0%。鮮菇雜菌污染率以配方B和配方F的較高，分別為10.7%和6.8%，二者間差異顯著，且均顯著高于其余配方；其余配方的均低于5.0%，相互間差異不顯著。

表5 不同栽培配方秀58的鮮菇產(chǎn)量

3 結(jié)論與討論

菌絲生長速率、出菇溫度、原基形成時間、轉(zhuǎn)潮期和生物學轉(zhuǎn)化率是評價食用菌菌種質(zhì)量的重要指標。研究結(jié)果表明，在25℃條件下秀珍菇菌株秀26、秀58、秀珍菇168、羅秀3號和川8號的菌絲生長速率超過1.00 cm/d；在35℃高溫條件下僅菌株秀26、秀58、秀珍菇168和川8號能正常出菇。高溫袋料栽培試驗結(jié)果顯示，菌株秀26和秀58較秀珍菇168(湖南本地品種)原基形成時間縮短4 d，生物學轉(zhuǎn)化率提高14.5%～16.6%，說明，菌株秀26和秀58適宜湖南夏季栽培。出菇試驗結(jié)果表明，采用60%蓮子殼+23%棉籽殼和60%蓮子殼+23%木屑作栽培主料，并配以15%麥麩、1%石膏和1%石灰，秀珍菇秀58的生物學轉(zhuǎn)化率最高，分別為109.2%和102.8%，產(chǎn)量分別為1.31 kg/袋和1.23 kg/袋，污染率分別為3.9%和5.0%。

篩選得到適宜湖南夏季設施化栽培的秀珍菇優(yōu)良菌株秀26和秀58，并對菌株秀58的高產(chǎn)栽培配方進行優(yōu)化。今后還將進一步通過原生質(zhì)體融合、ARTP誘變等技術(shù)選育秀珍菇高溫品種，以促進秀珍菇在湖南夏季的規(guī)?；a(chǎn)發(fā)展。