蔣偉燕，林湘，余玲玲，李綿綿，宓恬，陳小劍

（1.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院育英兒童醫(yī)院 臨床檢驗(yàn)中心，浙江 溫州 325027；2.平陽縣第二人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，浙江 溫州 325405）

妊娠期間隨著胎兒的生長、發(fā)育，孕婦體內(nèi)會(huì)發(fā)生一系列的生理變化，這些變化會(huì)影響母體的造血功能，從而引起血液中某些成分的改變[1]，比如外周血白細(xì)胞、血小板等。目前，我國各級(jí)醫(yī)院均使用正常非孕成人的血小板參數(shù)作為評(píng)價(jià)孕期血小板變化的依據(jù)，且在已發(fā)表的報(bào)道中其參考區(qū)間存在很大差異[2]，無法準(zhǔn)確評(píng)估孕期狀態(tài)，給產(chǎn)科醫(yī)師的臨床決策帶來了很多不確定性[3]。本研究通過分析不同孕周妊娠婦女與健康非妊娠婦女外周血血小板參數(shù)的變化，確定其95%CI，以期為產(chǎn)科醫(yī)師的臨床決策提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 一般資料 收集溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院育英兒童醫(yī)院2016年10月至2018年10月產(chǎn)科門診進(jìn)行產(chǎn)前檢查的正常妊娠婦女1 272例，排除基礎(chǔ)疾病，無心、肺、肝、腎病及血液病等病史者。年齡20～30（26.2±2.5）歲。其中早期妊娠組（≤12周）348例，中期妊娠組（13～27周）369例，晚期妊娠組（≥28周）555例，中晚期妊娠組共924例。對(duì)照組為健康未妊娠婦女200例，年齡20～30（25.4±3.0）歲。同時(shí)收集同期來院檢查的重度子癇前期婦女88例和妊娠期糖尿病婦女100例，2組孕婦既往無糖尿病、高血壓、心臟病、高脂血癥、血液病等病史，重度子癇前期和妊娠期糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《婦產(chǎn)科學(xué)》第6版[4]。

1.2 標(biāo)本采集和檢測(cè)方法 參照《中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》WS/T 405-2012文件和CLSI的推薦[5]，真空采集2 mL靜脈血于1.5 g/L乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）抗凝管中，室溫保存，采用Sysmex XE-5000全自動(dòng)血液分析儀CBC+DIFF+RET模式項(xiàng)于2 h內(nèi)檢測(cè)外周血血小板計(jì)數(shù)（platelet count，PLT）、未成熟血小板分?jǐn)?shù)（immature platelet fraction，IPF）、未成熟血小板絕對(duì)值（absolute value of immature fraction，IPF#）、高熒光強(qiáng)度未成熟血小板分?jǐn)?shù)（high-fluorescence intensity of immature platelet fraction，H-IPF）和血小板平均側(cè)向熒光強(qiáng)度（mean side fluorescence intensity of platelet，PLT-X）。本研究經(jīng)溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院育英兒童醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且所有患者均簽署知情同意書。

1.3 儀器和試劑 應(yīng)用SYSMEX XE-5000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀、聚次甲基染料、氨丁三醇緩沖液、鞘液、質(zhì)控等均為原裝配套試劑，由日本Sysmex公司提供。對(duì)SYSMEX XE-5000全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀用配套校準(zhǔn)品按校準(zhǔn)程序校準(zhǔn)，使結(jié)果和靶值偏差在可允許范圍內(nèi)，即用配套的高值、中值和低值質(zhì)控物進(jìn)行測(cè)試，所分析的參數(shù)都在范圍內(nèi)。儀器每日測(cè)試前均做本底檢測(cè)和質(zhì)控，在質(zhì)控通過后進(jìn)行檢測(cè)。

1.4 極值的處理方法 按照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（CLSI）C28-A2的D/R規(guī)則判斷極值是否來自同一質(zhì)體，D=全部數(shù)據(jù)最大（?。┲?臨床最大（小）值，R=全部數(shù)據(jù)最大值-全部數(shù)據(jù)最小值。若D/R＜1/3則保留極值，證明來源于同質(zhì)個(gè)體；若D/R＞1/3則去除極值，用同樣的方法再對(duì)臨近極值進(jìn)行處理。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法 采用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。用K-S檢驗(yàn)對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)。正態(tài)分布資料用表示，多組間比較用單因素方差分析，組間兩兩比較用LSD-t法；若數(shù)據(jù)資料為正態(tài)分布，以95%CI估計(jì)其醫(yī)學(xué)參考值范圍，95%雙側(cè)界值為：P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 妊娠組和對(duì)照組的外周血PLT、IPF、IPF#、H-IPF和PLT-X比較 妊娠組的PLT低于對(duì)照組，而IPF、IPF#、H-IPF和PLT-X各參數(shù)高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表1。

2.2 不同妊娠期婦女外周血的PLT、IPF、IPF#、HIPF和PLT-X比較 晚期妊娠組的IPF、IPF#和PLTX高于中期和早期妊娠組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；中期妊娠組的IPF、IPF#和PLT-X高于早期妊娠組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；早期和中期妊娠組的PLT和H-IPF比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；晚期妊娠組的PLT低于早期和中期妊娠組，H-IPF高于早期和中期妊娠組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見表2。

表1 妊娠組和對(duì)照組外周血血小板參數(shù)比較（±s）

表1 妊娠組和對(duì)照組外周血血小板參數(shù)比較（±s）

與對(duì)照組比：aP ＜0.05

2.3 妊娠合并糖尿病組、重度子癇前期組和中晚期妊娠組的外周血PLT、IPF、IPF#、H-IPF和PLT-X比較 重度子癇前期和妊娠合并糖尿病組的PLT低于中晚期妊娠組，而IPF、IPF#、H-IPF和PLT-X各參數(shù)高于中晚期妊娠組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表3。

2.4 不同妊娠期婦女和對(duì)照組外周血PLT、IPF、IPF#、H-IPF和PLT-X參考區(qū)間 IPF、IPF#和PLT-X的參考值范圍分為早期、中期和晚期妊娠組；而PLT、H-IPF分為早中期妊娠組和晚期妊娠組。見表4。

表2 不同妊娠組外周血血小板參數(shù)比較（±s）

表2 不同妊娠組外周血血小板參數(shù)比較（±s）

與中期妊娠組比：aP ＜0.05；與早期妊娠組比：bP ＜0.05

表3 重度子癇前期婦女、妊娠合并糖尿病婦女和中晚期妊娠婦女外周血血小板參數(shù)比較（±s）

表3 重度子癇前期婦女、妊娠合并糖尿病婦女和中晚期妊娠婦女外周血血小板參數(shù)比較（±s）

與中晚期妊娠組比：aP ＜0.05

表4 不同孕期婦女和對(duì)照組血小板參數(shù)的95%CI

3 討論

血小板是人體止凝血系統(tǒng)的重要組成部分，血小板的數(shù)目反映體內(nèi)血小板生成和消耗的動(dòng)態(tài)平衡，血小板的體積反映了其代謝和功能的活躍程度。血小板相關(guān)參數(shù)IPF、IPF#、H-IPF和PLT-X體現(xiàn)了骨髓巨核細(xì)胞的血小板生成狀態(tài)[6]，能反映骨髓的血小板生成能力，在疾病診斷中應(yīng)用廣泛[7-11]。國內(nèi)外有學(xué)者作了部分地區(qū)健康人群及兒童的IPF等參考區(qū)間調(diào)查，建立了適合本地區(qū)的參考值范圍[12-14]。但在已有的關(guān)于妊娠期外周血血小板參數(shù)的相關(guān)報(bào)道的研究中，主要集中在PLT、PDW和MPV等參數(shù)，甚少涉及IPF、IPF#、H-IPF和PLT-X等參數(shù)，也沒有確定這些參數(shù)的參考區(qū)間[15-17]。

本研究通過對(duì)1 272例不同孕期婦女和200例健康未妊娠婦女的外周血PLT、IPF、IPF#、H-IPF和PLT-X進(jìn)行比較，孕期婦女的外周血PLT低于未妊娠婦女，而IPF、IPF#、H-IPF和PLT-X各參數(shù)高于未妊娠婦女。通過對(duì)早期、中期和晚期妊娠婦女外周血PLT、IPF、IPF#、H-IPF和PLT-X比較發(fā)現(xiàn)，IPF、IPF#和PLT-X均隨孕周增加而升高，而PLT和H-IPF在妊娠早期和中期變化不明顯，在妊娠晚期PLT降低，而H-IPF升高?？傮w來看，在妊娠婦女的整個(gè)孕期中外周血PLT呈下降趨勢(shì)，IPF、IPF#、H-IPF和PLT-X呈升高趨勢(shì)，故產(chǎn)科醫(yī)師在臨床決策時(shí)應(yīng)考慮孕周因素。同時(shí)，本研究將重度子癇前期婦女、妊娠合并糖尿病婦女和中晚期妊娠婦女外周血PLT、IPF、IPF#、H-IPF和PLT-X進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)重度子癇前期婦女和妊娠合并糖尿病婦女的外周血PLT低于中晚期妊娠婦女，而IPF、IPF#、H-IPF和PLT-X高于中晚期妊娠婦女，可見在妊娠中晚期檢測(cè)外周血PLT、IPF、IPF#、H-IPF和PLT-X參數(shù)有利于發(fā)現(xiàn)病理性妊娠。

通過對(duì)上述不同孕周妊娠婦女與健康非妊娠婦女外周血血小板參數(shù)變化的全面分析，可以建立其外周血PLT、IPF、IPF#、H-IPF和PLT-X的95%CI；并與SACHDEV等[18]的研究比較有些差異，原因可能與兩者研究對(duì)象的種族、年齡和性別等因素有關(guān)?？傊“逑嚓P(guān)參數(shù)隨妊娠婦女孕期的發(fā)展出現(xiàn)不同程度的變化，孕周相關(guān)外周血血小板參數(shù)參考區(qū)間可以用于評(píng)估妊娠期病理狀態(tài)，為產(chǎn)科醫(yī)師的臨床決策提供依據(jù)。