周惠健,袁靜瑤,朱 丹,李 聰,陳春梅,劉 瑞,吳滿剛,葛慶豐,于 海,3,*
(1.揚(yáng)州大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,江蘇 揚(yáng)州 225127;2.江蘇雨潤(rùn)肉食品有限公司,肉品加工與質(zhì)量控制國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 南京 211806;3.江蘇省淮揚(yáng)菜產(chǎn)業(yè)化工程中心,江蘇 揚(yáng)州 225127)
紅燒老鵝是廣受人們喜愛(ài)的熟肉制品,因其脂肪和蛋白質(zhì)含量較高,在加工和儲(chǔ)藏過(guò)程中容易腐敗變質(zhì)而影響貨架期。為延長(zhǎng)紅燒老鵝的貨架期,一般采用高溫高壓的熱殺菌方式,該方法能有效地降低微生物數(shù)量,從而延長(zhǎng)貨架期,但對(duì)食品的風(fēng)味、口感、色澤等方面會(huì)帶來(lái)不良影響。與熱殺菌方式相比,輻照可以提高食品的安全性,提升食品質(zhì)量,同時(shí)保持食品原有營(yíng)養(yǎng)[1],因此輻照被認(rèn)為是一種非常高效的冷殺菌技術(shù),在食品保鮮領(lǐng)域具有很好的應(yīng)用前景[2]。一定殺菌劑量不但能有效地降低食品中的微生物數(shù)量,還能保持食品原有的口感、色澤和風(fēng)味[3]。目前,食品輻照主要采用γ射線和電子束,γ射線具有高穿透力,對(duì)較厚的物品有良好的殺菌效果,因此γ射線用于大多數(shù)商業(yè)工廠處理預(yù)先包裝的物品[4]。Park等[4]采用電子束和γ射線在0、5、10、15、20 kGy輻照牛肉餅,結(jié)果表明,γ射線10 kGy能有效減少細(xì)菌數(shù)量,同時(shí)不影響牛肉餅的感官特征(色澤,咀嚼性及味道)和食用品質(zhì)。戴妍等[5]對(duì)比了99、108、121 ℃、微波的殺菌方式對(duì)南京鹽水鴨風(fēng)味的影響,結(jié)果表明高溫處理對(duì)鴨肉容易產(chǎn)生不良的風(fēng)味;孫承鋒等[6]研究了二次熱殺菌方式對(duì)燒肉風(fēng)味的影響,發(fā)現(xiàn)121 ℃的高溫短時(shí)殺菌或85 ℃低溫殺菌對(duì)產(chǎn)品保持較好的風(fēng)味和延長(zhǎng)貨架期更有利。Stefanova等[7]研究了γ射線在7.5、10、15 kGy三種劑量下輻照牛肉,發(fā)現(xiàn)隨著輻照劑量的增加,牛肉中不飽和脂肪酸含量減少,飽和脂肪酸含量增加。Zhang等[8]報(bào)道了1、3、5、7 kGy不同劑量的電子束對(duì)魚(yú)肉糜脂肪酸的影響,發(fā)現(xiàn)5 kGy和7 kGy的電子束照射降低了不飽和脂肪酸的含量,對(duì)反式脂肪酸的含量無(wú)影響。
國(guó)內(nèi)外對(duì)不同殺菌方式用于熟肉制品的應(yīng)用報(bào)道較少,因此本實(shí)驗(yàn)研究冷殺菌(電子束、60Co-γ射線)和熱殺菌(105、121 ℃)方式對(duì)紅燒老鵝肉脂肪氧化硫代巴比妥酸反應(yīng)物(thiobarbituric acid reactive substances,TBARS)值、脂肪酸的含量和揮發(fā)性風(fēng)味的影響,旨在為紅燒老鵝以及熟肉制品的殺菌和貯藏提供理論基礎(chǔ)。
樣品為本實(shí)驗(yàn)室已熟制并真空包裝而未殺菌的紅燒老鵝,裝袋大小長(zhǎng)寬高分別約為:13.0 cm×7.0 cm×5.0 cm。
2-硫代巴比妥酸、三氯乙酸、冰乙酸、乙醇、三氯甲烷等(均為分析純) 生工生物工程(上海)股份有限公司;三氟化硼-甲醇、無(wú)水硫酸鈉、正己烷、乙醚(均為優(yōu)級(jí)純) 中國(guó)醫(yī)藥(集團(tuán))上海化學(xué)試劑公司。
1300氣相色譜-ISQ LT質(zhì)譜儀 美國(guó)Trace公司;FOX 4000電子鼻系統(tǒng) 法國(guó)Alpha M.O.S.公司;DK-S28電熱恒溫水浴鍋 上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;DZ真空包裝機(jī) 瑞安聯(lián)源機(jī)械廠;LDX-50KBS立式電壓力蒸汽滅菌鍋 上海申安醫(yī)療器械廠;60Co-γ射線輻照(劑量率667 Gy/h) 揚(yáng)州輻照中心;電子束輻照(10 MeV電子加速器處理) 江蘇揚(yáng)州揚(yáng)??萍加邢薰?。
1.3.1 樣品處理方式
對(duì)冷卻的紅燒老鵝真空(真空度0.08 MPa)包裝后,分別用0、3、6、9、12 kGy電子束輻照,0、3、6、9、12 kGy60Co-γ射線輻照,105、121 ℃殺菌處理。真空包裝袋材質(zhì)為PET+RCPP,24.0 cm×16.0 cm,雙層厚度20 絲。具體操作為將樣品置于測(cè)試平臺(tái)上,距離輻照源500 mm,調(diào)整設(shè)備電壓、電流和時(shí)間,按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)參數(shù)進(jìn)行輻照處理;105 ℃殺菌15 min,121 ℃殺菌10 min。殺菌處理后樣品置于4 ℃條件下保存,及時(shí)測(cè)定待測(cè)指標(biāo)。將電子束3、6、9 kGy和12 kGy劑量處理組分別用D3、D6、D9、D12表示,60Co-γ射線3、6、9 kGy和12 kGy劑量處理組分別用G3、G6、G9、G12表示,0劑量處理組為對(duì)照組用CK表示。每個(gè)處理組設(shè)3 個(gè)平行樣。
1.3.2 菌落總數(shù)測(cè)定
按照GB 4789.2—2016《食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測(cè)定》[9]進(jìn)行測(cè)定。
1.3.3 TBARS值測(cè)定
參照Mielnik等[10]、賈倩[11]的方法。稱取10.0 g研磨碎的肉樣,加入30 mL 7.5%的三氯乙酸(含0.1% EDTA),用組織高速勻漿機(jī)連續(xù)均質(zhì)勻漿30 s(9 000 r/min、20 ℃),用雙層濾紙抽2 次。取濾液5 mL,加入5 mL 0.02 mol/L TBA溶液,95 ℃水浴中保持35 min,取出,用流動(dòng)冷水冷卻10 min后,移入10 mL離心管中,7 000 r/min離心5 min,取上清液,加入5 mL三氯甲烷,搖勻,靜置分層,取上清液,分別在532 nm和600 nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光度,同時(shí)做空白對(duì)照,其結(jié)果(TBARS表示為與TBA反應(yīng)的物質(zhì)的質(zhì)量)以每千克肉樣中所含丙二醛(malondialdehyde,MDA)的質(zhì)量(mg)表示,計(jì)算公式如下:
1.3.4 脂肪酸測(cè)定
參照J(rèn)o等[12]提取脂肪酸的方法稍作修改。稱取2.0 g搗碎的樣品與100 mL鄰苯三酚、2 mL乙醇和10 mL 8.3 mol/L HCl混合,在80 ℃反應(yīng)40 min。冷卻后,用乙醚萃取總脂肪,并氮?dú)獍讶軇┐蹈?。然后加? mL 7%三氟化硼-甲醇溶液和1 mL甲苯,在100 ℃下加熱45 min將已提取的脂肪中的脂肪酸甲基化。冷卻至30~40 ℃后加入12 mL色譜級(jí)異辛烷,攪拌1 min,加入4 mL飽和氯化鈉溶液,渦旋振蕩3 min,靜置30 min;加入5.0 mL超純水,靜置20 min,取上層溶液,加入1.0 g無(wú)水硫酸鈉,備用。取100 uL待測(cè)樣品,加入1 mL正己烷稀釋,混勻后用0.22 μm微孔濾膜過(guò)濾,用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行測(cè)定。
氣相色譜條件:TG-WAXMS石英毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm);程序升溫:起始溫度50 ℃,保持2 min,以4 ℃/min升溫至200 ℃,保持5 min,再以4 ℃/min升溫至220 ℃,保持20 min;載氣(He)流速1 mL/min;恒壓35 kPa;分流比10∶1,進(jìn)樣量1 μL模式操作。
質(zhì)譜條件:電子電離源,電子能量70 eV;離子源溫度200 ℃;接口溫度250 ℃;檢測(cè)器電壓450 V;發(fā)射電流150 μA;掃描范圍33~500 u。
1.3.5 電子鼻檢測(cè)方法
參照王瓊等[13]的方法稍作修改。準(zhǔn)確稱取2.0 g樣品,移入頂空萃取瓶中,加蓋壓緊封口,按順序放入電子鼻的樣品托盤中進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)條件為:頂空加熱溫度65 ℃;頂空加熱時(shí)間180 s;清洗時(shí)間120 s,延滯采集時(shí)間600 s,數(shù)據(jù)采集時(shí)間160 s;采集周期1.0 s;進(jìn)樣量500 μL/min;載氣為高純空氣,流速150 mL/min,頂空注射體積900 μL,注射速率500 μL/s。
參照GB 2726—2016《熟肉制品》[14]規(guī)定,熟肉制品檢出菌落總數(shù)應(yīng)不大于5(lg(CFU/g)),由圖1可知,不同處理組的紅燒老鵝菌落總數(shù)均小于5(lg(CFU/g)),未超出熟肉制品的安全標(biāo)準(zhǔn)。不同輻照組的菌落總數(shù)隨著輻照劑量的增大而顯著減小(P<0.05),相同劑量下的60Co-γ射線處理組的菌落總數(shù)顯著低于電子束處理組(P<0.05)。105 ℃處理組的菌落總數(shù)和G9組無(wú)顯著性差異(P>0.05),D12、G12和121 ℃處理組均未檢出有微生物。
圖1 殺菌方式對(duì)紅燒老鵝肉菌落總數(shù)的影響Fig. 1 Effect of different sterilization methods on total colony count of braised goose in brown sauce
TBARS值是通過(guò)測(cè)定脂肪次級(jí)氧化產(chǎn)物(丙二醛)多少表征脂肪的氧化程度[15]。輻照處理能提高自由基的生成速度,引發(fā)自由基的鏈?zhǔn)椒磻?yīng),進(jìn)而促進(jìn)脂質(zhì)的氧化,輻照劑量越高,自由基的生成量就越多,脂質(zhì)的氧化就越快[16]。不同殺菌方式對(duì)紅燒老鵝肉TBARS值的影響如圖2所示,隨電子束和60Co-γ射線輻照劑量的增加紅燒老鵝肉TBARS值也表現(xiàn)出增加的趨勢(shì),D9和G9組輻照后的TBARS值分別為0.59 mg/kg和0.68 mg/kg。D3、G3和105 ℃殺菌組的TBARS值更趨近于對(duì)照組,其中D3組的TBARS值與CK組無(wú)顯著性差異。121 ℃組的TBARS值顯著高于105 ℃組(P<0.05),與D9組無(wú)顯著性差異(P>0.05),表明121 ℃高溫條件加速了脂肪的氧化。另外,電子束和60Co-γ射線在9 kGy劑量輻照組的TBARS值均顯著高于12 kGy劑量組(P<0.05),這可能與樣品受到輻照劑量的大小有關(guān),本實(shí)驗(yàn)結(jié)果和賈倩等[11]研究電子束和γ射線輻照素雞的結(jié)果相似。高鵬等[17]研究了60Co-γ射線輻照對(duì)軟罐頭包裝鳳爪品質(zhì)的影響,發(fā)現(xiàn)3 kGy輻照處理組鳳爪TBARS值高于5 kGy處理組。
圖2 殺菌方式對(duì)紅燒老鵝肉TBARS值的影響Fig. 2 Effect of different sterilization methods on TBARS value of braised goose in brown sauce
總體來(lái)看,相同劑量60Co-γ射線輻照組的TBARS值顯著高于電子束處理組(P<0.05),表明60Co-γ射線輻照和電子束輻照對(duì)鵝肉油脂的氧化作用有不同的差異,本結(jié)果和賈倩[11]和Park等[4]的報(bào)道相符。汪昌保等[18]報(bào)道了電子束和60Co-γ射線輻照對(duì)豬油脂肪氧化的影響,認(rèn)為60Co-γ射線和電子束的性質(zhì)不同,60Co-γ射線是不帶電荷的高能射線,電子束則攜帶負(fù)電荷具有一定的還原作用,其在輻照過(guò)程中短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生大量自由基,可使自由基之間的耦合終止反應(yīng)發(fā)生概率增加,從而阻止了油脂的進(jìn)一步氧化,60Co-γ射線則不能阻止油脂的進(jìn)一步氧化。因此,采用60Co-γ射線輻照產(chǎn)生的脂肪氧化程度要比電子束輻照的高,如圖2中電子束和60Co-γ射線輻照鵝肉后TBARS值的變化與汪昌保等[18]研究結(jié)果相符。
肉類和肉類產(chǎn)品的脂肪含量是其保質(zhì)期和儲(chǔ)存穩(wěn)定性的主要決定因素,同時(shí)也影響著其他的品質(zhì)特性,如風(fēng)味、口感、嫩度等。不同殺菌方式對(duì)紅燒老鵝肉脂肪酸的影響如表1所示,不同殺菌方式下的紅燒老鵝肉共檢出15 種脂肪酸,其中飽和脂肪酸有4 種,單不飽和脂肪酸有5 種,多不飽和脂肪酸6 種。含量最多的脂肪酸依次為油酸(C18:1n9c)、棕櫚酸(C16:0)、亞油酸(C18:2n6c)和硬脂酸(C18:0)。與對(duì)照組相比,從飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸的含量看,電子束和60Co-γ射線處理后兩者含量均隨輻照劑量的升高而呈增加的趨勢(shì),105 ℃組飽和脂肪酸含量顯著高于121 ℃組(P<0.05),而105 ℃組單不飽和脂肪含量顯著低于121 ℃組(P<0.05);從多不飽和脂肪酸的含量看,電子束和60Co-γ射線處理組均隨輻照劑量的升高而呈減少的趨勢(shì),105 ℃組顯著高于121 ℃組(P<0.05)。其中,G12組飽和脂肪含量(41.82%)顯著高于其他組(P<0.05),G12和121 ℃組單不飽和脂肪酸含量(45.68%和46.83%)顯著高于其他組(P<0.05),CK組多不飽和脂肪酸含量(22.93%)顯著高于其他組(P<0.05)。
表1 殺菌方式對(duì)紅燒老鵝肉脂肪酸的影響Table 1 Effects of different sterilization methods on fatty acid composition of braised goose in brown sauce%
脂質(zhì)氧化是一個(gè)相當(dāng)復(fù)雜的過(guò)程,與脂肪酸的不飽和程度密切相關(guān),其中氫過(guò)氧化物和其他氧化產(chǎn)物由多不飽和脂肪酸氧化產(chǎn)生[19]。由于輻射,不飽和脂肪酸轉(zhuǎn)化為脂肪酸氫過(guò)氧化物進(jìn)而影響脂肪酸的組成[7],高能量輻照對(duì)脂質(zhì)的直接影響或通過(guò)形成自由基加速三?;视椭胁伙柡椭觉;淖詣?dòng)氧化,致使脂質(zhì)發(fā)生氧化。而脂質(zhì)氧化速率取決于雙鍵的數(shù)量和位置,脂肪酸的不飽和度越高,輻射處理時(shí)對(duì)脂質(zhì)氧化的敏感性就越高[20-21]。Bhattacharjee等[22]研究表明輻射處理后,飽和脂肪酸總量的增加可能是由于不飽和脂肪酸的氧化。由表1可知,電子束或γ射線輻照后多不飽和脂肪酸的含量隨著輻照劑量的增加而表現(xiàn)出減少的趨勢(shì),其中亞油酸的含量變化較為顯著。亞油酸分子中9、10與12、13位碳原子之間各有一個(gè)雙鍵的多不飽和脂肪酸,由于含有較多的不飽和鍵,易自動(dòng)氧化或受單線態(tài)氧的進(jìn)攻形成過(guò)氧化物[23-24]。Gecgel[25]研究了不同劑量的γ射線輻照肉丸,飽和脂肪酸的含量隨輻照劑量的增加而增加,多不飽和脂肪酸含量則隨輻照劑量的增加而表現(xiàn)出降低,此結(jié)果與本研究相一致。
將不同方式殺菌的樣品通過(guò)電子鼻檢測(cè)分析,利用電子鼻設(shè)備中配備的18 個(gè)傳感器檢測(cè)得到的氣味信號(hào),通過(guò)電子鼻自帶的軟件對(duì)獲得的氣味信號(hào)分析得到信號(hào)數(shù)據(jù)進(jìn)行PCA。由圖3可知,PC1和PC2的貢獻(xiàn)率分別為95.75%和2.27%,兩者累計(jì)貢獻(xiàn)率為98.02%,大于85%,表明PC1和PC2包含的信息量基本能夠反映樣品的整體信息特征。PCA圖中橫坐標(biāo)或縱坐標(biāo)的方差貢獻(xiàn)率越大,樣品間在橫坐標(biāo)或縱坐標(biāo)上的距離越大,其差異也越大[13,26]。圖3中主成分1的方差貢獻(xiàn)率遠(yuǎn)大于主成分2的方差貢獻(xiàn)率,樣品間在橫坐標(biāo)上的距離越大,其差異也就越大。
D6、G6、D12和D9、G9、G12在橫坐標(biāo)上間隔較遠(yuǎn),說(shuō)明這兩者在風(fēng)味上有一定的差異。D3、G3、105 ℃和CK處理組的樣品相距接近,說(shuō)明這4 個(gè)處理組的樣品揮發(fā)性風(fēng)味可能相差不大,然而由圖2可知,這4 個(gè)處理組TBARS值大小也比較接近,由此可見(jiàn),這4 個(gè)處理組的風(fēng)味可能與TBARS值變化有關(guān)。脂質(zhì)氧化會(huì)產(chǎn)生一系列的次級(jí)產(chǎn)物,導(dǎo)致氫過(guò)氧化物的降解和各種化合物的形成,包括TBARS值和揮發(fā)性化合物,其中一些揮發(fā)性醛,如己醛或2,4-癸二烯醛,對(duì)肉品風(fēng)味的變化起到重要作用[19,27]。而脂質(zhì)氧化容易產(chǎn)生多不飽和脂肪酸,氧化程度與輻照劑量呈正比,不飽和脂肪酸經(jīng)輻照后形成的自由基和氫過(guò)氧化物易攻擊氨基酸側(cè)鏈,產(chǎn)生揮發(fā)性羰基類化合物[28]。此外,輻照會(huì)促使肉品中蛋白質(zhì)側(cè)鏈氧化或骨架斷裂產(chǎn)生揮發(fā)性化合物,如羰基、硫醇、亞砜類化合物[2],輻照也能促使氨基酸降解產(chǎn)生揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì),其對(duì)氨基酸的降解不僅發(fā)生在側(cè)鏈,而且發(fā)生在氨基和羧基上[29-30]。Feng等[31]研究表明,輻照堿性基團(tuán)的氨基酸會(huì)產(chǎn)生乙醛,乙醇和乙酸乙酯等揮發(fā)性化合物,輻照含硫氨基酸基團(tuán)會(huì)產(chǎn)生乙硫醇、乙酸甲酯、2-丙酮和丙酸甲酯等揮發(fā)性化合物,這些反應(yīng)可能是肉品經(jīng)不同劑量輻照后風(fēng)味有所不同的重要原因。121 ℃處理組的鵝肉在PCA圖的位置離其他樣品較遠(yuǎn),這可能是高溫處理下,紅燒老鵝肉的風(fēng)味發(fā)生失真的變化,與其他樣品差異比較大。戴妍等[5]研究了不同殺菌溫度對(duì)南京鹽水鴨產(chǎn)品風(fēng)味變化,表明108 ℃組的鴨肉更接近鹽水鴨的原有風(fēng)味,而121 ℃組的鹽水鴨感官評(píng)分較低,偏離鹽水鴨原有風(fēng)味,其研究結(jié)果與本研究相符。
圖3 不同殺菌方式的紅燒老鵝肉揮發(fā)性風(fēng)味成分的PCA圖Fig. 3 PCA plot of volatile flavor components of braised goose in brown sauce treated with different sterilization methods
不同殺菌方式下的11 個(gè)樣品,將電子鼻中18 個(gè)不同傳感器對(duì)氣味的響應(yīng)值制成雷達(dá)圖譜,觀察不同樣品在同一個(gè)傳感器上的差異,傳感器對(duì)氣味的響應(yīng)值較高,響應(yīng)值差異越大,對(duì)揮發(fā)性氣味的區(qū)分效果越好。由圖4可知,不同殺菌樣品在同一傳感器上表現(xiàn)出顯著差異,尤其是傳感器P30/2、P40/2、P30/1、PA/2、T70/2、P40/1、P10/2、P10/1、TA/2、T30/1。結(jié)合表2可知,傳感器P30/2、P40/2、P30/1、T70/2、P40/1、P10/1、T30/1對(duì)應(yīng)的敏感物質(zhì)為硫化氫、酮、氨、乙醇、甲苯、二甲苯、氯化氫等,這些傳感器對(duì)紅燒老鵝的揮發(fā)性氣味的響應(yīng)值較高,且差異也比較明顯,因此能較好反應(yīng)不同殺菌方式對(duì)紅燒老鵝揮發(fā)性氣味的差異,可以作為紅燒老鵝揮發(fā)性氣味差異的特征傳感器。而傳感器PA/2、P10/2、TA/2對(duì)應(yīng)的敏感物質(zhì)為乙醇、氨、胺類、碳?xì)浠衔锏龋@些傳感器對(duì)揮發(fā)性氣味的響應(yīng)值較低,在一定程度上對(duì)不同殺菌方式揮發(fā)性氣味變化的影響起到輔助作用。
表2 傳感器及其對(duì)應(yīng)敏感物質(zhì)類型[32]Table 2 Types of sensors and corresponding sensitive compounds
圖4 不同殺菌方式下紅燒老鵝的電子鼻數(shù)據(jù)雷達(dá)圖Fig. 4 Radar fi ngerprinting of electronic nose data with different sterilization methods
不同殺菌方式對(duì)真空包裝的紅燒老鵝肉的脂肪酸和揮發(fā)性風(fēng)味有顯著影響,高劑量的電子束和60Co-γ射線以及高溫能加速紅燒老鵝肉脂質(zhì)的氧化,9 kGy劑量的60Co-γ射線對(duì)紅燒老鵝TBARS值的影響最為顯著;與對(duì)照組相比,飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸的含量隨電子束或60Co-γ射線輻照劑量的增加而增加,105 ℃組飽和脂肪酸含量顯著高于121 ℃組,而105 ℃組單不飽和脂肪含量顯著低于121 ℃組;多不飽和脂肪酸的含量則隨電子束或60Co-γ射線輻照劑量的增加而減少,105 ℃組多不飽和脂肪酸含量顯著高于121 ℃組;電子束3 kGy、60Co-γ射線3 kGy和105 ℃組與空白組的風(fēng)味差異較小,電子鼻傳感器P30/2、P40/2、P30/1、T70/1、P40/1、P10/1、T30/1對(duì)紅燒老鵝的揮發(fā)性氣味的響應(yīng)值較高,且差異也比較明顯,能較好反映不同殺菌方式對(duì)紅燒老鵝揮發(fā)性氣味的差異,可以作為紅燒老鵝揮發(fā)性氣味差異的特征傳感器。因此,低劑量(<6 kGy)電子束,60Co-γ射線輻照和105 ℃處理對(duì)紅燒老鵝肉脂肪酸和揮發(fā)性風(fēng)味的影響較小,可為紅燒老鵝產(chǎn)品選擇不同的殺菌方式提供可行性依據(jù)。