龍小琴 劉曉云

(遵義醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，貴州 遵義 563000)

目前為止，已被發(fā)現(xiàn)的HPV亞型超過兩百種 ，根據(jù)其致病性的差異，將其分為高危和低危兩大類型[1]。高危型 HPV16 和 18 等主要引起外生殖器癌、宮頸癌等惡性病變，而低危型如 HPV6 和 HPV11 主要誘發(fā)疣類病變、低度上皮內(nèi)瘤變等良性病變[2]。據(jù)資料顯示，全世界大約90% 以上的宮頸癌是由9 種及以上的高危型HPV所導(dǎo)致，而其中與宮頸癌相關(guān)性最密切的是HPV16及HPV18感染。明確一個(gè)地區(qū)主要流行的HPV 型別，根據(jù)其感染型別預(yù)知病變進(jìn)展，評(píng)估患者預(yù)后情況，制定符合臨床實(shí)際病情的治療方案，有助于醫(yī)生對(duì)患者病情做到早診斷早治療。此外，科研者還可以根據(jù)當(dāng)?shù)氐腍PV流行型別研發(fā)出有效的宮頸癌疫苗。目前關(guān)于貴州遵義地區(qū)宮頸癌 HPV感染的資料較少，為了探索遵義地區(qū)宮頸癌患者 HPV 感染情況及主要流行型別，本研究采用人乳頭瘤病毒核酸擴(kuò)增分型檢測(cè)試劑盒檢測(cè)貴州遵義地區(qū)宮頸癌患者的宮頸脫落細(xì)胞，以了解本地區(qū)宮頸癌患者感染HPV的主要流行型別及主要型別的分布情況，為研發(fā)針對(duì)性宮頸癌疫苗提供較準(zhǔn)確的流行病學(xué)資料。

1 資料與方法

1.1臨床資料 2016年06月至2019年02月遵義市第一人民醫(yī)院收治的，治療前未行物理治療、未做過子宮頸錐切或全切術(shù)等手術(shù)、經(jīng)專業(yè)病理醫(yī)師行組織病理檢查確診為宮頸癌患者共260例。所有患者均來(lái)自貴州遵義，年齡25～87歲。年齡≤30歲6例，占2．56%；31～35歲7例，占2.99%；36～40歲21例，占8.97%；41～45歲40例，占17.09%；46～50歲53例，占22.65%；51～55歲48例，占20.51%；56～60歲22例，占9.40%；61～65歲18例，占7.69%；>65歲18例，占8.12%。其中41～55歲之間的患者141例，占患者總數(shù)的60.26%。

1.2方法 (1)HPV DNA 取樣：受檢者由專業(yè)婦產(chǎn)科醫(yī)生用陰道擴(kuò)張器擴(kuò)張陰道后，將宮頸刷尖端伸入宮頸內(nèi)口，直到兩翼刷毛與宮頸口兩側(cè)緊密接觸。大拇指和食指握住手柄，朝一個(gè)方向旋轉(zhuǎn)2～5圈后，抽出宮頸刷，將其放入裝有細(xì)胞保存液的樣本管中，在管口處將刷頭留在管內(nèi)，擰緊瓶蓋，立即送檢。使用人乳頭瘤病毒核酸擴(kuò)增分型檢測(cè)試劑盒方法對(duì)HPV進(jìn)行基因分型。(2)HPV基因分型檢測(cè)：采用寧波遠(yuǎn)江HPV分型檢測(cè)試劑盒，按照試劑盒說(shuō)明提取DNA。通過分離提取宮頸細(xì)胞中的DNA、PCR擴(kuò)增，雜交3個(gè)步驟，可檢測(cè)21種HPV亞型，包括15種高危亞型：16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68和6種低危亞型：6、11、42、43、44、81。

1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以陽(yáng)性率表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1宮頸癌患者感染HPV的情況 260例宮頸癌患者中有234例(90.00%)HPV陽(yáng)性，26例(10.00%)HPV陰性。234例宮頸癌患者共檢測(cè)出14種HPV亞型，其中13種為高危亞型，1種為低危亞型。單純高危感染184例，占78.63%，混合感染50例，占21.37%。HPV16感染率最高，為70.94%，其中單純HPV16感染139例，占59.40%，混合HPV16感染27例，占10.27%；其他型別HPV感染情況從高到低依次為HPV18、58、52、33、31、51、59、56、45、39、82、53。低危型HPV81感染僅1例，為0.43%。且為混合感染。單純高危型HPV感染率從高到低前6位為HPV16(59.40%)、18(7.26%)、58(5.13%)、33(2.56%)、52(1.71%)、31(1.28%)。見表1。

表1 各亞型HPV感染的分布情況

2.2單一HPV感染與多重HPV感染分布情況 本資料中單一的HPV感染為184例，占感染總數(shù)的78.63%；HPV二重及以上多重感染為50例，占感染總數(shù)的21.37%。在50例多重感染病例中，二重感染43例，占86.00%；三重感染5例，四重感染1例，六重感染1例。在多重感染中HPV16型感染最多，其次為55、52、18型感染。本資料中，宮頸癌HPV感染的主要亞型16的單一感染率為83.73%，多重感染率為16.27%，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；亞型HPV18的單一感染率為58.62%，多重感染率為41.38%，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；亞型HPV58的單一感染率為42.86%，多重感染率為57.14%，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；亞型HPV52的單一感染率為20.00%，多重感染率為80.00%，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.3不同年齡組感染HPV 亞型的分布狀況 在234例宮頸癌HPV感染陽(yáng)性患者中， ≤ 30 歲患者為6例，比例，為 2.56%；41～55 歲所占比例最多，為 60.26%。見表2。

表2 宮頸癌HPV感染陽(yáng)性患者年齡分布

續(xù)表

表2

3 討 論

本文中收集的宮頸癌患者資料均來(lái)自遵義地區(qū)所有市縣，可較真實(shí)及全面地反映本地區(qū)宮頸癌患者感染HPV的情況。本資料260例宮頸癌患者中HPV感染患者為234例，占總?cè)藬?shù)的90%，且高危型HPV的感染率為100%，感染者中僅檢測(cè)出1例低危型HPV 81感染，且存在于混合感染中。國(guó)外學(xué)者對(duì)22個(gè)國(guó)家的大數(shù)據(jù)宮頸癌活體宮頸脫落細(xì)胞進(jìn)行PCR檢測(cè)，結(jié)果顯示宮頸癌患者高危型HPV的檢出率為99.8%，這與本文數(shù)據(jù)基本吻合。研究發(fā)現(xiàn)，在中國(guó) HPV 16 感染率為 79.6 %，明顯高于國(guó)外，以18 亞型居第二位， 58 和 52 分別居第三和第四位[4]。與本資料中本地區(qū)宮頸癌感染的HPV型別主要為HPV 16、18、58、52，其中HPV 16亞型所占比約70.94%的結(jié)果相一致。婁雪玲等的研究表明，貴州部分地區(qū)宮頸癌主要為HPVl6、18亞型感染，其中HPVl6亞型所占比例(60．28%)最高。

研究發(fā)現(xiàn)，HPV 亞型感染的分布具有種族差異性及地域性[6]。我國(guó)各省流行的亞型也不盡相同，資料顯示，HPV16、 18、 33、 58 型是引發(fā)廣西沿海地區(qū)婦女宮頸癌的最主要的 HPV 亞型，江西地區(qū)宮頸癌患者常見的亞型為HPV52、58、16和18[8]，甘肅地區(qū)宮頸癌常見的主要亞型是 HPV16、18、58、33，北京地區(qū)宮頸癌患者HPV主要感染亞型依次為 HPV58、16、52[10]。本資料顯示貴州遵義地區(qū)宮頸癌患者主要以HPV16、 18、 58、 52亞型為主。由數(shù)據(jù)得出我國(guó)大陸流行的HPV主要亞型為HPV16、 18、 58、 52、31、33。目前，全球70% 的宮頸癌主要與HPV16、HPV18亞型感染有關(guān)，因此，大多數(shù)國(guó)家注冊(cè)可用的HPV疫苗也主要是針對(duì)16型和18型[11]，但每個(gè)國(guó)家及地區(qū)流行的HPV亞型的趨勢(shì)都不一樣，研制出適合本地區(qū)流行亞型的HPV預(yù)防性及治療性疫苗為當(dāng)務(wù)之急。

本資料中宮頸癌患者HPV單純感染為184例，占78.63%，混合感染50例，占21.37%，單純感染遠(yuǎn)多于多重感染，為3.68倍，由此可見，宮頸癌的致病率可能與HPV的混合感染不成正比，反之混合感染可能會(huì)降低HPV的致癌率。有學(xué)者也認(rèn)為HPV的多重感染可能并不會(huì)增加女性宮頸癌的致病率[12]。具體機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

人體感染HPV大多能在2年內(nèi)被體內(nèi)的免疫系統(tǒng)自然清除，只有少部分發(fā)生持續(xù)感染[13]，而持續(xù)感染HPV的個(gè)體，經(jīng)過10年左右的時(shí)間可發(fā)展成宮頸癌。本資料中，患宮頸癌人群的年齡為25～87歲，平均年齡為50.26歲。國(guó)內(nèi)學(xué)者研究指出，近年我國(guó)宮頸癌患者年齡比國(guó)外宮頸癌患者相對(duì)要低，并呈現(xiàn)直線性年輕化趨勢(shì)。研究[14]指出，女性開始性生活年齡、懷孕次數(shù)、人工流產(chǎn)次數(shù)、性伴侶人數(shù)等都為女性患宮頸癌的相關(guān)危險(xiǎn)因素。HPV的主要傳播途徑為性傳播，隨著社會(huì)發(fā)展，人們的性觀念的改變，性行為的提前及開放，導(dǎo)致婚前性行為日益平常化，導(dǎo)致女性患宮頸癌的危險(xiǎn)系數(shù)大大增高，所以女性應(yīng)加強(qiáng)自我防范意識(shí)，定期行婦科體檢，做到早發(fā)現(xiàn)早治療，有效地降低宮頸癌的發(fā)生率。