□ 劉彥泓 大連市檢驗檢測認(rèn)證技術(shù)服務(wù)中心
轉(zhuǎn)基因大豆是商品化最早、推廣應(yīng)用速度最快、種植面積最廣的轉(zhuǎn)基因糧食作物。由于轉(zhuǎn)基因大豆產(chǎn)品可能存在潛在的環(huán)境污染、食用安全及生態(tài)風(fēng)險,對人類健康和自然環(huán)境帶來不利影響[1],因此需要加強(qiáng)對轉(zhuǎn)基因大豆產(chǎn)品的有效監(jiān)督、監(jiān)測和管理。
目前,國內(nèi)外轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢驗方法主要有兩種:外源核酸的檢測和外源蛋白的檢測[2]。其中,核酸檢測技術(shù)主要包括定性PCR技術(shù)、實時熒光PCR技術(shù)、數(shù)字PCR技術(shù)、等溫擴(kuò)增技術(shù)、基因芯片技術(shù)以及二代測序技術(shù);蛋白檢測技術(shù)主要包括SDS聚丙烯凝膠電泳分析技術(shù)、酶聯(lián)免疫分析技術(shù)等[3]。每一種檢測技術(shù)均有其優(yōu)勢,針對不同加工過程的食品或原料,可以選擇不同的檢測方法進(jìn)行檢測。
目前,我國已發(fā)布的現(xiàn)行有效的轉(zhuǎn)基因大豆及其制品檢測方法主要有:國家標(biāo)準(zhǔn)5項,農(nóng)業(yè)部公告17項,行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)13項,農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)1項,還有部分地方標(biāo)準(zhǔn)4項。其中以PCR檢測方法為主,還有環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增(LAMP)檢測方法、試紙條法、基因芯片檢測方法等,詳細(xì)檢測標(biāo)準(zhǔn)編號見表1。除此之外,還有轉(zhuǎn)基因檢測實驗室通用標(biāo)準(zhǔn)等。這些標(biāo)準(zhǔn)方法都有各自的適用范圍,各實驗室可以按照自身的條件自主選擇合適的檢測方法。
表1 轉(zhuǎn)基因大豆檢測方法標(biāo)準(zhǔn)
目前,我國轉(zhuǎn)基因大豆的檢測方法主要以PCR方法為主。PCR實驗成敗的關(guān)鍵在于模板DNA的提取質(zhì)量,對于不同加工過程的產(chǎn)品,應(yīng)選擇不同的DNA提取方法,同時采用紫外分光光度計給出DNA的濃度及A260 nm/A280 nm的比值,以判斷其是否適合進(jìn)行PCR檢測。實驗中還應(yīng)該注意污染問題,建議實驗過程中注意添加陰性和空白對照。實驗室的布局以及檢測工作應(yīng)嚴(yán)格遵循國家標(biāo)準(zhǔn)中轉(zhuǎn)基因通用標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。