羅克明，馬紅葉，楊勇勝2，喬 榮

(1.貴州省園藝研究所，貴陽(yáng) 550006；2.貴陽(yáng)市農(nóng)業(yè)試驗(yàn)中心，貴州 貴陽(yáng) 550018)

車?yán)遄樱置餮髾烟?、大櫻桃、甜櫻桃。近年?lái)，很多南方地區(qū)引種車?yán)遄?多地發(fā)現(xiàn)車?yán)遄幼蕵O低，形不成經(jīng)濟(jì)產(chǎn)量，試種成功的報(bào)道較少。有可能是低溫階段不夠，車?yán)遄硬荒苷Ｍ瓿勺匀恍菝撸瑢?dǎo)致花芽分化不完全，花器不全，次年出現(xiàn)發(fā)芽遲緩，落花嚴(yán)重，花粉量少或出現(xiàn)花芽枯死脫落的現(xiàn)象。也可能因光照不足，導(dǎo)致樹體碳水化合物積累不夠。還可能因花期陰雨低溫導(dǎo)致授粉受精不良，導(dǎo)致落花落果嚴(yán)重，花粉活力及柱頭的可授性是影響授粉受精及坐果率的直接影響因素。本文擬對(duì)引進(jìn)的14個(gè)品種車?yán)遄拥幕ǚ刍盍爸^的可授性進(jìn)行檢測(cè)，以期對(duì)貴州的車?yán)遄由a(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試材料為引進(jìn)的14個(gè)品種美早、黑珍珠、拉賓斯、意大利早紅、極佳、紅燈、早紅寶石、曙光3號(hào)、龍冠、大紫、先鋒、莫莉、曙光2號(hào)、曙光4號(hào)，均來(lái)自貴州省園藝研究所果樹品種園。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1I2-KI染色法測(cè)定車?yán)遄踊ǚ凵盍2]

2019年3月19日—26日，根據(jù)各個(gè)品種的花期在晴朗的天氣09：00-10：00時(shí)采摘當(dāng)天開放的花朵，將花朵收集于硫酸紙袋中帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行花粉活力測(cè)定。先滴一滴蒸餾水在載玻片上，用鑷子取5個(gè)花藥，用解剖針挑撥均勻，并使花粉散開，滴1～2滴I2-KI溶液，蓋上蓋玻片，把載玻片放入保濕培養(yǎng)皿中置于28 ℃恒溫箱中，15 min后在低倍鏡(10×10)下觀察并分別統(tǒng)計(jì)有生活力和無(wú)生活力的花粉粒的百分?jǐn)?shù)(%)。能被染成藍(lán)色的花粉表示具有較強(qiáng)生活力，黃褐色次之，無(wú)色為發(fā)育不良無(wú)活力花粉。每個(gè)品種制片3片，重復(fù)3次，每次重復(fù)鏡檢5個(gè)視野。

表1 供試品種的花粉生活力

1.2.2TTC染色法測(cè)定車?yán)遄踊ǚ凵盍1-3]

先滴一滴蒸餾水在載玻片上，用鑷子取5個(gè)花藥，用解剖針挑撥均勻，并使花粉散開，加入1～2滴0.5%TTC溶液，蓋上蓋玻片，把載玻片放入保濕培養(yǎng)皿中置于28 ℃恒溫箱中，15 min后在顯微鏡下觀察(10 mm×10 mm)并分別統(tǒng)計(jì)有生活力和無(wú)生活力的花粉粒的百分?jǐn)?shù)(%)。能被染成紅色的花粉表示生活力強(qiáng)，淡紅色次之，無(wú)色的是沒有活力的花粉或不育花粉。每個(gè)品種制片3片，重復(fù)3次，每次重復(fù)鏡檢5個(gè)視野。

1.2.3用聯(lián)苯胺-過(guò)氧化氫法測(cè)定柱頭可授性[1,3]

09：00-10：00時(shí)采摘開放2 d的花朵收集于硫酸紙袋中帶回實(shí)驗(yàn)室，用于測(cè)柱頭的可授性。用解剖針分離柱頭，將其完全浸泡在含有聯(lián)苯胺-過(guò)氧化氫反應(yīng)液(V1%聯(lián)苯胺∶V3%過(guò)氧化氫∶V蒸餾水=4∶11∶22)的雙凹載玻片凹陷處，置黑暗環(huán)境25 min。用4×10雙目顯微鏡觀察柱頭的反應(yīng)情況。若柱頭具有可授性(呈現(xiàn)出過(guò)氧化氫酶活性)，則柱頭周圍的反應(yīng)液呈現(xiàn)藍(lán)色并有大量氣泡出現(xiàn)。柱頭至少2/3部位呈現(xiàn)藍(lán)色并伴有大量氣泡出現(xiàn)計(jì)作柱頭具有可授性，否則認(rèn)為沒有可授性。根據(jù)氣泡量判斷柱頭可授性的相對(duì)強(qiáng)弱：1)“+++”表示柱頭可授性強(qiáng)，柱頭至少2/3部位呈現(xiàn)藍(lán)色并伴有大量氣泡出現(xiàn)；2)“++”表示柱頭可授性較強(qiáng)，柱頭至少2/3部位呈現(xiàn)藍(lán)色并伴有較多氣泡出現(xiàn)；3)“+”表示柱頭具有可授性，柱頭可授性弱，柱頭呈淡藍(lán)色或不明顯，周圍僅有幾個(gè)小氣泡；4)“+/-”表示部分柱頭具有可授性；5)“-”表示柱頭不具有可授性。每個(gè)品種處理50朵花，做3次重復(fù)。

花粉活力和柱頭可授性以花粉染色率和柱頭可授率表示，計(jì)算公式：

花粉染色率(%)=(被染色花粉數(shù)/視野中花粉總數(shù))×100%；

柱頭可授率(%)=(染色并產(chǎn)生氣泡的柱頭數(shù)/柱頭總數(shù))×100%。

2 結(jié)果與分析

從表1可看出，2種染色法做花粉活力的測(cè)定，結(jié)果基本一致。2種染色法著色率均達(dá)到95%以上的品種僅僅意大利早紅，其次是曙光3號(hào)、美早、曙光2號(hào)、曙光4號(hào)在90%以上。花粉活力差的品種有紅燈、龍冠、大紫、拉賓斯、極佳。

從表2可看出：柱頭可授性“+++、++”之和百分比超過(guò)70%的品種有意大利早紅、龍冠；其次是黑珍珠、曙光2號(hào)、曙光4號(hào)、曙光3號(hào)“+++、++”之和百分比在60%～70%之間；再其次是莫莉58.1%、美早57.9%、先鋒55.1%；拉賓斯、極佳這2個(gè)品種柱頭可授性較弱，這是授粉受精不良導(dǎo)致落花落果的主要原因。

表2 各個(gè)品種柱頭可授性測(cè)定

3 結(jié) 論

利用染色法測(cè)定花粉生活力具有快速簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)，試驗(yàn)采用I2-KI染色法和TTC染色法測(cè)得14個(gè)車?yán)遄悠贩N的花粉活力基本一致。試驗(yàn)得出品種意大利早紅的花粉活力最高，2種染色法都達(dá)到95%以上，其次是曙光3號(hào)、美早、曙光2號(hào)、曙光4號(hào)在90%以上?；ǚ刍盍Σ畹钠贩N有紅燈、龍冠、大紫、拉賓斯、極佳。從柱頭的可授性來(lái)看，柱頭可授性“+++、++”之和百分比超過(guò)70%的品種有意大利早紅、龍冠；其次是黑珍珠、曙光2號(hào)、曙光4號(hào)、曙光3號(hào)“+++、++”之和百分比在60%～70%之間；其余品種柱頭的可授性都較低。

4 討 論

14個(gè)車?yán)遄悠贩N中花粉活力強(qiáng)且柱頭可授性強(qiáng)的品種只有意大利早紅，其次花粉活力在90%以上，柱頭可授性強(qiáng)達(dá)60%～70%的品種有曙光2、曙光3號(hào)、曙光4號(hào)。美早花粉染色率達(dá)90%以上，但柱頭可授性弱，只有57%，龍冠的花粉活力低，但柱頭可授性強(qiáng)達(dá)73.9%，這種柱頭可授性強(qiáng)的品種，配置花粉活力高的品種作授粉樹或加以人工輔助授粉，可以大大提高坐果率。車?yán)遄幼曰ńY(jié)實(shí)率非常低，就是花粉活力強(qiáng)的品種也必須配置授粉樹。其次坐果率不僅受各個(gè)品種的花粉活力及柱頭的可授性影響，還受花期天氣、樹體營(yíng)養(yǎng)、病蟲害防控等多種因素影響。