文光林，施曉麗*，陳朝桂，石 靖，茍昌勇，王 瑛

（1.貴州大學動物科學學院，貴州貴陽 550025；2.四川鐵騎力士實業(yè)有限公司，四川成都 610000）

注重輕體重、耗料少和高產(chǎn)蛋率等性狀的選育及籠養(yǎng)限制蛋雞活動，使得高產(chǎn)籠養(yǎng)蛋雞易罹患疲勞綜合征，發(fā)病率高達16%～30%[1-2]，具體表現(xiàn)為產(chǎn)蛋率下降，蛋殼變薄易碎，結構骨質(zhì)減少，骨骼脆弱、易折，脊椎骨丟失導致脊柱崩塌、麻痹，甚至死亡，給蛋雞生產(chǎn)帶來巨大損失，是嚴重的動物福利問題，亦是蛋雞養(yǎng)殖業(yè)迫切需要解決的重大問題[1]。

氨基葡萄糖（Glucosamine，GlcN）為葡萄糖衍生物，廣泛存在于人體、動物、微生物幾乎所有細胞中，為糖蛋白和蛋白聚糖主要成分，是骨基質(zhì)和關節(jié)軟骨中蛋白多糖的組成成分[3-4]。研究表明，GlcN 可誘導成骨細胞增殖[5]、抑制破骨細胞分化[6]和抑制炎癥反應，可有效治療人骨關節(jié)炎[7]，因其安全可靠，作為非處方藥銷售和在食物中添加[7]。本課題組前期開展了Glc N 對產(chǎn)蛋高峰[8]和后期[9]2 個階段蛋雞疲勞綜合征的防治及其機制的一系列研究工作，結果表明日糧中添加GlcN 可增加蛋雞骨鈣含量，提高骨小梁比例，促進蛋殼鈣沉積，提高蛋殼厚度，減少破損蛋率[9]。然而，在開產(chǎn)階段的蛋雞上GlcN 的劑量效應關系研究未見報道。本試驗旨在探討日糧中Glc N 水平對開產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和蛋殼質(zhì)量的影響，探討開產(chǎn)蛋雞飼喂GlcN 的有效性，確定其適宜添加量，以期為GlcN 在蛋雞生產(chǎn)中的開發(fā)應用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 氨基葡萄糖硫酸鹽純度為99.5%，美國藥典（USP）標準，購自揚州日興生物科技股份有限公司。

1.2 試驗設計及日糧 挑選120 日齡，產(chǎn)蛋率達到50%的開產(chǎn)羅曼蛋雞600 只，隨機分為4 個處理，每個處理10 個重復，每重復15 只雞。4 組試雞分別采食添加0%、0.2%、0.4%和0.6% GlcN 日糧。因蛋雞產(chǎn)蛋率從50%升到80%速度較快，故只開展了為期30 d 試驗。參照家禽營養(yǎng)需要（NRC，1994）、雞飼養(yǎng)標準（2004）和羅曼蛋雞飼養(yǎng)管理指南的蛋雞營養(yǎng)需要，設計玉米-豆粕型試驗日糧，日糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

表1 日糧組成及營養(yǎng)成分（風干基礎）

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗地點為四川鐵騎力士實業(yè)有限公司馮光德實驗室基地。2 層階梯式籠養(yǎng)，每籠3 只雞，自由采食，乳頭式飲水器自由飲水，每日觀察并記錄采食量、產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重和異常蛋數(shù)（破殼蛋、軟殼蛋、畸形蛋、沙殼蛋和雙黃蛋）等指標。

1.4 檢測指標與方法

1.4.1 生產(chǎn)性能 參照《蛋雞生產(chǎn)性能測定技術規(guī)范》（NY/T 2123-2012）測定生產(chǎn)性能。測定指標包括日均采食量、產(chǎn)蛋率、異常蛋率、蛋重和料蛋比。采食量、蛋重稱重用6 000 g 量程電子天平，精度0.000 g。指標計算公式：

異常蛋率=異常蛋數(shù)/產(chǎn)蛋數(shù)×100%料蛋比=日采食量/日產(chǎn)蛋重

1.4.2 蛋品質(zhì) 分別于正式試驗0 d 及30 d 時，每重復隨機抽取3 枚雞蛋，各處理總計30 枚進行檢測。采用蛋品質(zhì)測試儀（EMT-5200，日本）測定蛋黃顏色、蛋白高度和哈氏單位。游標卡尺測量蛋的長徑和短徑，計算長徑/短徑，即蛋形指數(shù)；分離蛋清，分析天平稱蛋黃重，計算蛋黃重/蛋重，即蛋黃比例。

1.4.3 蛋殼質(zhì)量 分別于正試期0 d 及30 d 時，每重復隨機抽取3 枚雞蛋，各處理總計30 枚進行檢測。蛋殼強度采用蛋殼強度測定儀（EFG-0503，日本）測定；稱量蛋殼重并計算蛋殼比例；蛋殼鈣含量依據(jù)《中華人名共和國國家標準》（GB /T 6436-2002）高錳酸鉀法測定；蛋殼磷含量依據(jù)《中華人名共和國國家標準》（GB /T 6437-2002）分光光度法測定。相關計算公式：

蛋殼比例=蛋殼質(zhì)量/蛋重×100%

蛋殼鈣質(zhì)量=蛋殼鈣含量×蛋殼質(zhì)量

蛋殼磷質(zhì)量=蛋殼磷含量×蛋殼質(zhì)量

1.5 統(tǒng)計分析 用Excel 2007 對數(shù)據(jù)初步處理，采用 SPSS 18.0 軟 件Nonparametric test 的one sample K-S 檢驗數(shù)據(jù)正態(tài)性，Levene test 檢驗數(shù)據(jù)方差齊性后，再用One-Way ANOVA 進行方差分析，Duncan′s 法多重比較，P＜0.05 為差異顯著，P＜0.01 為差異極顯著，結果以平均值±標準差表示。用correlate 過程的Bivariate 進行Pearson 相關分析。

2 結果與分析

2.1 GlcN 對開產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能的影響 由表2 可知，試驗開始時各處理組間蛋雞的采食量和產(chǎn)蛋率無顯著差異。隨著GlcN 添加水平的提高，采食量隨之增加，GlcN 添加水平高于0.4%時，試雞采食量得到顯著提高，但0.4%、0.6% GlcN 組間無顯著差異，表明GlcN 促進蛋雞采食。與對照組相比，當GlcN 水平達到0.6%時，試雞產(chǎn)蛋率和蛋重顯著提高，采食量與產(chǎn)蛋率的相關系數(shù)為0.732（P＜0.05），表明GlcN 因促進采食進而顯著提高了產(chǎn)蛋率；0.2%、0.6% GlcN 組的料蛋比較對照組有所降低（P＜0.05）。日糧添加Glc N 對開產(chǎn)階段的異常蛋率無顯著影響。

2.2 GlcN 對開產(chǎn)蛋雞蛋品質(zhì)的影響 如表3 顯示，試驗開始時組間各指標基于同一水平。隨著產(chǎn)蛋時間的延長，蛋重增大，蛋形指數(shù)并無明顯變化，蛋黃比例增大，蛋黃顏色有所加深，蛋白高度與哈氏單位有所降低。30 d時，日糧添加GlcN 對蛋形指數(shù)、蛋黃比例、蛋黃顏色均無顯著影響；與對照組相比，添加0.4%、0.6% GlcN可增加蛋白高度（P＜0.01），提高哈氏單位（P＜0.05）。

2.3 GlcN 對開產(chǎn)蛋雞蛋殼質(zhì)量的影響 由表4 可知，試驗開始時蛋殼質(zhì)量指標在各組間均無顯著差異。GlcN 水平對蛋殼強度、蛋殼重和蛋殼厚度均無顯著影響；與對照組相比，0.2%、0.6% GlcN 組蛋殼比例降低（P＜0.01），0.4%、0.6% GlcN 組蛋殼鈣含量增加（P＜0.01）；0.6% Glc N 組提高了蛋殼磷含量（P＜0.01）。

3 討 論

3.1 GlcN 對開產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能的影響 采食量高低直接決定家禽營養(yǎng)物質(zhì)的攝入，更與家禽的生產(chǎn)性能和健康狀況密切相關，是評價家禽群體狀態(tài)和生產(chǎn)效益最基本和最重要的指標之一[10]。本研究結果顯示，與對照組相比，日糧中添加0.4%和0.6% GlcN 分別提高試雞采食5.16%與4.99%。無論是產(chǎn)蛋高峰期[13]還是后期[12]，隨著GlcN 添加水平提高，試雞日均采食量逐漸增高，添加量為0.4%時達到最大，隨后逐漸下降，這與本試驗在開產(chǎn)階段的研究結果一致。以上均提示GlcN 是一有效的誘食劑。然而，GlcN 促進采食及其機制在家禽上鮮見報道。在大鼠上的5 篇研究[11-15]均表明，GlcN 確實可影響動物采食，但Glc N 采食效應和原因截然不同。同樣，劍橋大學的Heisler 課題組以150 nmol/min 對大鼠第三腦室持續(xù)灌注GlcN 60 min，GlcN 可抑制葡萄糖激酶活性、上調(diào)下丘腦神經(jīng)肽Y（NPY）和食欲肽（Orexin）表達，促進大鼠采食[11-12]。而九洲大學的Kang 等[13]對大鼠一次注入24 μmol Glc N 可增強下丘腦神經(jīng)元組胺分泌，抑制大鼠采食。Fujimoto[14-15]卻報道，GlcN 提高了第三腦室葡萄糖濃度，從而降低了大鼠采食量。相反，采食效應是否由灌注劑量和方法不同所造成尚不清楚。本研究在開產(chǎn)、高峰和后期的結果顯示，Glc N 劑量高于0.4% 對蛋雞促采食作用降低，增加到0.8% 時甚至有抑制作用[8-9]。另外，Glc N 介導mTOR 信號通路促使成骨細胞增殖[5]，而mTOR 也是調(diào)節(jié)動物采食的重要通路[16]，這提示GlcN 很有可能通過mTOR 路徑調(diào)控采食。哺乳動物采食調(diào)控方式雖與家禽有許多相似之處，但也有明顯差異，如Ghrelin 促進哺乳動物采食，卻抑制鳥類攝食[17]。GlcN 對家禽促采食作用和途徑是否與大鼠一致，高劑量GlcN 抑制蛋雞采食信號通路，均有待繼續(xù)研究。綜上，GlcN 在一定劑量內(nèi)可提高蛋雞采食量，過高則抑制。

表2 Glc N 對開產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

表3 GlcN 對開產(chǎn)蛋雞蛋品質(zhì)的影響

表4 GlcN 對開產(chǎn)蛋雞蛋殼質(zhì)量的影響

本研究結果顯示，產(chǎn)蛋率隨Glc N 添加水平的提高逐漸增加。秦鵬等[18]研究顯示，采食量的增加可促進產(chǎn)蛋率提高。蛋雞采食量增加可提高蛋雞營養(yǎng)物質(zhì)攝入量，提高蛋雞的產(chǎn)蛋性能[19]。提高蛋雞的免疫力可提高其生產(chǎn)性能[20]，且Glc N 可減少產(chǎn)蛋后期炎癥因子IL-6 和前列腺素PGE2 的分泌[9]，提示Glc N 對蛋雞的生產(chǎn)性能作用，除與促蛋雞攝食外，亦與免疫調(diào)節(jié)有關。因此，蛋雞產(chǎn)蛋率的提高，可能是GlcN 提高了開產(chǎn)蛋雞的免疫力，增加蛋雞采食，提高蛋雞對養(yǎng)分的吸收和攝入所致。產(chǎn)蛋率與采食量相關性分析表明，產(chǎn)蛋率與采食間顯著相關，表明GlcN 主要通過促進采食來提高產(chǎn)蛋性能，同時增加蛋重，改善日糧轉(zhuǎn)化效率。

3.2 GlcN 對開產(chǎn)蛋雞蛋品質(zhì)的影響 本研究結果顯示，0 d 與30 d 蛋黃顏色的加深主要是日糧中添加玉米蛋白粉的色素沉積；蛋白高度與哈氏單位受溫度影響，隨著試驗時間延長，天氣逐漸轉(zhuǎn)暖，氣溫升高，因此雞蛋蛋白高度與哈氏單位降低。蛋白高度和哈氏單位是反映蛋品質(zhì)和新鮮程度的指標，值越高，表明蛋白粘稠度越大，新鮮度越好，蛋白品質(zhì)越高[21-22]。卵粘蛋白含量和性質(zhì)決定蛋白高度和哈氏單位大小，卵粘蛋白分解，二硫鍵斷裂，蛋白高度降低，蛋新鮮程度下降[23-24]，而?；疓lcN 為卵粘蛋白的糖基組分[25]。本試驗結果顯示，GlcN 提高了蛋白高度和哈氏單位，提示GlcN 可能是促進了卵粘蛋白形成來提高蛋白高度和哈氏單位。GlcN 可極好螯合Fe2+，清除氧自由基[26]和丙二醛[27]，具有很好的抗氧化性，保護蛋白分泌質(zhì)量，提高哈氏單位[28]。

3.3 GlcN 對開產(chǎn)蛋雞蛋殼質(zhì)量的影響 母雞產(chǎn)1 個蛋需2 ～2.2 g 鈣形成蛋殼（NRC，1994）。蛋殼鈣有腸道吸收和骨鈣動員[29-30]2 個來源。本研究結果顯示，蛋殼鈣磷含量和鈣磷質(zhì)量隨著Glc N 添加水平增加而逐漸增加，提示GlcN 可能通過提高腸道對鈣和磷吸收，也可能增強骨鈣磷的動用。但產(chǎn)蛋后期的研究表明，Glc N 會抑制破骨細胞分化和成骨細胞生成，那么意味著不可能通過動用骨鈣磷來滿足蛋殼鈣磷沉積需要[9]。Glc N 對蛋雞日糧鈣吸收及調(diào)節(jié)的研究亦證明，GlcN 可上調(diào)腸道鈣結合蛋白CaBP-D28k 的表達，將鈣吸收率提高5%左右[9]。但蛋殼強度、蛋殼重和蛋殼厚度沒有隨GlcN添加水平升高而增加，可能是因為蛋重提高、蛋殼比例下降，而消除了鈣磷增加而對蛋品質(zhì)改善作用。

4 結 論

本試驗條件下，開產(chǎn)蛋雞日糧中添加適量Glc N 可促進蛋雞采食、提高產(chǎn)蛋率、降低料蛋比、增加蛋重、提高蛋白高度和哈氏單位，增加蛋殼中鈣、磷質(zhì)量。在蛋雞開產(chǎn)階段，GlcN 的適宜添加量為0.6%。