王浩龍

玉林市婦幼保健院檢驗(yàn)科 （廣西玉林 537000）

胎兒染色體疾病屬于臨床上常見(jiàn)的遺傳性疾病，主要由染色體異常造成。近年來(lái)，該病發(fā)病率日趨增長(zhǎng)，且大部分均無(wú)法治療，嚴(yán)重影響母嬰健康。因此，盡早通過(guò)產(chǎn)前檢查進(jìn)行診斷，從而終止患胎發(fā)育是防止該病發(fā)生的主要方式[1]。染色體疾病類(lèi)型較多，診斷難度較大[2]。隨著醫(yī)療器械的更新?lián)Q代，染色體掃描分析儀被廣泛應(yīng)用于臨床，但儀器廠(chǎng)家較多，不同型號(hào)儀器可能具有不同性能，甚至造成不同的診斷結(jié)果，如何選擇成為關(guān)鍵。本研究比較德國(guó)蔡司染色體掃描分析儀和美國(guó)萊卡染色體掃描分析儀運(yùn)用于胎兒染色體疾病產(chǎn)前診斷中的性能，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2018年1—6月我院收治的3 265名產(chǎn)前檢查孕婦的臨床資料，其中2 791名采用德國(guó)蔡司染色體掃描分析儀檢查作為A組，另474名采用美國(guó)萊卡染色體掃描分析儀檢查作為B組。A組年齡23～45歲，平均（32.36±1.42）歲；孕周20～35周，平均（28.49±1.25）周。B組年齡23～45歲，平均（32.78±1.39）歲；孕周21～35周，平均（29.02±1.14）周。兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

A組采用德國(guó)蔡司染色體掃描分析儀（Imager.Z2）檢查：在無(wú)菌條件下抽取羊水后注入一次性離心管中（15 ml），1 500 r/min離心10 min；進(jìn)入接種培養(yǎng)室，在超凈工作臺(tái)上去除上清液，每管留下0.5 ml，利用吸管打散細(xì)胞，制作成細(xì)胞懸液；放入4.5 ml完全培養(yǎng)基進(jìn)入管內(nèi)，使吸管完全搖晃均勻，移動(dòng)至方形培養(yǎng)瓶；加入5%二氧化碳置于37 ℃溫箱中實(shí)施開(kāi)放式培養(yǎng)；5 d后置于鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)纖維樣或者上皮細(xì)胞生長(zhǎng)，若其生長(zhǎng)旺盛后可換上完全培養(yǎng)基，24～48 h后若細(xì)胞生長(zhǎng)狀況較好可添加秋水仙堿，4～6 h實(shí)施細(xì)胞學(xué)處理；將細(xì)胞上清液置于10 ml離心管中，利用0.9%氯化鈉注射液沖洗，隨后利用0.25%胰酶細(xì)胞消化液進(jìn)行消化3～5 min，待細(xì)胞表面呈現(xiàn)皺形變化后利用吸管吹打，放入上清液或者完全培養(yǎng)基停止消化；1 500 r/min離心10 min，去除上清液，加入0.075 M 氯化鉀（4～6 ml），吸管吹打，37 ℃水浴3～5 min；放入固定劑，搖晃均勻，37 ℃水浴5 min，1 500 r/min離心10 min；去除上清液，加入固定劑搖晃均勻，37 ℃水浴5 min，1 500 r/min離心10 min；去除上清液，留下0.5 ml，重復(fù)離心操作；按照管底細(xì)胞量放入新鮮固定劑，每片滴片1～2滴，75 ℃下烘烤3 h，第2天進(jìn)行顯帶處理；通過(guò)掃描系統(tǒng)自動(dòng)尋找玻片上染色體分裂相，隨后傳輸至多個(gè)分析終端，由檢驗(yàn)人員進(jìn)行分析。

B組采用美國(guó)萊卡染色體掃描分析儀（Leica DM5500 B）檢查：抽取臍血2 ml，離心洗脫2次，清除脂肪顆粒，無(wú)菌條件下置于含有培養(yǎng)液（5 ml）的培養(yǎng)瓶中，37 ℃下培養(yǎng)24～48 h；放入秋水仙堿，培養(yǎng)55 min，置于水浴箱，0.075 mol/L的氯化鉀，37 ℃低滲30～60 min；加入固定液，水浴5 min，搖晃均勻，加入固定液至7 ml，搖晃均勻，1 500 r/min離心10 min；去除上清液，重復(fù)加入固定液并離心，按照細(xì)胞量調(diào)整懸液，滴片，烤片3 h，顯帶；利用低倍鏡對(duì)標(biāo)本進(jìn)行掃描，并定位細(xì)胞，隨后通過(guò)自動(dòng)加油裝置利用高倍鏡拍攝細(xì)胞；分析系統(tǒng)中可通過(guò)查找、核型配對(duì)人類(lèi)及非人類(lèi)細(xì)胞系，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行跟蹤分析，其中自動(dòng)玻片裝載系統(tǒng)可進(jìn)行無(wú)人值守掃描、定位及熒光圖像拍攝，最后將圖像傳輸至工作站，由檢驗(yàn)人員進(jìn)行分析。

1.3 臨床評(píng)價(jià)

比較兩組胎兒染色體畸變檢出情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

兩組胎兒染色體畸變檢出率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組胎兒染色體畸變檢出情況比較

3 討論

胎兒染色體疾病是指胎兒染色體數(shù)目及結(jié)構(gòu)異常，其染色體上基因或者基因群的變化對(duì)眾多基因的表達(dá)及作用產(chǎn)生影響，從而破壞基因的平衡狀態(tài)，最終阻礙機(jī)體相關(guān)器官的分化發(fā)育，使機(jī)體形態(tài)及功能異常，給母嬰帶來(lái)嚴(yán)重后果[3]。由于臨床尚無(wú)特效治療方式，僅能夠通過(guò)產(chǎn)前診斷來(lái)避免疾病產(chǎn)生，因此選擇合適的診斷方式具有重要意義。

染色體掃描儀可對(duì)分裂中期細(xì)胞核進(jìn)行染色體核型分析，從而準(zhǔn)確判斷染色體情況。但儀器廠(chǎng)家及型號(hào)較多，尤其是德國(guó)蔡司與美國(guó)萊卡均在臨床應(yīng)用廣泛，不同儀器可能存在不同性能[4]。本研究結(jié)果顯示，兩組胎兒染色體疾病檢出率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。提示兩種染色體掃描儀均具有較高價(jià)值，可準(zhǔn)確檢出染色體異常類(lèi)型。其中德國(guó)蔡司染色體掃描分析儀主要采用孕婦羊水進(jìn)行診斷，具有掃片速度快、操作簡(jiǎn)便及系統(tǒng)軟件較為先進(jìn)等特點(diǎn)；由于檢驗(yàn)人員長(zhǎng)時(shí)間在顯微鏡下觀察染色體，可能出現(xiàn)視覺(jué)疲勞，而德國(guó)蔡司染色體掃描分析儀通過(guò)機(jī)器自動(dòng)尋找并拍攝中期相，從屏幕上直接觀察，可防止視覺(jué)疲勞造成誤診；加上整張玻片掃描時(shí)間不超出3 min，掃描8張片中期分裂相及油鏡采集時(shí)間不超過(guò)60 min，掃片較為迅速；另外，德國(guó)蔡司染色體掃描分析儀便于教學(xué)及學(xué)術(shù)交流，可利用硬盤(pán)或光盤(pán)保存大量染色體圖像，隨時(shí)查閱，有效提升效率；但該儀器耗油量高，載片數(shù)量較少，截圖質(zhì)量一般，售后較差，更換配件的價(jià)格較為昂貴，給醫(yī)院帶來(lái)一定的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。而美國(guó)萊卡染色體掃描分析儀通過(guò)對(duì)胎兒臍血進(jìn)行分析，截圖質(zhì)量更好，且耗油量較少，載片數(shù)量多，受到臨床廣泛認(rèn)可；但其掃片速度較緩慢，操作復(fù)雜，系統(tǒng)軟件落后，更新慢。

綜上所述，兩種染色體掃描分析儀均具有較高價(jià)值，且在性能上均存在一定優(yōu)缺點(diǎn)，在產(chǎn)前診斷中應(yīng)根據(jù)具體情況選擇合適的儀器，為準(zhǔn)確診斷提供前提。