田先嬌　楊新周

摘? ?要：為了研究辣木提取物體外抗氧化活性，以乙醇、甲醇、丙酮為萃取溶劑，用超聲波提取制備提取物，考察了引種自泰國、緬甸、印度辣木提取物對DPPH自由基活性的清除能力，并將其與多種抗氧化劑進(jìn)行對照比較。結(jié)果表明，引種自3個不同國家的辣木甲醇、乙醇、丙酮提取物與5種標(biāo)準(zhǔn)品的抗氧化能力從強(qiáng)到弱依次為：沒食子酸、咖啡酸、蘆丁、甲醇提取物、乙醇提取物、丙酮提取物，泰國、緬甸、印度的辣木樣品甲醇提取物清除DPPH自由基活性能力均大于標(biāo)準(zhǔn)品香草酸、對香豆酸。乙醇、丙酮提取物清除DPPH自由基活性能力均大于對香豆酸。

關(guān)鍵詞：辣木;抗氧化;DPPH自由基

辣木（Moringa oleifera，或drumstick tree，horseradish tree），為辣木科辣木屬多年生植物，是原產(chǎn)于印度北部喜馬拉雅山南麓的速生樹種，耐旱力強(qiáng)，喜生于砂壤土[1]。辣木的根、莖、葉、花、種子、枝和樹皮均含有豐富的營養(yǎng)和藥用成分，含有豐富的蛋白質(zhì)、維生素，含有大量人體必需的微量元素，具有降血壓、治療貧血、抑制病菌、控制糖尿病、克服失眠等作用[2]。目前，國內(nèi)外對辣木的應(yīng)用主要集中在功能食品的開發(fā)、飼料、水的凈化、化妝品原料及植物生長促進(jìn)劑和殺菌劑等方面。而對辣木葉的抗氧化活性研究較少，本文以引種自泰國、緬甸、印度的辣木為原料，對其辣木葉甲醇、乙醇、丙酮抗氧化能力進(jìn)行測定，為辣木開發(fā)成天然抗氧化劑和辣木的綜合開發(fā)提供一定的理論基礎(chǔ)。

1? ? 實(shí)驗(yàn)部分

1.1? 主要儀器和試劑

V-1100型可見分光光度計(jì)（上海美譜達(dá)儀器有限公司），超聲波（SK2200H），電子天平（AR224CN），電熱真空干燥箱（ZK- 82J 型），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（EYELA N—1100）。

辣木（采于云南天佑公司），DPPH 1，1-二苯基-2-三硝基苯肼，純度大于99.0%（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。槲皮素、山奈酚、咖啡酸、蘆丁、沒食子酸、對香豆酸（購自國藥集團(tuán)浙江華東醫(yī)藥有限公司，純度大于98%）。乙醇、甲醇、丙酮等試劑均為分析純，實(shí)驗(yàn)用水為二次蒸餾水。

1.2? ? 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及方法

1.2.1? DPPH儲備液的制備

精確稱取DPPH 10 mg，用無水乙醇溶解定容至100 mL容量瓶中，得質(zhì)量濃度為DPPH 0.1 mg/mL的儲備溶液。用時稀釋成質(zhì)量濃度為0.024 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.2.2? 辣木提取物的制備

乙醇提取物的制備：精確稱取2.000 0 g辣木樣品于100 mL的錐形瓶中，依次加入20 mL，20 mL，20mL的無水乙醇溶液，封口，超聲提取3次，每次45 min，合并3次濾液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，定容到25 mL，備用。

同法制備辣木甲醇提取物、丙酮提取物。

1.2.3? 清除DPPH自由基能力的測定

準(zhǔn)確移取4.5 mL DPPH標(biāo)準(zhǔn)溶液，依次加入一定體積的提取物溶液于10 mL比色管中，定容至5 mL，置于暗處30 min，在波長517 nm下測定空白DPPH的吸光度值記為A空白和加入提取物后DPPH的吸光度值為A樣品，按下式計(jì)算自由基清除率。

清除能力=[A空白-A樣品]/A空白×100%

2? ? 結(jié)果與討論

2.1? 不同國家引種辣木甲醇提取物清除DPPH自由基活性能力

甲醇提取液清除DPPH活性如圖1所示。

根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)方法，測定3個不同國家辣木甲醇提取物清除DPPH自由基活性能力，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。根據(jù)實(shí)驗(yàn)得出：泰國、緬甸、印度辣木甲醇提取物質(zhì)量濃度與清除率方程分別為：

Y=249.22X+0.892 6，R=0.993 8，IC=0.197 0 mg/mL（1）

Y=172.94X+2.643 9，R=0.996，IC=0.273 8 mg/mL（2）

Y=164.66X-1.316 5，R=0.990 3，IC=0.311 6 mg/mL （3）

依據(jù)IC50與清除DPPH自由基活性呈反比的關(guān)系，結(jié)合圖1及IC50可以得出，泰國、緬甸、印度辣木甲醇提取物清除DPPH自由基的由強(qiáng)到弱能力為：泰國、緬甸、印度。

2.2? 不同國家引種辣木乙醇提取物清除DPPH自由基活性能力

根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)方法，測定3個不同國家辣木甲醇提取物清除DPPH自由基活性能力，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2所示，根據(jù)實(shí)驗(yàn)得出，泰國、緬甸、印度辣木甲醇提取物質(zhì)量濃度與清除率方程分別為：

Y=51.827X+9.178 6，R=0.980 4，IC=0.787 6 mg/mL （4）

Y=46.691X+10.600 0，R=0.959 4，IC=0.843 8 mg/mL（5）

Y=48.342X+8.168 8，R=0.986 8，IC=0.865 3 mg/mL（6）

結(jié)合圖2及IC50可以得出，泰國、緬甸、印度辣木乙醇提取物清除DPPH自由基的能力由強(qiáng)到弱為：泰國、緬甸、印度。

2.3? 不同國家引種辣木丙酮提取物清除DPPH自由基活性能力

丙酮提取液清除DPPH活性如圖3所示。

根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)方法，測定3個不同國家辣木丙酮提取物清除DPPH自由基活性能力，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖3所示，根據(jù)實(shí)驗(yàn)得出，泰國、緬甸、印度辣木丙酮提取物質(zhì)量濃度與清除率方程分別為：

Y=23.043X+21.699 0，R=0.995 9，IC=1.228 1 mg/mL（7）

Y=21.997X+9.726 5，R=0.998 8，IC=1.830 8 mg/mL（8）

Y=19.032X+7.560 1，R=0.966 4，IC=2.229 9 mg/mL（9）

結(jié)合圖3及IC50可以得出，泰國、緬甸、印度辣木丙酮提取物清除DPPH自由基的能力由強(qiáng)到弱為：泰國、緬甸、印度。

2.4? 幾種對照品清除DPPH自由基活性的能力

測定蘆丁、沒食子酸、香草酸、咖啡酸、對香豆酸溶液清除DPPH自由基的能力，通過實(shí)驗(yàn)得出蘆丁、沒食子酸、咖啡酸、香草酸、對香豆酸溶液IC50分別為：0.004 3 mg/mL，0.000 9 mg/mL，0.003 3 mg/mL，0.547 1 mg/mL，2.270 0 mg/mL。通過實(shí)驗(yàn)得出幾種標(biāo)準(zhǔn)品抗氧化能力由弱到強(qiáng)順序?yàn)椋簩ο愣顾帷⑾悴菟?、蘆丁、咖啡酸、沒食子酸。

2.5? 不同地區(qū)辣木樣品不同提取物清除DPPH自由基活性比較

從圖4可知，引種自泰國、緬甸、印度的辣木樣品甲醇、乙醇、丙酮的提取物清除DPPH自由基活性能力由強(qiáng)到弱為：甲醇提取物、乙醇提取物、丙酮提取物，說明引種自泰國、緬甸、印度的辣木樣品甲醇提取物抗氧化成分優(yōu)于乙醇提取物和丙酮提取物。

3? ? 結(jié)語

（1）利用超聲提取法制備了引種自緬甸、泰國、印度辣木的甲醇、乙醇、丙酮提取物，測定其清除DPPH自由基活性的能力。結(jié)果表明，引種自不同國家的辣木抗氧化能力存在一定差異，其中，引種自泰國的甲醇提取物抗氧化能力最強(qiáng)，引種自印度的丙酮提取物抗氧化能力最弱。

（2）引種自泰國、緬甸、印度的辣木樣品甲醇、乙醇、丙酮的提取物清除DPPH自由基活性能力由強(qiáng)到弱為：甲醇提取物、乙醇提取物、丙酮提取物。如果要從辣木中分離抗氧化物質(zhì)，建議首選甲醇提取物。

（3）引種自泰國、緬甸、印度的辣木樣品甲醇提取物清除DPPH自由基活性能力均大于標(biāo)準(zhǔn)品香草酸、對香豆酸。乙醇、丙酮提取物清除DPPH自由基活性能力均大于對香豆酸。說明甲醇提取物抗氧化能力強(qiáng)，可能甲醇提取物抗氧化活性成分較豐富。

[參考文獻(xiàn)]

[1]劉鳳霞，王苗苗，趙有為，等.辣木中功能性成分提取及產(chǎn)品開發(fā)的研究進(jìn)展[J].食品科學(xué)，2015（19）：282-286.

[2]楊新周，郝志云，董? ?毅，等.不同溶劑和提取方法對白花蛇舌草提取物抗氧化活性的影響[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014（1）：511-515.