丁佳駿 奚家龍

摘要：目的：探究不同干燥條件對(duì)冬蟲夏草蛋白質(zhì)成分的影響情況。方法：選取60例冬蟲夏草，根據(jù)隨機(jī)分組原則分為鮮冬蟲夏草組（20例）、37℃曬干組（20例）和60℃烘干組（20例）。比較三組冬蟲夏草蛋白質(zhì)成分情況。結(jié)果：與37℃曬干組和60℃烘干組相比，鮮冬蟲夏草組的蛋白質(zhì)含量（4.502±0.23）mg/g和蛋白分子量（52.6±5.1）kDa均較高（P<0.05）。結(jié)論：不同干燥條件對(duì)冬蟲夏草蛋白質(zhì)成分的影響較顯著，其中鮮冬蟲夏草具有最高的蛋白質(zhì)含量。

關(guān)鍵詞：不同干燥條件;冬蟲夏草;蛋白質(zhì)成分;影響

冬蟲夏草屬于一種菌蟲復(fù)合體，它為傳統(tǒng)的中藥材，其藥用歷史十分悠久。同時(shí)冬蟲夏草具有止血化痰，治療肺部疾病的作用[1]。從現(xiàn)代藥理學(xué)角度來講，冬蟲夏草存在抗氧化、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)的功效，它的活性成分有蛋白、多糖及核苷等。在冬蟲夏草藥材中，蛋白類成分屬于一種十分關(guān)鍵的活性成分，其主要功能包括降壓、抗菌及抗腫瘤。在干燥過程中，蛋白類成分會(huì)發(fā)生結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)方面的改變，使其功效和品質(zhì)受到嚴(yán)重影響[2]。遂本文主要探究不同干燥條件對(duì)冬蟲夏草蛋白質(zhì)成分的影響情況。

1資料與方法

1.1一般資料

選取60例冬蟲夏草，根據(jù)隨機(jī)分組原則分為鮮冬蟲夏草組、37℃曬干組和60℃烘干組，每組分別包含20例冬蟲夏草樣本。

1.2方法

提出冬蟲夏草粗蛋白的方法為：通過料理機(jī)勻漿以后，將鮮冬蟲夏草在-20℃環(huán)境下保存。37℃曬干組的冬蟲夏草是在溫度為37℃的環(huán)境下將鮮冬蟲夏草曬干12小時(shí)后獲得;60℃烘干組的冬蟲夏草是在溫度為60℃的恒溫烘箱中將鮮冬蟲夏草曬干12小時(shí)獲得。通過研磨機(jī)將冬蟲夏草樣品粉碎。對(duì)冬蟲夏草樣品粉末稱取0.2g，將其放置于研缽中，將6ml蛋白提取液加入，在冰盒上進(jìn)行30分鐘的研磨，使其成為勻漿，同時(shí)向離心管中轉(zhuǎn)移，離心溫度為4℃，離心時(shí)間為15分鐘。將上清液100uL向新的離心管中轉(zhuǎn)移，將0.07%DTT和預(yù)冷丙酮1.5ml加入后，將其搖勻，然后放置在-20℃環(huán)境中進(jìn)行6小時(shí)的沉淀處理，將上清液棄掉，然后進(jìn)行揮干處理就可以將粗蛋白樣品獲得，然后按照Bradford方法對(duì)蛋白含量進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)定。

1.3SDS-PAGE蛋白分析

在離心管中加入粗蛋白溶液100uL，將0.07%DTT和預(yù)冷丙酮1.5ml加入后，將其搖勻，然后放置在-20℃環(huán)境中2小時(shí)。將上清液棄掉，然后進(jìn)行揮干處理，然后將20uL純水溶解蛋白加入，按照說明書對(duì)蛋白進(jìn)行純化。在12%的SDS-PAGE上樣孔中將2uL Marker和20uL蛋白質(zhì)樣品加入，然后進(jìn)行電泳處理，首先進(jìn)行低電壓60V的設(shè)置，然后逐漸調(diào)節(jié)至120V。取出凝膠以后，對(duì)其進(jìn)行固定、顯色等相關(guān)處理，最后通過相關(guān)軟件對(duì)凝膠圖譜實(shí)行有效處理。

1.4觀察項(xiàng)目

比較三組冬蟲夏草蛋白質(zhì)成分情況。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

運(yùn)用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)計(jì)量資料進(jìn)行分析，表示方法為“（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）”、檢驗(yàn)方法為“t”，用P<0.05表示結(jié)果有差異。

2結(jié)果

2.1比較三組冬蟲夏草蛋白質(zhì)成分情況

鮮冬蟲夏草組冬蟲夏草含量為（4.502±0.23）mg/g，37℃曬干組冬蟲夏草含量為（2.506±0.31）mg/g，60℃烘干組冬蟲夏草含量為（1.142±0.21）mg/g。相比于37℃曬干組和60℃烘干組，鮮冬蟲夏草組存在較高的蛋白質(zhì)含量（P<0.05）。

2.2比較三組冬蟲夏草蛋白質(zhì)分子量情況

鮮冬蟲夏草組蛋白質(zhì)分子量（52.6±5.1）kDa明顯高于37℃曬干組（34.1±4.3）kDa和60℃烘干組（21.1±4.1）kDa（P<0.05）。

3討論

冬蟲夏草具有較多的功效，蟲草素是其主要的活性成分，美白除黑、益氣養(yǎng)血、止血化痰、補(bǔ)肺益腎、抗疲勞、抗腫瘤及調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能等是冬蟲夏草的主要作用功效，此外，冬蟲夏草還能夠發(fā)揮保健的作用[3]。但在不同的環(huán)境影響下，冬蟲夏草的蛋白質(zhì)成分會(huì)有所變化。相關(guān)研究顯示，對(duì)冬蟲夏草干燥溫度的升高會(huì)減少其蛋白質(zhì)含量，同時(shí)干燥條件的不同也會(huì)改變其蛋白質(zhì)分子量[4]。

本文通過探究不同干燥條件對(duì)冬蟲夏草蛋白質(zhì)成分的影響情況，相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，與37℃曬干組和60℃烘干組相比，鮮冬蟲夏草組的蛋白質(zhì)含量（4.502±0.23）mg/g和蛋白分子量（52.6±5.1）kDa均較高（P<0.05），主要原因可能在于如果干燥溫度較高，可能會(huì)使冬蟲夏草蛋白質(zhì)發(fā)生變化。綜上所述，不同干燥條件對(duì)冬蟲夏草蛋白質(zhì)成分的影響較明顯，其中鮮冬蟲夏草具有最高的蛋白質(zhì)含量，隨著環(huán)境溫度的升高，會(huì)明顯減少冬蟲夏草蛋白質(zhì)含量和蛋白質(zhì)分子量，可見干燥方法的不同對(duì)藥材蛋白存在不同的影響，上述研究結(jié)果的發(fā)現(xiàn)有利于促進(jìn)冬蟲夏草相關(guān)干燥工藝的發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

[1]錢正明，李春紅，李文慶等.冬蟲夏草蛋白圖譜及干燥條件對(duì)超氧化物歧化酶活性影響[J].菌物學(xué)報(bào)，2016，35（4）：424-432.

[2]梅雪艷，李媛媛，沈于蘭等.冬蟲夏草、蟲草菌絲體及蛹蟲草中核苷類成分的測(cè)定[J].藥學(xué)與臨床研究，2015，23（1）：27-29.

[3]李展平，真田則明，孫素琴等.冬蟲夏草中甘露醇和蟲草素的TOF-SIMS分析[J].光譜學(xué)與光譜分析，2016，36（4）：1230-1234.

[4]胡抗遠(yuǎn)，王全興，鮑蕾蕾等.復(fù)方冬蟲夏草口服液對(duì)載脂蛋白E基因敲除小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的影響[J].中國(guó)藥房，2018，29（14）：1912-1916.

作者簡(jiǎn)介：丁佳駿 男 1991-6 本科 助理工程師