侯冕 汪章勛 操海群 檀根甲

摘要 為了篩選防治小麥赤霉病和控制毒素的高效殺菌劑，通過田間小區(qū)藥效試驗(yàn)及小麥樣品DON毒素檢測，研究了4種殺菌劑對小麥赤霉病的防治效果和控制毒素的能力。結(jié)果表明，36%克菌丹·葉菌唑SC、45%戊唑醇·咪鮮胺EW、48%氰稀·戊唑醇SC和40%戊唑·多菌靈SC在小麥抽穗80%，揚(yáng)花初期施用，對小麥赤霉病均有較好的防治效果，病指防效在84.25%～93.96%，樣品DON毒素檢測結(jié)果在0.12～0.64 μg/ml，其中36%克菌丹·葉菌唑SC 900 ml/hm2的病指防效為93.96%，樣品平均DON毒素檢測結(jié)果為0.12 μg/ml，控制毒素效果達(dá)93.72%。

關(guān)鍵詞 小麥赤霉病;殺菌劑;防治效果;毒素

中圖分類號：S435.121?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A?文章編號：2095-3305（2019）06-003-03

DOI： 10.19383/j.cnki.nyzhyj.2019.06.002

Controlling Efficacy of Fungicide Combinations on Fusarium Head Blight and Its Deoxynivalenol Toxin

HOUMian et al（School of Plant Protection，Anhui Agricultural University，Key Laboratory of Biology and Sustainable Management of Plant Diseases and Pests of Anhui Higher Education Institutes，Hefei，Anhui 230036）

Abstract?In order to study controlling efficacy of fungicide combinations on Fusarium head blight and its deoxynivalenol toxin，controlling efficacy of different fungicide combinations on Fusarium head blight （FHB），as well as their impact on content of deoxynivalenol toxin in wheat grain were investigated through field experiment. The results showed that FHB could be controlled by tested fungicides. 36% captan·metconazole SC 900 ml/hm2 had the best control effects on Fusarium head blight，and the control effect was 93.96%. Meanwhile，it had the best inhibition effects of DON，the average DON toxin content in wheat grain was 0.12 μg/ml，and the control effect was 93.72%.

Key words Fusarium head blight;Fungicide;Controlling efficacy;Deoxynivalenol toxin

小麥赤霉病是世界溫暖潮濕和半潮濕地區(qū)麥田廣泛發(fā)生的一種毀滅性病害，在我國江淮地區(qū)發(fā)生尤為嚴(yán)重，屬于典型的氣候型病害，并具有周期性流行的特點(diǎn)[1-2]。2010年以來，我國小麥赤霉病流行明顯增加，呈現(xiàn)北擴(kuò)西移的趨勢。近年來由于氣候條件和栽培方式的變化，小麥赤霉病連續(xù)幾年在安徽地區(qū)大發(fā)生，在大流行年份病穗率超過40%，造成減產(chǎn)20%～40%，甚至絕收，中等流行年份病穗率30%～40%，減產(chǎn)5%～15%[3]。小麥?zhǔn)芎?，不僅影響產(chǎn)量，還產(chǎn)生脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（Deoxynivalenol，DON）、玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEN）等真菌毒素，影響食品安全[3-6]。人畜誤食病粒后會引起發(fā)熱、嘔吐、腹瀉等中毒反應(yīng)，還有致癌、制畸和誘變的作用，嚴(yán)重的甚至導(dǎo)致死亡。相關(guān)研究認(rèn)為賁門癌高發(fā)和食用DON污染的小麥有關(guān)，大骨節(jié)病也和DON相關(guān)[1]。因此，許多國家都制定了DON限量標(biāo)準(zhǔn)，我國DON限量標(biāo)準(zhǔn)為1 000 μg/kg[1]。自2000年以來，小麥赤霉毒素暴發(fā)頻率增加，DON毒素成為小麥增產(chǎn)與質(zhì)量安全的主要威脅，尤其對我國長江流域、黃淮流域等重要冬麥區(qū)構(gòu)成重大危害，流行年份受害小麥面積達(dá)700萬hm2[1]。由于小麥籽粒中的毒素含量超過國家限量標(biāo)準(zhǔn)，部分省區(qū)出現(xiàn)小麥?zhǔn)諆εc利用難題。目前，化學(xué)防治仍是控制小麥赤霉病的重要手段，為此筆者開展了不同殺菌劑防治小麥赤霉病的田間藥效試驗(yàn)，為今后指導(dǎo)小麥赤霉病防治提供科學(xué)依據(jù)。

1?材料與方法

1.1?試驗(yàn)材料

1.1.1?供試殺菌劑?36%克菌丹·葉菌唑SC（陜西上格之路生物科學(xué)有限公司），45%戊唑醇·咪鮮胺EW（四川國光農(nóng)化股份有限公司），48%氰烯·戊唑醇SC（江蘇省農(nóng)藥研究所股份有限公司），40%戊唑·多菌靈SC（江蘇劍牌農(nóng)化股份有限公司）。

1.1.2?供試品種?小麥品種是寧麥13，為小麥赤霉病感病品種。

1.2?試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)田選擇地勢平坦、肥力中等的田塊。試驗(yàn)設(shè)6個(gè)處理（表1）：36%克菌丹·葉菌唑SC 750、900 ml/hm2，45%戊唑醇·咪鮮胺EW 600 ml/hm2，48%氰烯·戊唑醇SC 750 ml/hm2，40%戊唑·多菌靈SC 1 050 ml/hm2，空白對照（清水噴施），每處理3次重復(fù)，共18個(gè)小區(qū)，小區(qū)面積50 m2，隨機(jī)區(qū)組排列。各小區(qū)的肥力、管理?xiàng)l件一致。

1.3?施藥時(shí)間和方法

于小麥抽穗80%，揚(yáng)花初期第1次施藥，間隔7 d左右進(jìn)行第2次施藥。該試驗(yàn)各處理于2017年4月13日施藥1次，施藥時(shí)小麥處于始見花期，4月21日施第2次藥。

將配好的藥液采用衛(wèi)士牌WS？鄄16型背負(fù)式手動噴霧器，按每公頃對水450 L均勻細(xì)水噴霧，藥液重點(diǎn)噴霧于小麥穗部。全田均勻噴霧，施藥時(shí)按單個(gè)重復(fù)依次施藥。

1.4?DON毒素測定

1.4.1?小麥樣品取樣及處理?于小麥成熟期，每小區(qū)對角線隨機(jī)5點(diǎn)取樣，共計(jì)取麥粒1 kg，對應(yīng)重復(fù)處理區(qū)編號。共36份小麥樣品。

采用實(shí)驗(yàn)室小型磨樣機(jī)（浙江托普，F(xiàn)S？鄄II），將病麥粒磨成粉末，并收集保留。為避免樣品間的混雜和污染，在每個(gè)樣品磨碎、收集之后，用刷子將磨樣機(jī)的研磨片及出樣口處清潔干凈。

1.4.2?毒素提取及測定?樣品研磨完成后進(jìn)行毒素的提取，首先稱取研磨好的樣品2.5 g，裝入50 ml塑料離心管中，加入10 ml（4倍）的乙腈水溶液（乙腈∶水=84∶16），浸泡4 h，其間可震蕩混勻數(shù)次。浸泡后將離心管置于離心機(jī)中，4 000 r/min離心5 min;吸取上清液4 ml到Bond Elut Mycotoxin凈化柱，自然流速進(jìn)行凈化;準(zhǔn)確吸取凈化液2 ml于15 ml離心管中，并用50℃氮?dú)饩徛蹈珊?，?.5 ml流動相甲醇水（20∶80）定容，最后將0.5 ml流動相全部過0.22 μm有機(jī)系微孔濾膜，此時(shí)收集的濾液可用于液相色譜測定。

將DON標(biāo)準(zhǔn)品（普瑞邦）進(jìn)行1、5、10、20和25 μg/ml的梯度稀釋，之后進(jìn)行吸收譜峰測定，用于標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制。實(shí)驗(yàn)室所用色譜分析儀為Agilent 1260 Infinity，色譜柱為Agilent ZORBAX Bonus？鄄RP分析柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），樣品進(jìn)樣量為20 μl，流動相為甲醇水（20∶80），流速為1 ml/min，紫外檢測波長設(shè)置為220 nm。檢測過程中記錄每個(gè)樣品的吸收譜峰面積值，并將譜峰值對應(yīng)到標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算的線性方程中，得到毒素濃度。

1.5?調(diào)查項(xiàng)目與方法

1.5.1?病情調(diào)查與防效計(jì)算?于小麥蠟熟期（5月11日，小麥赤霉病病情穩(wěn)定期）調(diào)查各小區(qū)發(fā)病情況，每小區(qū)在中間位置對角線5點(diǎn)取樣調(diào)查，每點(diǎn)調(diào)查200穗，每小區(qū)調(diào)查1 000穗，調(diào)查各級病穗數(shù)，計(jì)算病穗率、病情指數(shù)、防治效果。嚴(yán)重度分級標(biāo)準(zhǔn)：0級，全穗無病;1級，枯穗面積占全穗面積的1/4以下;3級，枯穗面積占全穗面積的1/4～1/2;5級，枯穗面積占全穗面積的1/2～3/4;7級，枯穗面積占全穗面積的3/4以上。

計(jì)算公式：

病穗率（%）=（病穗數(shù)/總調(diào)查株樹）×100（1）

病情指數(shù)=∑（各級病穗數(shù)×相對應(yīng)級別）/（調(diào)查總穗數(shù)×最高級值）×100（2）

病穗防效（%）=（對照區(qū)病穗率-處理區(qū)病穗率）/對照區(qū)病穗率×100（3）

病指防效（%）=（對照區(qū)病情指數(shù)-處理區(qū)病情指數(shù)）/對照區(qū)病情指數(shù)×100（4）

1.5.2?小麥的安全性?施藥后定期觀察所有藥劑處理區(qū)小麥生長狀態(tài)，觀察有無藥害現(xiàn)象發(fā)生。

2?結(jié)果與分析

2.1?幾種復(fù)配殺菌劑對小麥赤霉病的防治效果

由表2可知，5個(gè)處理組的病指防效分別為89.24%、93.96%、91.34%、90.39%和84.25%。病情穩(wěn)定期（臘熟期）調(diào)查，36%克菌丹·葉菌唑SC 900 ml/hm2對小麥赤霉病具有較好的防治效果，對小麥赤霉病的病穗和病指防效分別為92.16%和93.96%，高于45%戊唑醇·咪鮮胺EW 600 ml/hm2、48%氰烯·戊唑醇SC 750 ml/hm2和36%克菌丹·葉菌唑SC 750 ml/hm2，顯著高于40%戊唑·多菌靈SC 1 050 ml/hm2。

2.2?不同復(fù)配殺菌劑控制DON毒素的作用

2.2.1?DON標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制?根據(jù)DON標(biāo)準(zhǔn)品濃度和不同濃度在液相色譜儀上呈現(xiàn)的吸收峰面積間的關(guān)系繪制DON標(biāo)準(zhǔn)曲線，兩者之間呈現(xiàn)一定的線性關(guān)系，線性方程為y=22 168x，相關(guān)系數(shù)R2=0.996（圖1）。

2.2.2?樣品DON毒素含量?根據(jù)線性關(guān)系式對樣品中DON毒素的含量進(jìn)行測定和計(jì)算（表3）。在安徽地區(qū)施用36%克菌丹·葉菌唑SC 900 ml/hm2樣品平均DON毒素含量最低，為0.12 μg/ml，控制毒素效果達(dá)93.72%，施用36%克菌丹·葉菌唑SC 750 ml/hm2樣品平均DON毒素含量為0.42 μg/ml，控制毒素效果為78.01%，由此可以看出同一藥劑不同用量，樣品DON毒素含量存在極顯著差異。施用48%氰烯·戊唑醇SC 750 ml/hm2樣品平均DON毒素含量為0.17 μg/ml，施用40%戊唑·多菌靈SC 1 050 ml/hm2樣品平均DON毒素含量為0.28 μg/ml，施用45%戊唑醇·咪鮮胺EW 600 ml/hm2樣品平均DON毒素含量為0.64 μg/ml，均遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于清水對照（1.91 μg/ml）。

3?小結(jié)與討論

2017年小麥赤霉病在安徽地區(qū)發(fā)生流行，田間藥效試驗(yàn)與小麥樣品DON毒力檢測結(jié)果表明36%克菌丹·葉菌唑SC 900 ml/hm2防治小麥赤霉病最理想，且對小麥生長安全，未發(fā)現(xiàn)有藥害現(xiàn)象，說明可大面積推廣使用，建議第1次施藥在小麥?zhǔn)家娀ㄆ?，間隔7～8 d進(jìn)行第2次防治，可獲得理想效果。

DON是小麥赤霉病致病菌侵染小麥過程中產(chǎn)生的一種真菌毒素，通過結(jié)合到核糖體上的肽基轉(zhuǎn)移酶抑制蛋白質(zhì)合成，破壞人和動物的免疫系統(tǒng)，急性中毒主要表現(xiàn)為嘔吐、腹瀉、頭暈、炎癥和細(xì)胞壞死等癥狀，慢性中毒主要表現(xiàn)在對神經(jīng)系統(tǒng)的危害，引起拒食和體重下降等[7-9]。供試殺菌劑對DON具有良好的抑制效果，均能降低小麥籽粒中DON檢出量。其中，在安徽地區(qū)施用36%克菌丹·葉菌唑SC 900 ml/hm2處理對DON抑制效果最好，樣品平均DON毒素含量最低，控制毒素效果達(dá)93.72%。

參考文獻(xiàn)

[1] 史建榮，劉馨，仇劍波，等.小麥中鐮刀菌毒素脫氧雪腐鐮刀菌烯醇污染現(xiàn)狀與防控研究進(jìn)展[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，47（18）：3641-3654.

[2] 丁靜，梁琨，韓東遷，等.基于ICO-SPA特征提取的近紅外高光譜小麥赤霉病粒嘔吐毒素含量預(yù)測[J].麥類作物學(xué)報(bào)，2019，39（5）：46：22.

[3] 吳佳文，陸彥，王開峰，等.多種殺菌劑對小麥赤霉病及其DON毒素的防效[J]. 中國植保導(dǎo)刊，2018，38（9）：62-67.

[4] 徐飛，宋玉立，王俊美，等.不同侵染時(shí)期對小麥赤霉病發(fā)生和籽粒中DON積累的影響[J].植物保護(hù)，2018，44（6）：129-135.

[5] 陸彥，王科峰，殷茵，等.小麥赤霉病田間病情指數(shù)、病粒率及DON毒素含量之間關(guān)系初探[J]農(nóng)業(yè)科學(xué)與管理，2017，38（7）：54-58.

[6] 靳夢曈.小麥中隱蔽型脫氧雪腐鐮刀菌烯醇真菌毒素產(chǎn)生規(guī)律及分離純化技術(shù)研究[D].上海：上海海洋大學(xué)，2015.

[7] 史建榮，仇劍波，董飛，等.小麥鐮刀菌毒素及其發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)研究進(jìn)展[J].麥類作物學(xué)報(bào)，2016，36（2）：129-135.

[8] MAGAN N，HOPE R，BAXTER E，et al.Relationship between growth and mycotoxin production by fusarium species，biocides and environment[J]. European Journal of Plant Pathology，2002，108：685-690.

[9] AUDENAERT K，CALLEWAERT E，HOFTE M，et al. Hydrogenperoxide induced by the fungicide prothioconazole triggers deoxyni？鄄valenol（DON） production by Fusarium gra？鄄minearum[J]. BMC Microbiology，2010，10（1）：112.

責(zé)任編輯：鄭丹丹