王青

摘 要：本實驗建立紫外分光光度法測定決明子中炮制前后多酚含量的方法。以乙醇作為溶劑，制備供試品溶液并進行方法學研究。沒食子酸標品在1.00～3.50μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（R2=0.9993），回歸方程為：y=0.198x-0.0130，樣品平均回收率分別為98.63%。本論文所建立的方法穩(wěn)定可靠，簡便可行，為決明子藥材的質(zhì)量評價和質(zhì)量控制奠定了基礎。

關(guān)鍵詞：決明子；炮制；紫外分光光度法

1 儀器與試藥

U-1810紫外分光光度計（河北普新精密儀器有限責任公司）、沒食子酸對照品（批號：140509，陜西樂博生化科技有限公司）、福林酚試劑（批號：P/NF-9252，美國公司）、決明子（采購于盛堂制藥公司）經(jīng)鑒定為豆科植物決明或者小決明的干燥成熟種子。

2 方法與結(jié)果

2.1對照品溶液的制備

稱取沒食子酸對照品約20mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加蒸餾水溶解并定容至刻度，即得。

2.2 決明子的炮制

不同的炮制方法浸出的多酚含量均有不同程度的降低或升高。決明子經(jīng)炮制后，多酚浸出物含量有所提高，傳統(tǒng)炮制方法認為，用文火炒至發(fā)出香氣即可，所以本實驗研究決明子的炮制應以炒至外焦內(nèi)老黃色、種皮破裂具有香氣為宜。

2.3 供試品溶液的配制

供試品溶液的制備：取粉碎后的決明子粉末0.5g，精密稱定，加入乙醇50mL，精密稱定重量，放置在水浴上超聲加熱回流30分鐘，靜置冷卻后，再稱重，用乙醇補足失重，搖勻，過濾，精密吸取25mL過濾液，減壓回收乙醇，殘渣用碳酸鈉溶解至10 mL量瓶中定容，搖勻，即得。

2.4 最大波長的確定

精密量取供試品溶液和對照品溶液各適量，分別放置于容量瓶中，各加水至等刻度，加福林酚試劑，搖勻，靜置，加7.5%Na2CO3溶液適量，加水至刻度，搖勻，精置后，同時作空白對照，在波長為400-800nm可見光區(qū)掃描，獲取最大吸收波長為740nm。

2.5 線性關(guān)系考察

精密吸取對照品溶液1mL、1.5mL、2mL、2.5mL、3mL、3.5mL分別將其加入10mL的容量瓶中，加入無水乙醇-乙酸乙酯（2：1）的混合溶液至刻度，搖勻，得對照品系列溶液，測定各樣品的吸光度。以濃度為橫坐標（x），吸光度為縱坐標（y），繪制標準曲線，得回歸方程y=0.198x-0.0130。

2.6 精密度試驗

精密吸取沒食子酸對照品液，平行測定5次，記錄吸光度值。計算得RSD為0.66%，表明該測量儀器精密度良好。

2.7 重復性試驗

取決明子粉末0.5g，共5份，精密稱定，分別按“2.3”項下方法制備供試品溶液，按上述條件進行紫外分光光度法分析，記錄吸光度值。計算得RSD為1.25%，表明該樣品測定重復性良好。

2.8 穩(wěn)定性試驗

取決明子粉末0.5g，共6份，精密稱定，分別按“2.3”項下方法制備供試品溶液，分別在0h，1h，2h，3h，4h，5h按上述條件進行分析，記錄吸光度值。計算得RSD為0.98%，表明該決明子多酚在5h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.9 加樣回收率試驗

精密稱取“2.6”項下已測得多酚成分含量的樣品5份，每份約0.25g，精密稱定，每份分別加入等量對照品溶液，分別按“2.3”項下方法制備供試品溶液，分別測定，記錄吸光度值，平均加樣回收率為98.63%，RSD為1.88%。表明該試驗方法比較穩(wěn)定，操作簡便可行。

2.10 樣品含量測定

分別稱取炮制前后的決明子粉末（過60目篩）約0.5g，各3份，精密稱定。按照“2.3”項下方法制備成供試品溶液，按上述條件進行分析，記錄吸光度值，根據(jù)標準曲線計算樣品中決明子炮制前后的多酚含量，結(jié)果見表1。

3 小結(jié)

本實驗建立紫外分光光度法測定了不同炮制方法決明子藥材中多酚成分的含量，方法學研究表明所建立的定量方法穩(wěn)定、可靠、重復性良好，為評價決明子的多酚成分提供了一種可靠的測量方法，同時為進一步研究決明子的藥理活性作用、質(zhì)量控制和臨床新產(chǎn)品研究開發(fā)利用提供了數(shù)據(jù)支持。

參考文獻：

[1] 董曉強，尹占芳.決明子的化學成分及藥理作用研究[J].中國當代醫(yī)藥，2013，20（7）：18-23.

[2] 王玉寶.紫外分光光度法測定決明子中蒽醌類成分含量[J].中醫(yī)藥臨床雜志報，2013，25（8）：730-732.

項目說明：本文系陜西國際商貿(mào)學院校級課題成果，課題名稱為微波輔助提取決明子中多酚類成分及炮制前后含量變化研究，編號為SMXY201720