劉 帥，張延超，李 滋，張玉婷，李華龍

(天津市藥品檢驗(yàn)研究院，天津 300070)

甲基纖維素(methylcellulose)是一種長鏈取代纖維素，呈白色或類白色纖維狀或顆粒狀粉末，無臭、無味。其作為藥用輔料通常以包衣材料、乳化劑、助懸劑、黏合劑和崩解劑等形式廣泛用于口服制劑、局部用制劑、食品、化妝品以及作為人工晶體植入術(shù)的輔助藥物，通常被認(rèn)為無毒、無致敏、無刺激性[1,2]。

甲基纖維素已被多國藥典收載[2-5]，但是各國藥典各論中對重金屬的檢查規(guī)定各不相同?！吨袊幍洹?015年版和《日本藥局方》17版中，甲基纖維素各論項(xiàng)下僅采用目視比色法檢查砷鹽，《英國藥典》和《美國藥典》中的各論項(xiàng)下不再收載重金屬的檢測項(xiàng)目，而是統(tǒng)一按照ICHQ3D(金屬雜質(zhì)指導(dǎo)原則)的標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行[6,7]。作為藥用輔料的常見檢查項(xiàng)之一，結(jié)合藥品醫(yī)療器械審評審批制度改革專項(xiàng)課題的要求，本文作為2020年版《中國藥典》藥用輔料品種制修訂中甲基纖維素的部分探究結(jié)果，建立了甲基纖維素中4種重金屬(鉛、鎘、砷、汞)的原子吸收分光光度測定法，為甲基纖維素的質(zhì)量控制以及新版藥典的修訂提供了技術(shù)支撐。

1 儀器與試藥

Varian AA-240FS原子吸收分光光度計(jì)，北京吉天AFS-9130原子熒光光度計(jì)，CEM MARS 6 CLASSIC微波消解儀，METTLER TOLEDO XS 205分析天平，Milli-Q純水儀；鉛(批號(hào)15074)、砷(批號(hào)13083)、汞(批號(hào)15095)單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 000 μg/ml)購于中國計(jì)量科學(xué)研究院，鎘(批號(hào)167007-2)單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液購于國家有色金屬及電子材料分析測試中心；所用試劑均為分析純，水為自制純化水；甲基纖維素樣品為3個(gè)廠家提供的共10批樣品。

2 方法與結(jié)果

2.1供試品溶液的制備 取甲基纖維素樣品約0.5 g，精密稱定，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸6 ml和過氧化氫2 ml，旋緊消解罐，放置過夜，置微波消解儀中，按照表1中的微波消解程序消解，消解完全并冷卻后，置電熱板60 ℃緩慢加熱至紅棕色蒸氣揮盡并剩余約1 ml液體，定量轉(zhuǎn)移至25 ml量瓶中，加2%硝酸溶液定容至刻度，即得供試品溶液。如果供試品溶液中元素的含量超過線性范圍，則用2%硝酸溶液進(jìn)行稀釋，以使相應(yīng)元素的濃度位于線性范圍內(nèi)。同法制備空白溶液。

2.2儀器測定條件

2.2.1鉛、鎘的測定 鉛和鎘的測定采用石墨爐法，儀器測定條件及石墨爐參數(shù)見表2。

2.2.2砷、汞的測定 砷和汞的測定采用氫化物原子熒光法，儀器測定條件及原子熒光光度計(jì)參數(shù)見表3。

表1 樣品前處理的微波消解程序

表2 鉛、鎘的儀器測定條件

表3 砷、汞的儀器測定條件

2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 由儀器自動(dòng)配制各元素的標(biāo)準(zhǔn)曲線系列溶液，以吸光度Y為縱坐標(biāo)，濃度X為橫坐標(biāo)，計(jì)算線性回歸方程。結(jié)果顯示，4種元素在各自的線性范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，見表4。

表4 線性回歸方程

2.4檢出限 按照3SD/K和10SD/K分別計(jì)算各元素的檢出限和定量限，其中SD為空白樣品連續(xù)11次進(jìn)樣所得吸光度的標(biāo)準(zhǔn)偏差，K為各元素標(biāo)準(zhǔn)曲線方程的斜率。按照甲基纖維素樣品取樣量為0.5 g計(jì)，鉛、鎘、砷、汞4種元素的檢出限分別為0.012、0.004、0.003和0.003 mg/kg，定量限分別為0.039、0.013、0.010和0.010 mg/kg。

2.5精密度試驗(yàn) 分別取鉛(20 ng/ml)、鎘(1.5 ng/ml)、砷(2 ng/ml)、汞(1.0 ng/ml)元素的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按“2.2”項(xiàng)下方法連續(xù)測定6次，以吸光度計(jì)算RSD，所得結(jié)果鉛為1.54%，鎘為1.48%，砷為1.87%，汞為2.86%，表明儀器精密度良好。

2.6加樣回收率試驗(yàn) 取甲基纖維素樣品約0.5 g，精密稱定，分別加入適量的鉛、鎘、砷、汞標(biāo)準(zhǔn)溶液，按供試品制備并測定(每種元素各低、中、高3個(gè)加標(biāo)濃度，每個(gè)濃度平行操作3次)，計(jì)算各元素的回收率和RSD，結(jié)果見表5。

表5 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=3)

2.7甲基纖維素樣品中4種重金屬的測定 取3個(gè)廠家提供的共10批甲基纖維素樣品，按供試品溶液制備方法制備供試液和空白溶液，按上述條件分別測定并計(jì)算鉛、鎘、砷、汞的含量。結(jié)果顯示，10批樣品中鉛、鎘、砷、汞4種元素的含量均低于各自的檢出限，即均未檢出上述4種重金屬，樣品均符合要求。

3 討論

3.1本試驗(yàn)在樣品前處理時(shí)，對微波消解和濕法消解進(jìn)行了比較，即采用上述兩種消解方法處理同一批次的甲基纖維素，結(jié)果表明，所測定的4種重金屬元素的結(jié)果一致，均未檢出。采用微波消解法進(jìn)行樣品前處理耗時(shí)短、操作安全簡便、溫度易于控制，所得結(jié)果平行性較好，并且適用于大樣本量的檢測。

3.2《中國藥典》2015年版和《日本藥局方》17版中，甲基纖維素各論項(xiàng)下僅采用目視比色法檢查砷鹽，本試驗(yàn)中亦進(jìn)行了原子吸收分光光度法與目視比色法的比較，結(jié)果顯示原子吸收分光光度法的檢出限更低，檢測靈敏度更高，選擇性更強(qiáng)，可以對各種重金屬進(jìn)行準(zhǔn)確的定量。

綜上所述，采用原子吸收分光光度法測定甲基纖維素中的4種重金屬(鉛、鎘、砷、汞)含量，靈敏度高，操作簡便，選擇性和重現(xiàn)性好。本文作為2020年版《中國藥典》藥用輔料品種制修訂中甲基纖維素的部分探究結(jié)果，為新版《中國藥典》的修訂提供了思路以及相關(guān)的實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)支持。