鄭紅波

（沈陽藥科大學(xué)，遼寧 沈陽 110016）

近幾年，食用菌發(fā)展較為迅速，目前大概有350多種供人類食用，食用菌指的是實(shí)體碩大，可以食用的大型真菌，常見的食用菌主要包括木耳、香菇、銀耳、蘑菇、松茸、蟲草、松露等，而羊肚菌是其中一種較為珍貴的食用菌，主要是因?yàn)樵摼奖砻嫘螤钆c羊肚相似，并且凹凸不平，固將其稱為羊肚菌[1]。同時(shí)，羊肚菌還被稱為草笠竹，還具備藥用的功效，可以改善痰壅氣逆喘咳、脘腹脹滿、食積氣滯等[2]。羊肚菌一般生長在經(jīng)歷過山火的山上，從而產(chǎn)量較為稀少，故此而變得比較珍貴。另外，羊肚菌胞內(nèi)具有多糖類物質(zhì)，其具有抗腫瘤、抗疲勞、抗菌、增強(qiáng)免疫力等特性，可以對生物體運(yùn)動(dòng)心肌損傷產(chǎn)生一定的影響[2]。為了證明羊肚菌胞內(nèi)多糖對小鼠運(yùn)動(dòng)心肌損傷的具體影響，設(shè)計(jì)試驗(yàn)就羊肚菌胞內(nèi)多糖對小鼠運(yùn)動(dòng)心肌損傷的影響進(jìn)行相應(yīng)的分析[4]。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

針對羊肚菌胞內(nèi)多糖對小鼠運(yùn)動(dòng)心肌損傷的影響進(jìn)行相應(yīng)的分析，首先采用乙醇對羊肚菌內(nèi)的多糖進(jìn)行相應(yīng)的提取，得知羊肚菌多糖主要是由摩爾比1∶1.059的甘露糖與半乳糖組成。將提取得到的羊肚菌多糖調(diào)制成一定的濃度，作為試驗(yàn)的主要材料[5]。

1.2 試驗(yàn)對象

利用100只患有運(yùn)動(dòng)心肌損傷的昆明小鼠，保證小鼠的體質(zhì)重量為（20±2）g，雌性小鼠與雄性小鼠的數(shù)量比為1∶1，并且保證小鼠有同等級(jí)別的運(yùn)動(dòng)心肌損傷疾病。

1.3 試驗(yàn)方法

將試驗(yàn)對象小鼠根據(jù)雌、雄進(jìn)行正比例分配，分為A組與B組，均分別含有25只雌小鼠、25只雄小鼠。

A組：在試驗(yàn)前4周對該組的小鼠口服安慰劑，劑量為1 g·d-1。安慰劑主要是由糊精裝入空膠囊內(nèi)構(gòu)成，安慰劑對小鼠不存在任何功能。

B組：在試驗(yàn)前4周對該組的小鼠口服多糖腸溶膠丸，劑量也為1 g·d-1。多糖主要是通過乙醇在羊肚菌胞內(nèi)提取而來，性狀為深褐色粉末，將其裝入膠囊，投喂給小鼠。

將上述服用了4周安慰劑與多糖膠囊的兩組小鼠進(jìn)行一次大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)，以此來驗(yàn)證羊肚菌胞內(nèi)多糖對小鼠運(yùn)動(dòng)心肌損傷的影響[6]。具體的運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)如下所示。

首先，在正式運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)前，使A組、B組小鼠在無坡度、速度為5 m·h-1的跑臺(tái)上進(jìn)行短時(shí)間的適應(yīng)性運(yùn)動(dòng)，然后進(jìn)行同等時(shí)間的休息。其次，進(jìn)行正式運(yùn)動(dòng)。運(yùn)動(dòng)方法為：設(shè)定跑臺(tái)坡度為零，起始速度為5 m·h-1，隨著時(shí)間的增加，不斷增加跑臺(tái)的速度，加速度為1/3 m ·h-1，當(dāng)速度增加到15 m·h-1或者小鼠的心率維持在170 bpm以上時(shí)，加速度設(shè)置為0，并穩(wěn)定跑臺(tái)速度，在這樣的運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度下，每隔3 min對小鼠的RPE等級(jí)進(jìn)行測量，同時(shí)對小鼠的心率進(jìn)行全程的監(jiān)控[7]。當(dāng)小鼠心率在180 bpm以上，RPE等級(jí)在19～20范圍內(nèi)，小鼠出現(xiàn)呼吸困難，運(yùn)動(dòng)動(dòng)作不協(xié)調(diào)，不能堅(jiān)持運(yùn)動(dòng)時(shí)，終止運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)。最后，在運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)的過程中需要注意的是，在運(yùn)動(dòng)前以及服藥期間小鼠必須保證正常的飲食與作息，在正式運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)前72 h小鼠不能進(jìn)行劇烈的運(yùn)動(dòng)[8]。

為了對小鼠運(yùn)動(dòng)心肌損傷的影響進(jìn)行分析，對小鼠的相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行相應(yīng)的采集。

1.4 檢測指標(biāo)與檢測方法

為了驗(yàn)證羊肚菌胞內(nèi)多糖對小鼠運(yùn)動(dòng)心肌損傷的影響，對小鼠心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度進(jìn)行檢測，利用相關(guān)的公式對心肌損傷恢復(fù)率進(jìn)行計(jì)算[7]。

心肌損傷恢復(fù)蛋白T主要存在于心肌原纖維絲中，主要采用目前最先進(jìn)的第三代檢測技術(shù)ECLIA法對其進(jìn)行檢測與測定。在檢測過程中采用的試劑盒由北京北方生物技術(shù)研究所提供，測定儀器為FT-630+探頭微機(jī)γ儀[9-11]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

檢測指標(biāo)數(shù)據(jù)一致采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，即以x±s形式對數(shù)據(jù)進(jìn)行相應(yīng)的表示，采用SPSS 18. 0軟件對檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)與分析。對于同一時(shí)間的兩組數(shù)據(jù)之間主要通過獨(dú)立t檢驗(yàn)進(jìn)行比較與分析，差異顯著性標(biāo)準(zhǔn)為P<0.05，當(dāng)P<0.01時(shí)認(rèn)為數(shù)據(jù)之間具有極顯著差異[12-14]。

2 結(jié)果與分析

為了驗(yàn)證羊肚菌胞內(nèi)多糖對小鼠運(yùn)動(dòng)心肌損傷的具體影響，分別在羊肚菌胞內(nèi)多糖濃度為20%、40%、80%的情況下進(jìn)行運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)，然后分別對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行相應(yīng)的分析，對結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，得到試驗(yàn)結(jié)論。

小鼠心肌損傷的恢復(fù)主要由心肌損傷恢復(fù)率來體現(xiàn)。因此，在試驗(yàn)過程中，主要觀察小鼠心肌損傷恢復(fù)率的變化。心肌損傷恢復(fù)率主要由心肌損傷恢復(fù)蛋白T來決定。一般情況下，心肌損傷恢復(fù)蛋白T的濃度越高，則表示心肌損傷恢復(fù)率越大。

心肌損傷恢復(fù)蛋白T主要存在于心肌原纖維絲中，用于心肌損傷的恢復(fù)。該指標(biāo)被美國心臟協(xié)會(huì)認(rèn)定為判斷急性心肌梗死的標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)，健康動(dòng)物血液中心肌損傷恢復(fù)蛋白T的含量應(yīng)該較低。具體的試驗(yàn)結(jié)果如下。

2.1 20%多糖濃度對心肌損傷的影響分析

當(dāng)多糖濃度為20%時(shí)，通過運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)得到兩組小鼠運(yùn)動(dòng)前后心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度變化情況見表1。

表1 運(yùn)動(dòng)前后心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度變化情況Tab.1 Changes of cardiac troponin T concentration before and after exercise

由表1可知，A、B兩組小鼠在運(yùn)動(dòng)前的心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度值沒有明顯的差異，但是經(jīng)過運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)后，A、B兩組小鼠的心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度值顯著性增加，其中，A組P<0.01，表示運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)后小鼠的心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度值得到了顯著性的增加；B組P<0.05，也表示小鼠的心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度得到了顯著增加。

在運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)過程中，A組10號(hào)小鼠運(yùn)動(dòng)前心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度為0.05 ng·mL-1，運(yùn)動(dòng)后心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度為0.16 ng·mL-1，超出了心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度度的標(biāo)準(zhǔn)水平，對于此類數(shù)據(jù)，將其判定為異常數(shù)據(jù)，并且不對其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

通過計(jì)算得到當(dāng)多糖濃度為20%時(shí)，B組小鼠心肌損傷恢復(fù)率為23.26%。說明多糖濃度為20%時(shí)，其對小鼠運(yùn)動(dòng)心肌損傷恢復(fù)具有一定的促進(jìn)作用，但是促進(jìn)作用不太明顯。

2.2 40%多糖濃度對心肌損傷的影響分析

當(dāng)多糖濃度為40%時(shí)，通過運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)得到兩組小鼠運(yùn)動(dòng)前后心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度變化情況見表2。

表2 運(yùn)動(dòng)前后心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度變化情況Tab.2 Changes of cardiac troponin T concentration before and after exercise

由表2可知，運(yùn)動(dòng)前B組小鼠心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度與A組相同，兩組之間并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；隨著運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)的進(jìn)行，時(shí)間與運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度的增加，兩組小鼠運(yùn)動(dòng)后心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度均得到了增長，B組小鼠心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度明顯高于A組。

通過計(jì)算得到當(dāng)多糖濃度為40%時(shí)，B組小鼠心肌損傷恢復(fù)率為45.21%。說明多糖濃度為40%時(shí)，其對小鼠運(yùn)動(dòng)心肌損傷恢復(fù)具有較大的促進(jìn)作用。

2.3 80%多糖濃度對心肌損傷的影響分析

當(dāng)多糖濃度為80%時(shí)，通過運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)得到兩組小鼠運(yùn)動(dòng)前后心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度變化情況見表3。

表3 運(yùn)動(dòng)前后心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度變化情況Tab.3 Changes of cardiac troponin T concentration before and after exercise

由表3可知，運(yùn)動(dòng)前B組小鼠心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度與A組相近，2組之間并無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；隨著運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)的進(jìn)行，時(shí)間與運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度的增加，兩組小鼠運(yùn)動(dòng)后心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度均得到了增長，B組小鼠心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度明顯高于A組。

通過計(jì)算得到當(dāng)多糖濃度為40%時(shí)，B組小鼠心肌損傷恢復(fù)率為68. 94%。說明多糖濃度為40%時(shí)，其對小鼠運(yùn)動(dòng)心肌損傷恢復(fù)具有極大的促進(jìn)作用。

2.4 試驗(yàn)結(jié)果對比

將上述的試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行整合，得到B組試驗(yàn)對比情況見圖1。

圖1 試驗(yàn)結(jié)果多糖濃度對比Fig.1 Comparison of polysaccharide concentration

由圖1可知，隨著投喂多糖膠囊濃度的增加，B組小鼠運(yùn)動(dòng)后心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度也越來越高，得到的心肌損傷恢復(fù)率也越來越大，其對小鼠運(yùn)動(dòng)心肌損傷恢復(fù)的促進(jìn)作用也就越大。說明羊肚菌胞內(nèi)多糖濃度越大，其對小鼠運(yùn)動(dòng)心肌損傷恢復(fù)的促進(jìn)作用越大。

3 結(jié)語

心肌是生物體的重要組成部分，從試驗(yàn)結(jié)果可以看出，隨著羊肚菌胞內(nèi)多糖濃度的增加，小鼠運(yùn)動(dòng)后心肌損傷恢復(fù)蛋白T濃度也越來越高，得到的心肌損傷恢復(fù)率也越來越大，其對小鼠運(yùn)動(dòng)心肌損傷恢復(fù)的促進(jìn)作用也就越大。因此，對羊肚菌胞內(nèi)多糖的作用進(jìn)行詳細(xì)驗(yàn)證，若是羊肚菌胞內(nèi)多糖的作用是有利的，可以采用羊肚菌胞內(nèi)多糖對運(yùn)動(dòng)心肌損傷進(jìn)行治療。