鐘余特 趙立春 唐農(nóng) 冷靜 宋策 王雪 于培良

摘要氧化石墨烯由于其特殊的理化性質(zhì)現(xiàn)已在各種領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。在腫瘤治療方面，其常被用作抗腫瘤藥物的載體。鑒于其表面豐富的修飾位點(diǎn)，可有目的性地對(duì)其表面結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造與修飾以更好地發(fā)揮其載藥與釋藥作用。本文綜述了部分國(guó)內(nèi)外對(duì)其結(jié)構(gòu)改造方面的研究以及將其作為抗腫瘤藥物載體的研究，旨在為今后進(jìn)一步開(kāi)發(fā)其在抗腫瘤方面的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞氧化石墨烯;抗腫瘤;結(jié)構(gòu)改造;分散性;血液相容性;細(xì)胞粘附性;細(xì)胞毒性;納米載體

中圖分類號(hào)：R203文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2019.01.051

石墨烯（Graphene）是一種由碳原子以Sp2雜化方式連接形成的蜂窩狀碳結(jié)構(gòu)物質(zhì)，是目前世界上發(fā)現(xiàn)的最薄的新型納米材料。由于其具有良好的電學(xué)、力學(xué)、熱學(xué)、光學(xué)及等特性而成為“新材料之王”，被譽(yù)為“黑金”[1]。石墨烯性能優(yōu)異、成本低廉，經(jīng)過(guò)數(shù)十年的研究與發(fā)展，現(xiàn)已在新能源、復(fù)合材料以及生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域得到了應(yīng)用[2]。

1分類綜述

1.1氧化石墨烯氧化石墨烯（Graphene Oxide，GO）是石墨烯的氧化物，不同原材料及不同方法制備所得的GO結(jié)構(gòu)存在一定差異，故現(xiàn)今對(duì)其結(jié)構(gòu)研究尚未很明確，但確定其同石墨烯一樣具有六角形蜂巢層狀結(jié)構(gòu)，邊緣多含有羧基，平面上主要有環(huán)氧基、酚羥基、內(nèi)酯等含氧基團(tuán)[3]。純石墨烯不溶于水，而GO由于結(jié)構(gòu)上含氧基團(tuán)的存在，其片層間具有靜電斥力，使其在水及其他有機(jī)溶劑中體現(xiàn)良好的分散性，由于GO上面含有如此豐富的修飾位點(diǎn)，可通過(guò)對(duì)GO中C/O的調(diào)節(jié)實(shí)現(xiàn)對(duì)其親疏水性的調(diào)控[45]。鑒于其較高的比表面積與特殊的兩親性，GO可以通過(guò)多種作用力與其他分子共價(jià)結(jié)合，構(gòu)成的復(fù)合納米材料各種性能都較石墨烯相比更為優(yōu)異。再加上GO特殊的熒光猝滅以及光熱轉(zhuǎn)化特性，其在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用前景較石墨烯而言更為良好，且已經(jīng)在藥物運(yùn)輸、生物傳感、腫瘤光熱治療等方面得到了一定的應(yīng)用[6]。

現(xiàn)今世界，惡性腫瘤已經(jīng)嚴(yán)重危害到人類健康，傳統(tǒng)腫瘤治療藥物主要有化療藥物和生物制劑，雖然對(duì)腫瘤的治療均有一定效果，但易產(chǎn)生耐藥性，而且往往是“殺敵一千，自損八百”地對(duì)正常細(xì)胞同樣具有毒性，因此，研發(fā)高效、特異性強(qiáng)、機(jī)體耐藥性低的抗腫瘤藥物顯得尤為重要。研究表明，將納米材料作為抗腫瘤藥物的運(yùn)輸載體，通過(guò)對(duì)納米材料進(jìn)行功能化改造，可顯著提高納米載體抗腫瘤藥物的靶向性，使抗腫瘤藥物在病灶部位或靶部位聚集，降低藥物非特異性聚集所致的毒性。此外，利用納米材料載藥，還可以達(dá)到對(duì)藥物進(jìn)行控釋、提高藥物的生物膜透過(guò)性、提高口服藥物的生物利用度等諸多優(yōu)良作用[7]。而GO作為理化性質(zhì)優(yōu)良的新型納米材料，將其運(yùn)用于制備靶向抗腫瘤藥物具有良好的開(kāi)發(fā)前景?；诖?，本文對(duì)近些年來(lái)開(kāi)發(fā)GO作為抗腫瘤靶向制劑納米載體的相關(guān)研究成果進(jìn)行綜述，旨在為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)高效、低毒的抗腫瘤藥物提供理論參考。

1.2改善氧化石墨烯性能的結(jié)構(gòu)改造制備氧化石墨烯作為藥物載體，要求其具有較良好的生物相容性，評(píng)價(jià)藥物載體的生物相容性包括血液相容性、細(xì)胞毒性、生殖毒性、致畸性等[89]。如需利用氧化石墨烯抗腫瘤藥物載體起到靶向抗腫瘤作用，除了需要有良好的生物相容性外，還需要具有良好的細(xì)胞粘附性等性能。故通過(guò)化學(xué)反應(yīng)改造GO表面的基團(tuán)，或者將各種有機(jī)或無(wú)機(jī)分子連接其上對(duì)其進(jìn)行功能化修飾，可對(duì)其性質(zhì)有目標(biāo)地進(jìn)行優(yōu)化，從而可以充分實(shí)現(xiàn)對(duì)GO的功能化應(yīng)用。

1.3改變GO在溶劑中的分散性能對(duì)氧化石墨烯的功能化改造常常在液體環(huán)境中進(jìn)行，GO在水中的分散性較好，而在有機(jī)溶劑中的分散能力較弱。為了改善其溶解性，Chao[10]等對(duì)氧化石墨烯進(jìn)行了功能化改造。他們將聚乙二醇與葵二酸進(jìn)行縮合制得雙親性高分子聚合物。利用甲苯2，3二異氰酸酯（TDI）與GO表面的羧基反應(yīng)對(duì)其表面進(jìn)行修飾，使TDI充當(dāng)橋聯(lián)劑將雙親性高分子聚合物與GO連接在一起，從而對(duì)GO進(jìn)行改性。經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，經(jīng)過(guò)改性后的氧化石墨烯在水和DMF中均具有較好的分散效果。

曹也文等[1112]制備了尾端含炔基的氧化石墨烯（ALKtGOS），再用Clicks反應(yīng)將嵌段共聚物N3SEBS（疊氮修飾的苯乙烯乙烯/丁烯苯乙烯三嵌段共聚物）接枝到ALKtGOS上，制備所得的SEBScGOS在SEBS的良溶劑如DMF、THF、NMP等當(dāng)中具有良好分散性，而在SEBS的非溶劑中分散性能較差。此外其還將疊氮修飾的單分散聚苯乙烯（N3PS）與尾端含炔基的GOS進(jìn)行“Click”偶合，制得了PScGOS，其溶劑分散性取決于PS的溶劑分散性，即在PS的良溶劑中分散較好，而在PS的非溶劑中分散較差。

這些實(shí)例均體現(xiàn)了功能化GO的分散性能往往取決于GO上接枝的基團(tuán)性能。通過(guò)化學(xué)方法將具有特定分散性能的物質(zhì)連接其上，可以有目的地對(duì)GO的分散性能進(jìn)行調(diào)控。

1.4增強(qiáng)GO在生理?xiàng)l件下的分散能力要利用GO進(jìn)行載藥以供機(jī)體利用，便需要GO在生理鹽水條件下具有良好的分散性能。Di[13]等發(fā)現(xiàn)，GO以及GOCOOH在含鹽溶液中均會(huì)出現(xiàn)聚集現(xiàn)象，而用聚乙二醇（PEG）或大分子量的聚乙烯亞胺（PEI25k）修飾的GO在同樣濃度的含鹽溶液條件下卻表現(xiàn)良好，且在DMEM溶液中的穩(wěn)定性與NaCl溶液中一致。謝旭東[14]將GO羧基化，然后通過(guò)酰胺反應(yīng)將PEG接枝到GO上，制備GOPEG。實(shí)驗(yàn)顯示GOPEG在PBS以及細(xì)胞培養(yǎng)液中分散性能良好，說(shuō)明用PEG對(duì)GO功能化改善了其生物相容性。PEG在多種極性溶劑中體現(xiàn)較好的溶解性能，其常作為非離子表面活性劑與藥物的無(wú)免疫控釋載體。開(kāi)發(fā)GO的PEG化功能改造，可大大增加GO作為藥物載體的價(jià)值。

1.5增強(qiáng)GO的血液相容性研究表明，GO的血液相容性與其尺寸大小有關(guān)，尺寸為350 nm的GO會(huì)產(chǎn)生較嚴(yán)重的溶血，而尺寸為3 μm的GO引起較少的溶血但也會(huì)達(dá)到10%，微米尺寸的GO不大引起溶血，但易引發(fā)凝血現(xiàn)象[1516]。為了降低其溶血能力，除減小其尺寸外或可通過(guò)對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造達(dá)到目的。

徐東[17]等通過(guò)對(duì)羧基化氧化石墨烯進(jìn)行血液相容性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，即使當(dāng)GOCOOH濃度高達(dá)100 μg/mL時(shí)，其溶血率依然低于5%。何藹[18]等通過(guò)氫鍵、范德華力、ππ共軛等作用力將殼聚糖、白蛋白與脫氧核糖核苷酸連接在GO上制備成生物高分子氧化石墨烯復(fù)合凝膠，通過(guò)體外溶血實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)GOBSA、GOCS、GODNA的溶血率最高均不超過(guò)1%。氯乙酸原為劇毒物質(zhì)，而氯乙酸改性的所計(jì)劃氧化石墨烯與細(xì)胞接觸后短期內(nèi)不體現(xiàn)毒性，且?guī)缀鯚o(wú)溶血作用[19]。

對(duì)GO的血液相容性改造既可通過(guò)直接改造其上官能團(tuán)，也可將其他小分子或高分子通過(guò)共價(jià)或非共價(jià)鍵作用連接其上。原本生物相容性很低的物質(zhì)將其與GO連接后，其功能也會(huì)發(fā)生較大的改變。

1.6提高氧化石墨烯對(duì)細(xì)胞粘附性的功能化修飾提高GO作為藥物載體的細(xì)胞粘附性，可以更大程度上提高藥物作用的靶向性。趙長(zhǎng)虹[20]等將GO上的羧基活化后，把精氨酸甘氨酸天冬氨酸（ArgGlyAsp，RGD）連接其上，制備得到GORGD膜，相比于GO膜，GORGD上表現(xiàn)出非常好的細(xì)胞粘附。徐宏楊等利用L929細(xì)胞對(duì)GO以及GOPEG進(jìn)行了細(xì)胞粘附性實(shí)驗(yàn)，GO對(duì)細(xì)胞粘附性的隨著GO濃度的升高與孵育時(shí)間的增長(zhǎng)呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)，而PEG功能化的GO對(duì)細(xì)胞粘附性能的影響明顯低于GO。

GO通過(guò)對(duì)細(xì)胞的刺激，抑制了細(xì)胞中與粘附性相關(guān)的基因表達(dá)，從而導(dǎo)致降低細(xì)胞的粘附性[21]。對(duì)GO進(jìn)行功能化，降低其對(duì)細(xì)胞中粘附性相關(guān)基因表達(dá)的抑制能力，從而提高其血液相容性。

1.7改善氧化石墨烯毒性的功能化修飾未經(jīng)修飾的GO對(duì)于細(xì)胞具有一定的毒性，且毒性隨著濃度的升高呈現(xiàn)增大的趨勢(shì)。作為藥物載體，GO對(duì)于細(xì)胞的毒性需控制在安全范圍內(nèi)，若將其用作抗腫瘤治療方面，則需要其具有選擇細(xì)胞毒性，即對(duì)腫瘤細(xì)胞具有選擇性殺滅作用。

Robinson等研用聚乙二醇對(duì)還原氧化石墨烯（RGO）進(jìn)行了修飾并利用人上皮乳癌細(xì)胞對(duì)其進(jìn)行了細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)RGOPEG的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)小于未經(jīng)修飾的RGO[22]。徐志遠(yuǎn)等利用A549和MCF72種癌細(xì)胞對(duì)PEG功能化的GO進(jìn)行細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示GOPEG對(duì)2種細(xì)胞的毒性十分小，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而將其負(fù)載冬凌草甲素后，細(xì)胞毒性明顯增大，且大于未被負(fù)載于GOPEG的游離冬凌草甲素[23]。殼聚糖作為生物相容性良好的生物材料，是很好的抗腫瘤藥物載體[24]。曹秀芬[25]等將乳糖?；瘹ぞ厶牵↙CO）與GO相連制備得GOLCO+，并利用肝癌細(xì)胞（QGY7703）對(duì)其進(jìn)行了細(xì)胞毒性研究。發(fā)現(xiàn)當(dāng)GOLCO+的濃度達(dá)到500 μg/mL才會(huì)出現(xiàn)明顯的細(xì)胞毒性，而濃度為100 μg/mL時(shí)基本不體現(xiàn)毒性。種種實(shí)例說(shuō)明利用生物相容性良好的物質(zhì)對(duì)GO進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造與修飾，可以目標(biāo)性地控制其細(xì)胞毒性并將之加以利用。

1.8功能化氧化石墨烯作為抗腫瘤藥物載體

1.8.1作為經(jīng)典化療藥載體SN38（喜樹(shù)堿衍生物）由于其水分散性不好而限制了其應(yīng)用，臨床上多用其前藥伊立替康（CPT11），而CPT11在轉(zhuǎn)化為SN38之前卻代謝了大部分或轉(zhuǎn)變成其他無(wú)活性形式。于是戴宏杰[26]等人最早利用功能化GO進(jìn)行了抗腫瘤藥物的載藥研究。其利用生物相容性良好的PEG對(duì)GO（<50 nm）的支鏈進(jìn)行了功能化改造制得NGOPEG，再通過(guò)非共價(jià)鍵將SN38負(fù)載其上，NGOPEGSN38體現(xiàn)出了極好的水分散性并且保留了SN38在有機(jī)溶劑中的高效力。通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證納米級(jí)的NGOPEG不具有細(xì)胞毒性，而NGOPEGSN38在體外對(duì)人體結(jié)腸癌細(xì)胞（HCT116）有強(qiáng)效的殺滅作用，細(xì)胞毒性是CPT11的23倍。此外，他還用星型PEG對(duì)橫向尺寸小于10 nm的GO進(jìn)行了修飾，制備成了超小型NGOPEG，進(jìn)一步加強(qiáng)了NGOPEG在水以及其他溶劑中的穩(wěn)定性，而后再將利妥昔單抗（Rituxan）結(jié)合在NGOPEG上，最后將制備的復(fù)合物負(fù)載多柔比星（DOX）。通過(guò)比較游離DOX、NGOPEG/DOX、NGOPEGRituxan/DOX在體外環(huán)境中對(duì)淋巴瘤Raji細(xì)胞的作用，發(fā)現(xiàn)NGOPEGRituxan/DOX對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制能力最強(qiáng)，這意味著其在體外環(huán)境中具有殺滅癌細(xì)胞的潛力。并且NGOPEGRituxan/DOX對(duì)DOX的釋放在pH為5.8時(shí)的大于pH為7.4時(shí)，說(shuō)明其的釋藥性能與環(huán)境的pH密切相關(guān)，由于腫瘤細(xì)胞周圍環(huán)境多為偏酸性環(huán)境，該藥物可作為腫瘤靶向藥物[2728]。

徐興英[29]利用Fe3O4與葉酸（FA）分別對(duì)GO進(jìn)行功能化，制備成Fe3O4GO與FAGO，發(fā)現(xiàn)Fe3O4GO具有明顯的超順磁性。在體外環(huán)境下濃度為50 μg/mL的Fe3O4GO與FAGO對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞均不具有細(xì)胞毒性。然后將DOX分別負(fù)載于其上制得Fe3O4GODOX與FAGODOX，同樣用Hela細(xì)胞進(jìn)行體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Fe3O4GODOX與FAGODOX在體外同樣具有明顯的抗腫瘤作用。且兩中載體對(duì)DOX均有緩釋作用，其中FAGO具有明顯的細(xì)胞靶向作用。后來(lái)，趙旭波[30]等亦用葉酸對(duì)GO進(jìn)行了修飾，進(jìn)行DOX負(fù)載的相關(guān)研究。其將葉酸端基化PEG通過(guò)共價(jià)鍵連接在GO微球表面，再通過(guò)在球面上交聯(lián)聚甲基丙烯殼層以防所負(fù)載藥物發(fā)生泄漏，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該復(fù)合物能夠高效地釋放DOX，這是對(duì)葉酸修飾GO負(fù)載DOX的一次更高層次的改進(jìn)。

劉國(guó)棟[31]等用PEG修飾納米級(jí)GO，再將轉(zhuǎn)鐵蛋白（Tf）通過(guò)共價(jià)鍵連接其上，再將其負(fù)載DOX制得了TfPEGNGODOX。并進(jìn)行了對(duì)TfPEGNGO的載藥及釋藥評(píng)價(jià)、TfPEGNGODOX的體外以及體內(nèi)治療膠質(zhì)瘤的評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，TfPEGNGO對(duì)DOX的載藥量達(dá)到了277 μg/mL，TfPEGNGODOX能在中性條件下保持穩(wěn)定，在酸性條件下釋藥速度明顯加快，72 h候的釋藥率達(dá)到了30%。對(duì)TfPEGNGODOX的溶血實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)、胞內(nèi)攝取定量試驗(yàn)結(jié)果顯示：1）其在0.1～5.0 μmol/L濃度范圍內(nèi)培養(yǎng)2 h后的溶血率<6%;2）在濃度為800 μg/mL的TfPEGNGO作用下，C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞的存活率仍然保持有80%，說(shuō)明TfPEGNGO作為DOX的載體本身細(xì)胞毒性極其微弱，而TfPEGNGODOX對(duì)C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞的IC50為13 μg/mL;3）通過(guò)測(cè)量不同時(shí)間點(diǎn)（1、2、4、8、12 h）C6細(xì)胞內(nèi)DOX的含量，通過(guò)相關(guān)計(jì)算發(fā)現(xiàn)相同DOX濃度下TfPEGNGODOX的細(xì)胞攝取速度明顯比單純的DOX以及未用Tf修飾的PEGNGODOX的細(xì)胞攝取速度快得多。說(shuō)明TfPEGNGODOX具有一定的生物安全性，并且對(duì)C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞具有一定的靶向性殺滅作用。此外，劉國(guó)棟等還建立了大鼠C6膠質(zhì)瘤腦內(nèi)移植模型對(duì)TfPEGNGODOX進(jìn)行體內(nèi)抗腫瘤效果實(shí)驗(yàn)。通過(guò)測(cè)量DOX在腫瘤內(nèi)以及腦組織內(nèi)的含量發(fā)現(xiàn)，TfPEGNGODOX組的腦組織以及腫瘤內(nèi)的DOX含量明顯高于DOX裸藥組以及PEGNGODOX組。且通過(guò)TfPEGNGODOX觀察組的大鼠壽命明顯比其他組長(zhǎng)，生存期延長(zhǎng)率達(dá)到了47.1%。這說(shuō)明TfPEGNGODOX不但在體外有抗C6膠質(zhì)瘤的作用，在體內(nèi)同樣具有作用，而且具有很好的膠質(zhì)瘤靶向性。其原因主要是連接于PEGNGO上的Tf，Tf對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞表面轉(zhuǎn)鐵蛋白受體有特異性結(jié)合的作用，用其作為靶向功能基可顯著提升NGO作為抗腫瘤藥物載體的靶向作用。

周銳[32]等利用PEI修飾了GO，利用葉酸（FA）作為PEIGO的靶向功能基，制備了4種金屬配位化合物：1）C15H10CuN3;2）C25H18CuN6O14;3）C12H14N6O12Zn;4）C44H36N4P2RuS2，并將這4種金屬配合物分別負(fù)載于FAPEIGO。并利用2種鼻咽癌細(xì)胞NHE1與CNE2對(duì)這4種負(fù)載金屬配合物的載藥顆粒進(jìn)行了細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)。發(fā)現(xiàn)4種載藥顆粒對(duì)2種癌細(xì)胞均有抑制作用，且對(duì)NHE1的抑制作用強(qiáng)過(guò)對(duì)CNE2的抑制作用。其中載藥顆粒2）的作用最強(qiáng)，具有進(jìn)一步研究與開(kāi)發(fā)的意義。

黎靜雯[33]對(duì)納米級(jí)GO進(jìn)行了PEG功能化，再將抗腫瘤藥物Pt負(fù)載其上制備得PEGNGOPt，發(fā)現(xiàn)PEGNGO不僅對(duì)Pt具有負(fù)載與運(yùn)輸功能，并且可以利用NGO的光熱性能協(xié)同Pt對(duì)宮頸癌Hela細(xì)胞進(jìn)行殺滅，由于光熱效應(yīng)可以增加藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的靶向性，故PEGNGOPt的抗腫瘤性能十分良好。

1.8.2作為中藥抗腫瘤化學(xué)成分載體冬凌草甲素（Oridonin）為貝殼衫烷類二萜化合物，有研究表明其具有抗腫瘤作用[34]。徐志遠(yuǎn)[23]等用六臂PEG對(duì)GO進(jìn)行功能化，再將其負(fù)載冬凌草甲素展開(kāi)了系列研究，發(fā)現(xiàn)GOPEG對(duì)冬凌草甲素的負(fù)載率達(dá)到了105%。通過(guò)利用肺癌細(xì)胞（A549）與乳腺癌細(xì)胞（MCF7）對(duì)GOPEGoridonin進(jìn)行了細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)，未負(fù)載冬凌草甲素的GOPEG基本不具有細(xì)胞毒性，而GOPEGoridonin對(duì)2種腫瘤細(xì)胞的殺滅作用比未被負(fù)載于GOPEG上的冬凌草甲素更強(qiáng)。毛萼乙素（Eriocalyxin B）為冬凌草甲素的類似物，其對(duì)腫瘤細(xì)胞同樣具有抑制作用[35]。徐志遠(yuǎn)[36]等同樣利用GOPEG負(fù)載毛萼乙素并同樣研究了其負(fù)載率、細(xì)胞毒性等性質(zhì)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)GOPEG對(duì)毛萼乙素的負(fù)載率為18.8wt%。與GOPEGoridonin一樣，GOPEGeriocalyxin B一樣對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生了殺滅作用，對(duì)A549的殺滅作用由強(qiáng)到弱依次為GOPEGoridonin>Oridonin>GOPEGeriocalyxin B>Eriocalyxin B，對(duì)MCF7的殺滅作用由強(qiáng)到弱依次為GOPEGeriocalyxin B>GOPEGoridonin>Oridonin>Eriocalyxin B。說(shuō)明GOPEGoridonin適合開(kāi)發(fā)用于治療肺癌，GOPEGeriocalyxin B適合開(kāi)發(fā)用于治療乳腺癌。此外，俞文英[37]等研究了GOPEGoridonin對(duì)結(jié)腸癌的作用，同樣發(fā)現(xiàn)其對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞的殺滅作用也比Oridonin裸藥強(qiáng)得多。

血根堿（SAN）對(duì)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞具有抑制作用，但其溶解性低、穩(wěn)定性差，一直很難得到臨床應(yīng)用。崇羽[38]用六臂聚乙二醇對(duì)GO進(jìn)行修飾，再將血根堿負(fù)載其上成功地克服了SAN水溶性不好的缺點(diǎn)，并且研究了GOPEGSAN的體外細(xì)胞毒性，發(fā)現(xiàn)其很好的保持了血根堿的抗腫瘤作用。

1.9作為抗腫瘤基因藥物載體Liming[39]等人最早將SiRNA與DOX同時(shí)負(fù)載于PEI功能化的GO上以實(shí)現(xiàn)對(duì)藥物的貫序傳遞，并利用宮頸癌Hela細(xì)胞進(jìn)行了細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)發(fā)GOPEISiRNA/DOX對(duì)于腫瘤細(xì)胞的殺滅作用大于SiRNA與DOX單獨(dú)對(duì)細(xì)胞的殺滅作用，并對(duì)用PEIGO作為抗腫瘤藥物以及基因藥物的載體進(jìn)行了展望。此后牛高麗[40]等將葉酸（FA）與聚乙二醇（PEG）通過(guò)酰胺鍵連接，再將該復(fù)合物與胺甲基芘鹽酸鹽連接到GO表面對(duì)GO進(jìn)行修飾，再利用該物質(zhì)與具有負(fù)電性靶向的hTERT的SiRNA（抑制凋亡抑制蛋白基因的表達(dá)而具有促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用，從而具有抗腫瘤的潛能）連接在一起制成GOPEGFAPyNH2hTERTsiRNA[41]。葉酸對(duì)于腫瘤細(xì)胞具有高度的靶向性，故通過(guò)葉酸修飾GO制備出的復(fù)合物對(duì)于腫瘤細(xì)胞同樣具有靶向性[42]。同樣通過(guò)Hela細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)復(fù)合物對(duì)癌細(xì)胞的殺滅率遠(yuǎn)大于裸SiRNA。此外其還在GOPEGFAPyNH2hTERTsiRNA上負(fù)載了DOX以進(jìn)行對(duì)SiRNA和DOX的貫序傳遞釋藥，通過(guò)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)既負(fù)載有SiRNA又負(fù)載有DOX的復(fù)合物其殺滅腫瘤細(xì)胞的能力大于僅負(fù)載有SiRNA的藥物。

在多種腫瘤細(xì)胞中，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子3（Stat 3）均呈現(xiàn)過(guò)度表達(dá)，會(huì)抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡，阻斷該通路的表達(dá)可以達(dá)到滅殺腫瘤細(xì)胞的作用。Zhang[43]等人利用具有Stat 3特異的SiRNA表達(dá)質(zhì)粒，發(fā)現(xiàn)其可以成功抑制Stat 3的表達(dá)，但并不能完全阻斷其表達(dá)。殷迪[4445]利用PEG與PEI對(duì)GO進(jìn)行功能化，使GO獲得PEG在生理?xiàng)l件下的穩(wěn)定性以及PEI對(duì)基因的靶向作用，制得了GOPEIPEG，再用其對(duì)Stat 3特異的SiRNA質(zhì)粒進(jìn)行負(fù)載。將GOPEIPEGSiRNA Stat 3進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其對(duì)小鼠惡性黑色素瘤的生長(zhǎng)有抑制作用，且GO具有吸收紅外線的能力，通過(guò)增射紅外光，協(xié)同物理作用對(duì)小鼠體內(nèi)的腫瘤進(jìn)行殺滅。

地西他濱（DAC）是一種腺苷類似物，是目前已知最強(qiáng)的DNA甲基化特異性抑制劑。盧宜梅[46]用一種對(duì)肺癌細(xì)胞A549具有靶向作用與吸附性的寡糖苷酸鏈（aptamer A1）對(duì)GO進(jìn)行修飾，然后負(fù)載DAC。發(fā)現(xiàn)A1GO對(duì)DAC的負(fù)載率很高，且存在依賴于pH的釋藥性能，即在偏酸性的條件下釋藥速率比中性環(huán)境中快。此外，其還對(duì)A549細(xì)胞具有高度靶向性，可吸附于A549細(xì)胞并發(fā)揮很好的治療效果。

2討論

氧化石墨烯由于其特殊的理化性質(zhì)近年來(lái)得到了廣泛的應(yīng)用，尤其是在生物醫(yī)學(xué)方面，其表面豐富的修飾位點(diǎn)使眾多的科研工作者們對(duì)其載藥釋藥功能十分感興趣。通過(guò)對(duì)GO表面進(jìn)行修飾可以有目的性地改變其理化性質(zhì)以及生物相容性，使其充分發(fā)揮藥物載體的作用。GO被修飾后的性質(zhì)多半取決于其上的功能基團(tuán)的性質(zhì)：用血液相容性良好的物質(zhì)修飾GO，可使GO具有良好的血液相容性;用對(duì)病灶具有靶向功能的物質(zhì)修飾GO，可使GO具有良好的靶向性。其中，氨基酸類物質(zhì)作為修飾GO的功能基既可使GO具有良好的生物相容性，又可使其具有良好的靶向性，這將是今后對(duì)于GO修飾的研究趨勢(shì)之一。

自2008年首次有科學(xué)家對(duì)其負(fù)載抗腫瘤藥方面進(jìn)行了相關(guān)研究以來(lái)，現(xiàn)已有對(duì)GO負(fù)載經(jīng)典化療藥、抗腫瘤中藥成分、基因藥物的相關(guān)研究。但一直以來(lái)研究的主要對(duì)象多集中于DOX，而對(duì)于其他藥物研究很少。某些藥物或許本身抗腫瘤活性較低甚至不具備抗腫瘤活性，但將其負(fù)載于功能化的GO上或可體現(xiàn)出抗腫瘤活性。若對(duì)這一類藥物進(jìn)行負(fù)載研究，將會(huì)是一個(gè)新的探索領(lǐng)域。

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（2018-01-16收稿責(zé)任編輯：張文婷）