趙筱斐　楊琴芳　袁呂江

摘? ?要：本文的目的是研究太子參須顆粒劑（Pseudostellaria? Heterophylla? Fibrous? Root Granules，PHFRG）在主要藥效學(xué)劑量或之上時(shí)對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)有無不良的影響，考察其安全藥理學(xué)的情況。采用觀察自發(fā)活動(dòng)次數(shù)、爬桿試驗(yàn)、與鎮(zhèn)靜藥物的協(xié)同作用的方法觀察PHFRG對小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的影響;通過測定呼吸幅度、呼吸頻率、動(dòng)脈收縮壓、動(dòng)脈舒張壓、動(dòng)脈平均壓、心電圖、心率以觀察PHFRG對家兔呼吸系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)的影響。結(jié)果顯示，小鼠神經(jīng)系統(tǒng)試驗(yàn)中，各試驗(yàn)組與空白組比較均無顯著性差異;家兔試驗(yàn)中，各給藥組與空白組比較均無顯著性差異。PHFRG對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物三大重要系統(tǒng)無不良影響。

關(guān)鍵詞：安全藥理;太子參須顆粒劑;中樞神經(jīng)系統(tǒng);呼吸系統(tǒng);心血管系統(tǒng)

一般藥理學(xué)研究是藥物臨床前安全性評價(jià)的重要組成部分，研究主要藥效學(xué)作用以外廣泛的藥理學(xué)，主要為對人體最重要的中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的影響，通過一般藥理學(xué)研究，可為臨床研究和安全用藥提供信息，也可為長期毒性試驗(yàn)設(shè)計(jì)和開發(fā)新的適應(yīng)癥提供參考[1]。太子參須顆粒劑（PHFRG）是以太子參須制成的劑型，太子參須是太子參藥材采摘后棄去的須根部分，有著與太子參相似的藥效。具有益氣生津，補(bǔ)肺健脾之功效，以“清補(bǔ)”見長。主治心悸自汗，脾虛食少，疲倦乏力，氣陰不足，自汗口渴，肺燥干咳等癥[2]。在前期主要藥效學(xué)的基礎(chǔ)上，本實(shí)驗(yàn)對PHFRG的一般藥理學(xué)進(jìn)行研究。觀察其對動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的影響，初步考察藥物的安全性。

1? ? 材料

1.1? 受試藥物

太子參須顆粒劑（PHFRG），棕黃色顆粒，批號：2016100033，1 g中含2 g生藥。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要的劑量，臨用前用蒸餾水溶解配置使用。

1.2? 試驗(yàn)動(dòng)物

KM小鼠，體質(zhì)量18～22 g;新西蘭大白兔，體質(zhì)量1.5～2.5 kg。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均為SPF級，由重慶市中藥研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，雌雄各半，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號：SCXK（渝）2012-0006。

1.3? 試劑與儀器

生理鹽水、戊巴比妥鈉（廣州思樂公司）、肝素鈉（成都市科龍化工試劑廠，生產(chǎn)批號2016041801）、三級水、灌胃器、注射器、體重秤、光滑金屬桿、秒表、多導(dǎo)生理采集系統(tǒng)、家兔固定箱、家兔手術(shù)臺(tái)、動(dòng)脈插管、氣管插管、呼吸換能器、血壓換能器、心電圖導(dǎo)聯(lián)電極、手術(shù)刀、止血鉗、眼科剪、手術(shù)鑷、動(dòng)脈夾。

2? ? 方法

2.1? 給藥劑量及分組情況

40只健康KM小鼠，隨機(jī)分為4組，10只/組，雌雄各半，分別為空白生理鹽水對照組、PHFRG的低、中、高劑量組;24只健康新西蘭大白兔，隨機(jī)分為4組，6只/組，雌雄各半，分別為空白生理鹽水對照組和PHFRG的低、中、高劑量組。由于PHFRG的有效劑量為每人每天10～30 g，為驗(yàn)證藥物的安全藥理，設(shè)定小鼠低、中、高劑量分別為2 599.8 mg/kg、5 199.7 mg/kg、10 399.4 mg/kg;設(shè)定家兔低、中、高劑量分別為1 090 mg/kg、2 180 mg/kg、4 360 mg/kg。

2.2? 觀察指標(biāo)

2.2.1? 對小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響

2.2.1.1? 對小鼠自發(fā)活動(dòng)的影響

取分好的4組小鼠，分別按2.1項(xiàng)下分組情況給藥，灌胃給藥1次。實(shí)驗(yàn)前禁食12 h，以增加覓食活動(dòng)。給藥前和給藥后0.5 h、1 h、1.5 h、2 h、3 h，觀察各組小鼠3 min內(nèi)的自發(fā)活動(dòng)次數(shù)。用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法檢驗(yàn)其差異性。

2.2.1.2? 小鼠爬桿試驗(yàn)

取分好的4組小鼠，分別按2.1項(xiàng)下分組情況給藥，灌胃給藥1次。給藥前和給藥后0.5 h、1 h、1.5 h、2 h、3 h，進(jìn)行小鼠爬桿試驗(yàn)。用一根長約50～100 cm，直徑1～2 cm的光滑金屬桿，基部固定，小鼠放在桿頂，讓其自行爬下。并按標(biāo)準(zhǔn)分級：0級為一步一步向下爬;1級為向下滑行;2級為不能抓住棒;3 級為翻正反射消失。最后以得分（各級分別為0，1，2，3分）計(jì)算。用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法檢驗(yàn)其差異性。

2.2.1.3? 與鎮(zhèn)靜藥物協(xié)同/拮抗作用

（1）預(yù)實(shí)驗(yàn)（戊巴比妥鈉閾劑量的選擇）：取未分組的10只小鼠，向其腹腔緩慢注射0.1%戊巴比妥鈉溶液（用注射用生理鹽水配制）篩選出產(chǎn)生催眠藥理效應(yīng)時(shí)戊巴比妥的劑量，當(dāng)小鼠頭部失去支撐力偏向一側(cè)或低垂并閉眼時(shí)，記錄注射藥物的量，即為小鼠睡眠效應(yīng)的閾劑量值。

（2）對小鼠戊巴比妥鈉閾下劑量催眠的影響：按2.1項(xiàng)下灌胃給藥1次，給藥30 min后腹腔注射閾劑量戊巴比妥鈉，觀察30 min內(nèi)各組小鼠入睡只數(shù)（以小鼠翻正反射消失達(dá)1 min以上作為入睡指標(biāo)）。

2.2.1.4? 一般行為表現(xiàn)觀察

觀察給藥期間小鼠自主活動(dòng)情況，觀察各組小鼠姿勢、步態(tài)、有無流涎、肌顫及瞳孔變化等，并記錄。

2.2.2? 對家兔心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的影響

2.2.2.1? 戊巴比妥鈉麻醉劑量的確定

取未分組的6只大白兔，雌雄各半，向其耳緣靜脈緩慢注射1%的戊巴比妥鈉，同時(shí)觀察各只大白兔的麻醉情況。當(dāng)紗布刺激眼角無角膜反應(yīng)，呼吸緩慢平穩(wěn)，肌張力下降，夾鼻子腳趾無反應(yīng)時(shí)，表明達(dá)到可以進(jìn)行手術(shù)的程度。此時(shí)記下戊巴比妥鈉注入的劑量。

2.2.2.2? 試驗(yàn)方法

取已分好組的4組家兔，稱定體重后，按上述確定好的戊巴比妥鈉麻醉劑量進(jìn)行麻醉，麻醉后仰臥固定。多導(dǎo)生理采集系統(tǒng)連接電腦，壓力換能器接好動(dòng)脈插管后，充滿1%的肝素鈉生理鹽水溶液，再將換能器固定于夾持器上。進(jìn)行硬件軟件系統(tǒng)的復(fù)位調(diào)零，輸入信號，開始采集，使其各項(xiàng)指標(biāo)歸于零值。剪去家兔頸部毛后，進(jìn)行手術(shù)，分離氣管，進(jìn)行氣管插管術(shù)，連接呼吸換能器，觀察采集曲線及波形。接著進(jìn)行頸總動(dòng)脈插管術(shù)，觀察動(dòng)脈血壓的波形。注射用針頭插入四肢皮下，連接心電電極，采集心電圖曲線。描記一段藥前各信號通道的曲線及波后，按2.1項(xiàng)下劑量經(jīng)嘴灌服PHFRG，并觀察藥后0.5 h、1 h、1.5 h、2 h、3 h等各時(shí)間段各通道的波形情況。記錄曲線后，觀察并處理數(shù)據(jù)，用SPSS檢驗(yàn)差異性。

3? ? 結(jié)果

3.1? 神經(jīng)系統(tǒng)試驗(yàn)結(jié)果

3.1.1? 對小鼠自發(fā)活動(dòng)的影響

結(jié)果見表1。結(jié)果表明，在PHFRG灌胃給藥前和給藥后0.5 h、1 h、1.5 h、2 h、3 h，與對應(yīng)對照組同一時(shí)間點(diǎn)比較，藥物各劑量組各時(shí)間段的自發(fā)活動(dòng)次數(shù)與對照組比較無顯著性差異（P>0.05）。

3.1.2? 小鼠爬桿實(shí)驗(yàn)

結(jié)果如表2所示。在PHFRG灌胃給藥前和給藥后0.5 h、1 h、1.5 h、2 h、3 h，與對照組在同一時(shí)間點(diǎn)比較，PHFRG各劑量組的爬竿能力均無顯著性差異（P>0.05），除對照組和PHFRG中劑量組分別有一只小鼠后腳不能一步一步爬下而是滑下以外，其余小鼠前后腳均能一步一步爬下，評分為0分級別，即用藥后小鼠幾乎均能一步一步向下爬。

3.1.3? 與鎮(zhèn)靜藥物協(xié)同/拮抗作用

（1）預(yù)實(shí)驗(yàn)：經(jīng)10只小鼠腹腔注射0.1%戊巴比妥鈉篩選出的小鼠睡眠效應(yīng)的閾劑量值約為14.5 mg/kg，個(gè)別小鼠因個(gè)體差異，該值可能稍微會(huì)有點(diǎn)差別。

（2）對小鼠戊巴比妥鈉閾下劑量催眠的影響：結(jié)果如表3所示。由結(jié)果可知，除PHFRG低劑量組有一只小鼠入睡外，其余劑量組小鼠均未達(dá)到催眠效應(yīng)，提示PHFRG對戊巴比妥鈉閾下劑量的小鼠沒有催眠作用。

3.1.4? 一般行為表現(xiàn)觀察

給藥期間小鼠無肌顫、流涎及瞳孔異常等變化，姿勢行為步態(tài)正常，且對照組與試驗(yàn)動(dòng)物組幾乎無差別。

3.2? 呼吸系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)試驗(yàn)結(jié)果

3.2.1? 對家兔血壓的影響

結(jié)果如表4所示，PHFRG各劑量組與同一時(shí)間點(diǎn)的對照組比較，各時(shí)間段動(dòng)脈收縮壓、舒張壓、平均壓均無顯著性差異（P>0.05），表明PHFRG對家兔的血壓無明顯影響。血壓測定的波形圖截圖如圖1所示。

3.2.2? 對家兔呼吸系統(tǒng)的影響

結(jié)果如表5所示，PHFRG各劑量組與同一時(shí)間點(diǎn)的對照組比較，各時(shí)間段家兔呼吸頻率和呼吸幅度均無顯著性差異，表明PHFRG對家兔的呼吸頻率和呼吸幅度均無明顯影響（P>0.05）。呼吸曲線測定的波形圖截圖如圖2所示。

3.2.3? 對家兔心率和心電圖的影響

心率測定結(jié)果如表6所示，心電圖各時(shí)期指標(biāo)測定結(jié)果如表7所示。由結(jié)果可知，PHFRG各劑量組與同一時(shí)間點(diǎn)的對照組比較，各時(shí)間段家兔心率及心電圖的P-R間期、QRS間期、QT間期和T波均無顯著性差異（P>0.05），表明PHFRG對家兔的心率及心電圖均無明顯影響。心電圖截圖如圖3所示。

4? ? 結(jié)語

小鼠自發(fā)活動(dòng)的情況和爬桿試驗(yàn)?zāi)茏鳛槠渲袠猩窠?jīng)系統(tǒng)的是否正常的指標(biāo)之一，能反映小鼠的協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)和平衡能力[3-4]，若藥物對其中樞神經(jīng)系統(tǒng)有影響，則小鼠可能會(huì)表現(xiàn)出活動(dòng)次數(shù)減少的抑制現(xiàn)象或者活動(dòng)次數(shù)增多的躁狂現(xiàn)象;或是不能一步步爬下金屬桿而是整個(gè)身體滑下或掉落。與鎮(zhèn)定藥物的協(xié)同/拮抗作用也屬于一般藥理研究的內(nèi)容 [1，4]，能反映藥物對動(dòng)物是否具有催眠或是興奮的作用，可作為對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有無影響的指標(biāo)之一。對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥前后血壓的較全面的監(jiān)測，包括收縮壓、舒張壓、平均壓，以及包括心率、心電圖各時(shí)期在內(nèi)指標(biāo)的監(jiān)測，呼吸頻率及呼吸幅度的監(jiān)測，能較全面地反映出藥物對心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的影響[1，5，6，7，8]。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，PHFRG給藥后對小鼠戊巴比妥鈉閾下劑量睡眠情況無明顯影響，提示其與戊巴比妥鈉無協(xié)同作用;對給藥后0.5 h、1 h、1.5 h、2 h、3 h的小鼠自主活動(dòng)無顯著影響，對給藥后0.5 h、1 h、1.5 h、2 h、3 h小鼠的協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)和平衡能力無顯著影響，動(dòng)物無肌顫、流涎及瞳孔異常等變化，提示PHFRG對小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)無明顯不良作用。PHFRG給藥后總的來說對家兔呼吸頻率、呼吸幅度、動(dòng)脈收縮壓、動(dòng)脈舒張壓、動(dòng)脈平均壓、心率及心電圖各期指標(biāo)與空白對照組相比無顯著差異，提示PHFRG對家兔神經(jīng)系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)無明顯不良作用。綜上，PHFRG對中樞神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)無明顯不良影響。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為PHFRG在安全性研究和臨床應(yīng)用提供了一定的安全性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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Study on the general pharmacology of Pseudostellaria Heterophylla Fibrous Root Granules

Zhao Xiaofei， Yang Qinfang Yuan Lyujiang

（Pharmacy & College of Ttraditional Chinese Medicine， Southwest University， Chongqing 400715， China）

Abstract：The purpose of this paper was to study whether the Pseudostellaria Heterophylla Fibrous Root Granules. PHFRG had adverse effects on the nervous system， respiratory system and cardiovascular system of the experimental animals at or above the main pharmacodynamic dose， and the safety pharmacology of the experimental animals was examined. By observing the number of spontaneous activities， the climbing bar test was carried out. The effects of PHFRG on the nervous system of mice were observed by the method of synergistic action with sedative drugs. The effects of PHFRG on respiratory system and cardiovascular system in rabbits were observed by measuring respiratory amplitude， respiratory rate， arterial systolic pressure， arterial diastolic pressure， mean arterial pressure， electrocardiogram and heart rate. The results showed that there was no significant difference between each experimental group and the blank group in the nervous system test of mice， and there was no significant difference between each administration group and the blank group in the rabbit experiment. PHFRG had no adverse effect on the three important systems of the experimental animals.

Key words：safety pharmacology; Pseudostellaria Heterophylla Fibrous Root Granules; central nervous system; respiratory system; cardiovascular system