胡惠敏

（蘇州市相城人民醫(yī)院病理科 江蘇 蘇州 215131）

宮頸癌作為臨床中女性生殖系統(tǒng)常見的一種惡性腫瘤，其發(fā)病率頗高，嚴(yán)重威脅著女性的生命健康、工作和生活質(zhì)量，并且近年來呈現(xiàn)年輕化的發(fā)展趨勢(shì)，調(diào)查顯示，宮頸癌的病死率是婦科惡性腫瘤病死率最高的，且全球范圍內(nèi)宮頸癌為女性惡性腫瘤中第三位。宮頸癌發(fā)病過程為漸進(jìn)式，調(diào)查資料顯示由正常宮頸進(jìn)展為宮頸癌，所需時(shí)間大約為10年左右。在高危群體中開展宮頸組織活檢和病理學(xué)檢查，對(duì)于早期發(fā)現(xiàn)宮頸病變、防治宮頸癌具有重要意義。資料表明，癌癥的發(fā)生、發(fā)展受到多種抑癌基因的影響，抑癌基因P16與增殖細(xì)胞核抗原Ki67與宮頸癌發(fā)病、進(jìn)展和預(yù)后有一定的相關(guān)性。采用免疫組化方法對(duì)P16與Ki67的表達(dá)在宮頸病變?cè)\斷中的臨床意義進(jìn)行探討，報(bào)道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

標(biāo)本來自我院2016年1月－2018年12月收治的80例行宮頸活檢或手術(shù)患者，其年齡平均（43.76±6.56）歲；病程（2.73±1.05）年。其中診斷為宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasias，CIN）64例，分期為CINⅠ期患者20例，CINⅡ期患者23例，CINⅢ期患者21例，宮頸鱗癌16例。另選擇同時(shí)期內(nèi)我院20例正常宮頸組織作為對(duì)照組，平均年齡（43.15±5.46）歲。各組年齡、文化水平等指標(biāo)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。所有組織標(biāo)本均以10%的甲醛溶液固定和常規(guī)石蠟包埋。之前所有患者均未接受放、化療和免疫治療。

1.2 方法

本試驗(yàn)標(biāo)本采取10%的甲醛溶液固定、石蠟包埋后，進(jìn)行連續(xù)3～4 um厚度的切片，Envision免疫組化染色，使用已經(jīng)檢測(cè)的陽性片作為陽性對(duì)照，PBS緩沖液作陰性對(duì)照，將切片交由兩名副高級(jí)以上的病理醫(yī)師進(jìn)行閱片，若其意見不統(tǒng)一則再經(jīng)過科室3名副高級(jí)以上病理醫(yī)師會(huì)診最終確定診斷。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)

P16在宮頸上皮細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)中呈集中陽性表達(dá)，為彌漫的棕黃色；Ki67陽性表達(dá)集中于細(xì)胞核，呈棕黃色顆粒狀。以染色細(xì)胞數(shù)量、強(qiáng)弱來進(jìn)行定性判斷：陰性（-）是指染色細(xì)胞5%以下，弱陽性（+）是指染色細(xì)胞5%～25%，陽性（++）是指染色細(xì)胞26%～50%，強(qiáng)陽性（+++）是指染色細(xì)胞50%以上［1］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 P16與Ki67的表達(dá)

P16與Ki67在正常宮頸、CIN、宮頸鱗癌組織中的陽性表達(dá)率存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），見表。

表 各組P16與Ki67的表達(dá)情況比較

2.2 P16、Ki67表達(dá)與宮頸病變的關(guān)系

在宮頸病變的檢測(cè)診斷中，P16檢測(cè)的敏感性為83.8%（67/80)，采用spearman法分析相關(guān)性得知，P16的表達(dá)與病變的嚴(yán)重程度呈明顯正相關(guān)（r=0.594，P＜0.05）；Ki67檢測(cè)的敏感性為88.8%（71/80），采用spearman法分析相關(guān)性得知，Ki67的表達(dá)與病變的嚴(yán)重程度呈顯著正相關(guān)（r=0.416，P＜0.05）。

3.討論

宮頸癌的發(fā)展呈緩慢漸進(jìn)的形式進(jìn)行，早期病變表現(xiàn)往往缺乏特異性，從而容易被患者忽視或在臨床漏診，尤其是那些沒有癥狀和體征的早期宮頸病變患者；不利于患者及時(shí)接受積極治療，提高患者預(yù)后。臨床對(duì)宮頸病變的篩查一般采取液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查和人乳頭狀瘤病毒（human papillomavirus，HPV）病毒檢測(cè)，但前者具有主觀性傾向，檢測(cè)結(jié)果易受醫(yī)生水平的影響，誤差率較大；后者只是對(duì)HPV的感染做出提示而并不能反映HPV在宿主細(xì)胞中的存在狀況；此外，數(shù)據(jù)表明有90%的HPV感染者可通過自身清除病毒而達(dá)到疾病自限［2］。因此，采用高敏感度的標(biāo)志物進(jìn)行輔助篩查宮頸病變，對(duì)于提高臨床診斷率具有重要意義。

P16是最早由Kamp報(bào)道的一種位于染色體部位的抑癌基因，又稱為多腫瘤抑制基因，是人類惡性腫瘤中最為常見的突變基因；是一種細(xì)胞周期依賴性激酶抑制蛋白，可直接參與人體細(xì)胞調(diào)控，對(duì)細(xì)胞分裂增殖起控制作用，有研究證明P16的缺失或發(fā)生突變，均可引起細(xì)胞增殖周期紊亂，使細(xì)胞陷入無限增殖，乃至于發(fā)生癌變。Ki67屬于增殖細(xì)胞核抗原，是一種有絲分裂相關(guān)蛋白，能夠反映出細(xì)胞的增殖程度與活性，陽性表達(dá)反映了細(xì)胞活躍的增殖狀態(tài)。

宮頸癌常用的診斷方法陰道鏡及宮頸細(xì)胞學(xué)檢查對(duì)一些無臨床癥狀及體征的宮頸癌患者可能出現(xiàn)誤診；因此，急需尋找可有效提高宮頸癌早期診斷率的診斷手法，以期提高宮頸癌診斷率，為患者積極治療提供可能。研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌的發(fā)生發(fā)展過程中抑癌基因的失活及多癌基因的激活在其中發(fā)揮重要作用，臨床常用的近年來P16與Ki67被研究證明在宮頸上皮內(nèi)病變組織中的表達(dá)有增高趨勢(shì)［3］。

本文通過免疫組化方法檢測(cè)了我院近年來行宮頸活檢或手術(shù)的80例患者中P16與Ki67的表達(dá)情況，結(jié)果表明，P16與Ki67在正常宮頸、CIN、宮頸鱗癌組織中的陽性表達(dá)率存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）；通過進(jìn)行相關(guān)性分析得知，P16與Ki67的表達(dá)與病變的嚴(yán)重程度呈明顯正相關(guān)（P＜0.05）。

綜上所述，P16與Ki67用于宮頸病變檢測(cè)的敏感性較高，且其表達(dá)可反映宮頸上皮內(nèi)病變的嚴(yán)重程度，能夠作為臨床診斷宮頸病變的重要參考依據(jù)。