劉詩音
摘要:利用單因素試驗篩選培養(yǎng)基碳氮源及氮源分別為玉米粉及豆柏粉,正交試驗確定最佳培養(yǎng)時間為2天時,最佳液體發(fā)酵條件轉(zhuǎn)速200 r/min,溫度30℃,裝液量為50ml∕250ml,起始pH5.0。
關(guān)鍵詞:白地霉;液體發(fā)酵;生物量;正交實驗
1 緒論
白地霉是一種常見的真菌[1],菌體細(xì)胞含有蛋白質(zhì),具有十分重要的經(jīng)濟價值[2-5]。目前對白地霉液體發(fā)酵系統(tǒng)研究報道較少,本實驗計劃通過搖瓶液體培養(yǎng)法,確定白地霉藥瓶液體發(fā)酵的最佳培養(yǎng)基和最佳培養(yǎng)條件,進(jìn)一步確定最佳的放大培養(yǎng)工藝,為提高營養(yǎng)成分和有效成分提供理論數(shù)據(jù)[4-5]。
2供試菌種與方法
2.1供試菌種
白地霉保藏菌種:由長春醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校提供。
2.2 試驗方法
2.2.1碳源篩選
碳源選擇葡萄糖、玉米粉、可溶性淀粉、纖維飼料、麩皮,氮源為蛋白胨,其余成份不變。按10%接種量接入100ml培養(yǎng)基中,轉(zhuǎn)速150r/min, 29℃培養(yǎng)3d,測其生物量。
2.2.2氮源篩選
氮源選擇蛋白胨、豆柏粉、魚粉、棉子餅粉、尿素,碳源為葡萄糖,其余成份不變。10%接種量接入100ml培養(yǎng)基中,轉(zhuǎn)速150r/min, 29℃培養(yǎng)3d,測其生物量。
2.2.3發(fā)酵周期試驗
碳源及氮源分別為為葡萄糖及蛋白胨,配制搖瓶液體培養(yǎng)基,培養(yǎng)溫度為29℃,150r/min,接種量10%,裝液量100ml,培養(yǎng)1d、2d、3d、4d、5d,并測定其生物量。
2.2.4液體發(fā)酵條件的優(yōu)化[7]
利用玉米粉和豆柏粉為碳氮源,配制搖瓶液體培養(yǎng)基,設(shè)計四因素(溫度、轉(zhuǎn)速、裝液量、起始pH),分別培養(yǎng)2天。正交試驗確定最佳組合。
2.2.5生物量測定[8]
將發(fā)酵液用40目篩過濾、抽濾,用蒸餾水反復(fù)沖洗,60℃烘干至恒重,精確稱重,計算生物量。
生物量(g/L)=菌絲體干重(g)/發(fā)酵液體積(ml)×1000
3 結(jié)果與分析
3.1碳源篩選結(jié)果
3.2 氮源的篩選結(jié)果
3.3發(fā)酵周期試驗結(jié)果
3.4液體發(fā)酵條件的正交試驗結(jié)果
4結(jié)論
本實驗通過單因素試驗確定白地霉液體發(fā)酵的適宜碳源及氮源為玉米粉及豆柏粉,最佳培養(yǎng)時間為2天。通過正交試驗確定白地霉最佳液體深層發(fā)酵條件為:轉(zhuǎn)速200 r/min,溫度30℃,起始pH5.0,裝液量50ml∕250ml。
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