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        白地霉液體發(fā)酵條件優(yōu)化研究

        2019-09-05 22:10:11劉詩音
        科技風(fēng) 2019年22期
        關(guān)鍵詞:正交實驗生物量

        劉詩音

        摘要:利用單因素試驗篩選培養(yǎng)基碳氮源及氮源分別為玉米粉及豆柏粉,正交試驗確定最佳培養(yǎng)時間為2天時,最佳液體發(fā)酵條件轉(zhuǎn)速200 r/min,溫度30℃,裝液量為50ml∕250ml,起始pH5.0。

        關(guān)鍵詞:白地霉;液體發(fā)酵;生物量;正交實驗

        1 緒論

        白地霉是一種常見的真菌[1],菌體細(xì)胞含有蛋白質(zhì),具有十分重要的經(jīng)濟價值[2-5]。目前對白地霉液體發(fā)酵系統(tǒng)研究報道較少,本實驗計劃通過搖瓶液體培養(yǎng)法,確定白地霉藥瓶液體發(fā)酵的最佳培養(yǎng)基和最佳培養(yǎng)條件,進(jìn)一步確定最佳的放大培養(yǎng)工藝,為提高營養(yǎng)成分和有效成分提供理論數(shù)據(jù)[4-5]。

        2供試菌種與方法

        2.1供試菌種

        白地霉保藏菌種:由長春醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校提供。

        2.2 試驗方法

        2.2.1碳源篩選

        碳源選擇葡萄糖、玉米粉、可溶性淀粉、纖維飼料、麩皮,氮源為蛋白胨,其余成份不變。按10%接種量接入100ml培養(yǎng)基中,轉(zhuǎn)速150r/min, 29℃培養(yǎng)3d,測其生物量。

        2.2.2氮源篩選

        氮源選擇蛋白胨、豆柏粉、魚粉、棉子餅粉、尿素,碳源為葡萄糖,其余成份不變。10%接種量接入100ml培養(yǎng)基中,轉(zhuǎn)速150r/min, 29℃培養(yǎng)3d,測其生物量。

        2.2.3發(fā)酵周期試驗

        碳源及氮源分別為為葡萄糖及蛋白胨,配制搖瓶液體培養(yǎng)基,培養(yǎng)溫度為29℃,150r/min,接種量10%,裝液量100ml,培養(yǎng)1d、2d、3d、4d、5d,并測定其生物量。

        2.2.4液體發(fā)酵條件的優(yōu)化[7]

        利用玉米粉和豆柏粉為碳氮源,配制搖瓶液體培養(yǎng)基,設(shè)計四因素(溫度、轉(zhuǎn)速、裝液量、起始pH),分別培養(yǎng)2天。正交試驗確定最佳組合。

        2.2.5生物量測定[8]

        將發(fā)酵液用40目篩過濾、抽濾,用蒸餾水反復(fù)沖洗,60℃烘干至恒重,精確稱重,計算生物量。

        生物量(g/L)=菌絲體干重(g)/發(fā)酵液體積(ml)×1000

        3 結(jié)果與分析

        3.1碳源篩選結(jié)果

        3.2 氮源的篩選結(jié)果

        3.3發(fā)酵周期試驗結(jié)果

        3.4液體發(fā)酵條件的正交試驗結(jié)果

        4結(jié)論

        本實驗通過單因素試驗確定白地霉液體發(fā)酵的適宜碳源及氮源為玉米粉及豆柏粉,最佳培養(yǎng)時間為2天。通過正交試驗確定白地霉最佳液體深層發(fā)酵條件為:轉(zhuǎn)速200 r/min,溫度30℃,起始pH5.0,裝液量50ml∕250ml。

        參考文獻(xiàn):

        [1]劉亞男,馮娜,薛憬花,吳平,魏孝義.白地霉的化學(xué)成分研究.熱帶亞熱帶植物學(xué)報,2008,28(5)27-32.

        [2]鄭莉莉,劉天明,王慧,需美鑫,孫丙升.白地霉的應(yīng)用研究進(jìn)展.食品研究開發(fā),2008,18(6)16-18.

        [3]白地霉的培養(yǎng)及其核酸降解液的制備.農(nóng)業(yè)科技通訊,1970.6,41(8)12-15.

        [4]楊慶堯.食用菌生物學(xué)[M].上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1981,36(4):56-58.

        [5]汪維云,朱金華.食用菌液體發(fā)酵技術(shù)研究進(jìn)展及展望[J].中國食用菌,1997,17(2):11-15.

        [6]王莘.發(fā)酵工藝原理試驗技術(shù)[M].吉林科學(xué)技術(shù)出版社,2005,28(8):46-47.

        [7]周劍麗,胡建鋒,陳秀勇,牛曉娟,邱樹毅.響應(yīng)面法優(yōu)化白地霉發(fā)酵麻瘋樹餅粕產(chǎn)蛋白質(zhì)飼料工藝條件.中國飼料,2009,52:169-175.

        [8]周鍵,孫培龍,趙培城.食用菌深層發(fā)酵的研究進(jìn)展[J ].微生物學(xué)通報,2003,30 (6):111-114.

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