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        赤蒼藤化學(xué)成分的GC-MS分析

        2019-09-04 03:39:48梁臣艷唐云麗黎炎燊甄丹丹
        廣西中醫(yī)藥 2019年4期
        關(guān)鍵詞:離子流甲酯乙酸乙酯

        梁臣艷,張 璐,唐云麗,黎炎燊,甄丹丹

        (廣西中醫(yī)藥大學(xué),廣西 南寧 530200)

        赤蒼藤(Erythropalum scandens Bl.)為鐵青樹(shù)科赤蒼藤屬赤蒼藤的多年生常綠大型木質(zhì)藤本植物。其味苦,性平,全株清熱利濕、祛風(fēng)、活血,主治水腫、小便不利、黃疸、半身不遂、風(fēng)濕骨痛、跌打損傷[1]。赤蒼藤含有豐富優(yōu)質(zhì)的維生素、礦物質(zhì)、氨基酸等營(yíng)養(yǎng)成分,在民間常用于治療尿道炎以及急性腎炎。廣西、廣東、云南及海南等地區(qū)的民間具有采集赤蒼藤嫩尖葉食用以利尿排毒的習(xí)俗[2],現(xiàn)代藥理研究也證實(shí)了赤蒼藤能預(yù)防和治療高尿酸血癥[3]。赤蒼藤根的化學(xué)成分中含有蘇門(mén)樹(shù)脂酸、桂皮酸松柏醇酯、酚類(lèi)及三萜類(lèi)化合物[4]。本課題組前期從赤蒼藤乙醇提取物中分離得到甲基異茜草素-1-甲醚、正丁基-吡喃果糖苷等8個(gè)化合物[5],并采用氣相-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)從赤蒼藤揮發(fā)油中鑒別出二十七烷、1-辛烯-3-醇等鏈狀脂肪族、芳香族和萜類(lèi)化合物[6]?,F(xiàn)本研究進(jìn)一步對(duì)赤蒼藤乙酸乙酯部位的化學(xué)成分進(jìn)行分析,為充分合理利用廣西豐富的赤蒼藤資源,實(shí)現(xiàn)藥材的可持續(xù)開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

        1 儀器與材料

        1.1 儀器 Agilent 7890B-5977氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)安捷倫公司);LG16-WA高速離心機(jī)(北京醫(yī)用離心機(jī)廠)。

        1.2 試藥與試劑 赤蒼藤藥材采自廣西南寧市四塘鎮(zhèn),經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物教研室梁子寧教授鑒定為鐵青樹(shù)科赤蒼藤屬植物赤蒼藤Erythropalum scandens Bl.的根莖,藥材經(jīng)自然風(fēng)干后粉碎為粗粉,樣品存在廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院藥學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室。提取試劑均為分析純,廠家為國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

        2 方法

        2.1 供試品溶液的制備 取赤蒼藤藥材粗粉8 kg,加入70%乙醇回流提取3次,提取時(shí)間分別為4 h、3 h和2 h,合并提取液,回收乙醇,得乙醇浸膏。硅膠60℃拌樣后,先用石油醚脫脂,再用乙酸乙酯萃取,得到乙酸乙酯萃取液,回收溶劑,得到乙酸乙酯浸膏。取50 g浸膏,采用硅膠柱色譜分離,以石油醚∶乙酸乙酯梯度洗脫。在不同的洗脫比例得到淡黃色油狀化合物1和橘黃色油狀化合物2。各取油狀物約1 mg,加入石油醚-甲苯溶解,再加入0.4 mol/L氫氧化鈉-甲醇溶液,60℃水浴加熱1 h,加入超純水分層后,取上清液,以無(wú)水Na2SO4脫水干燥,10 000轉(zhuǎn)/分鐘離心,取上清液備用。

        2.2 氣相-質(zhì)譜聯(lián)用分析條件

        2.2.1 氣相分離條件 采用梯度升溫程序。組分1升溫程序:起始溫度150℃,150~200℃(3℃/min),200~280℃(8℃/min);組分2升溫程序:起始溫度120℃,120~160 ℃(3 ℃/min),160~250 ℃(5 ℃/min)。

        2.2.2 質(zhì)譜條件 色譜柱為美國(guó)安捷倫HP-5MS毛細(xì)管色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25μm),載氣為氦氣,溶劑延遲3 min,流速為1 ml/min,分流進(jìn)樣1 μl,分流比為30∶1。進(jìn)樣口溫度為280℃,離子源溫度為250℃,電離方式EI。電離能量為70 eV,掃描質(zhì)量范圍:50~500 amu。

        3 結(jié)果與討論

        在上述條件下對(duì)供試品進(jìn)行GC-MS分析,得到組分1和組分2的總離子流圖,分別見(jiàn)圖1和圖2。對(duì)總離子流圖中各個(gè)化合物質(zhì)譜圖譜經(jīng)HPMSD化學(xué)工作站以及NIST11標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,對(duì)質(zhì)荷比、基峰和相對(duì)豐度等進(jìn)行比較,并結(jié)合相關(guān)圖譜解析,對(duì)各色譜峰加以確認(rèn),再按峰面積歸一化法來(lái)計(jì)算各個(gè)化合物的百分含量。從組分1鑒定確認(rèn)了8個(gè)成分,詳見(jiàn)表1;從組分2鑒定確認(rèn)了8個(gè)成分,詳見(jiàn)表2。

        圖1 組分1的GC-MS總離子流圖

        圖2 組分2的GC-MS總離子流圖

        結(jié)果顯示,赤蒼藤乙酸乙酯部位組分1和組分2的成分主要為脂肪酸和烯酸類(lèi)化合物。其中,組分1主要含十七烷酸甲酯(22.29%)、油酸甲酯(18.29%);組分2主要含有11,14-十八碳二烯酸甲酯(28.95%)、硬脂酸甲酯(21.71%)。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)赤蒼藤有良好的利尿作用,而脂肪酸甲酯類(lèi)容易水解為脂肪酸,故推測(cè)脂肪酸類(lèi)可能為其利尿藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)[7]。

        表1 組分1化學(xué)成分分析結(jié)果

        表2 組分2化學(xué)成分分析結(jié)果

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