高峻 郭旭升 韓利杰
近年來非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)成為近年來患病增加最為明顯的疾病之一,其屬于一種獲得性代謝應(yīng)激肝損傷。而NAFLD是導(dǎo)致肝纖維化的原因之一[1]。目前對于該疾病尚無特異的臨床診斷手段[2-3]。酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase,ASMase)是一種水解鞘磷脂產(chǎn)生酰胺的重要溶酶體酶,有研究指出其在NAFLD的表達水平明顯高于正常肝組織[4],提示其可能成為NAFLD診斷的生物標(biāo)志物。因此本文通過回顧性分析探討血清中ASMase水平對NAFLD患者肝纖維化程度的預(yù)測作用,現(xiàn)報道如下。
選取2015年1月至2018年6月間我院收治87例確診的非酒精性脂肪性肝病患者為研究對象,男性48例,女性39例,患者年齡32~65歲,平均(43.98±6.67)歲;其中男性身高162~187 cm,平均(173.39±6.42)cm,體重72~89 kg,平均(76.25±2.44)kg;女性身高155~178 cm,平均(163.25±4.49)cm,體重48~69 kg,平均(53.67±2.54)kg。
納入標(biāo)準(zhǔn):(1)入選患者符合《非酒精性脂肪性肝病診療指南》[5]診斷標(biāo)準(zhǔn);(2)患者熟知該課題研究,簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)因酒精、藥物、病毒、免疫等疾病引起的脂肪性肝病(2)甲狀腺急性病、庫欣綜合征患者;(3)存在肝腎功能不全或嚴重感染患者;(4)3個月內(nèi)使用保護肝臟,或服用副作用能夠引起肝損傷藥物治療者;(5)凝血功能異常,有嚴重心血管疾病患者。
(一) 體質(zhì)指數(shù)(BIM)檢測:由專人使用同一設(shè)備精確測量患者的身高、體質(zhì)量,計算公式:BIM=體質(zhì)量(kg)/身高2(m2)。
(二) 血清指標(biāo)檢測 入選患者在接受穿刺檢測前3d于清晨空腹?fàn)顟B(tài)抽取患者外周血4 mL于一次性采血管,室溫靜置30 min,3000 r·min-1離心8 min分離血清,-80℃保存,由專門人員管理并檢測患者血清中,采用全自動生化儀檢測血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、 天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、堿性磷酸酶(ALP)水平。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中酸性鞘磷脂酶(ASMase)水平,試劑盒購于上海北滬生物科技有限公司。
(三) 病理學(xué)檢測 所有入選患者住院后依照檢測要求進行肝臟穿刺超聲定位,簽署知情同意書,肝組織標(biāo)本長度1.5~2.0 cm,會管區(qū)數(shù)量不小于6個,標(biāo)本經(jīng)10%多聚甲醛固定、石蠟包埋,制備成組織切片用HE、Masson和網(wǎng)織纖維染色,依據(jù)《非酒精性脂肪性肝病診療指南》肝組織病理學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn),由兩位病理醫(yī)師分別進行,進行肝纖維化結(jié)果診斷;如結(jié)果不一致由病理科主任醫(yī)師進行結(jié)果確定。根據(jù)肝組織活檢結(jié)果將入選患者分為肝臟非顯著纖維組(S0~S2)和肝臟顯著纖維組(S3~S4)。
顯著肝纖維化患者的年齡、BMI指數(shù)明顯高于無顯著肝纖維化組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表1。
表1 不同肝纖維化階段患者一般資料分析(±s)
與非顯著肝纖維化組相比較:①P<0.001
兩組患者血清中AST、GGT、ALP水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),顯著肝纖維化組患者血清中ALT水平明顯高于非顯著肝纖維化,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表2。
表2 不同肝纖維化階段患者肝功能指標(biāo)和血清ASMase水平分析(±s)
注:與非顯著肝纖維化組相比較:①P<0.001
以NAFLD肝纖維化為因變量,以上述單因素分析有統(tǒng)計學(xué)意義項年齡、BMI、ASMase、ALT為自變量,進行Logistic回歸分析,結(jié)果顯示上述指標(biāo)均為顯著肝纖維化的危險因素,見表3。
表3 顯著肝纖維化危險因素Logistic分析
繪制NAFLD患者血清中AMSase相對表達水平值數(shù)據(jù)輸入SPSS.20軟件進行ROC曲線分析,根據(jù)輸出結(jié)果顯示AMSase最佳相對表達水平臨界值為88.090 nmol/L,靈敏度80.56%,特異性75.86%,AUC為0.820,見圖1。
圖1 ROC曲線分析
肝纖維化主要是肝星狀細胞(HSC)參與肝細胞的損傷修復(fù)過程中,大量活化后的細胞會轉(zhuǎn)化為肌成纖維細胞,導(dǎo)致肝纖維化[6]。ASMase是一種水解鞘磷脂產(chǎn)生酰胺的重要溶酶體酶[7],能夠促進神經(jīng)酰胺和磷脂酰膽堿生成,引起肝細胞的凋亡及囊性纖維化;也可以通過調(diào)節(jié)組蛋白酶B/D蛋白水解過程,促進HSC增殖加劇肝纖維化程度[8],因此血清中ASMase水平可能成為NAFLD患者肝纖維化程度的診斷標(biāo)志物。
本文依據(jù)NAFLD患者肝組織病理學(xué)診斷結(jié)果,將其分為肝臟非顯著纖維組和肝臟顯著纖維組。分析顯示,顯著肝纖維化組患者血清中AMSase水平明顯高于無顯著肝纖維化(P<0.05)。這可能與肝臟慢性損傷激活肝星狀細胞的活化及增殖有關(guān),Haines等[9]研究也證實AMSase的高表達,能夠促進成肌纖維細胞的活化。Logistic結(jié)果顯示血清中AMSase水平是NAFLD患者肝纖維化的危險因素之一;ROC曲線分析顯示AUC值為0.82,靈敏度80.56%,特異性75.86%,表明NAFLD患者血清中AMSase水平能夠作為預(yù)測肝纖維程度指標(biāo)。
綜上所述,血清中ASMase水平對非酒精性脂肪性肝病患者肝纖維化程度具有一定的預(yù)測價值,但對于該指標(biāo)能否用于其他疾病引起的肝纖維化程度是否具有預(yù)測價值,是本文研究不足之處,也是值得后期繼續(xù)探討的研究方向。