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        原料乳體細(xì)胞數(shù)對硬質(zhì)干酪蛋白水解及風(fēng)味與質(zhì)構(gòu)品質(zhì)的影響

        2019-08-30 06:12:34劉鑫宇任發(fā)政張永祥葛克山
        食品科學(xué) 2019年15期
        關(guān)鍵詞:酪蛋白干酪體細(xì)胞

        穆 碩,劉鑫宇,羅 潔,任發(fā)政,李 博,王 娜,張永祥,葛克山,*

        (1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營養(yǎng)工程學(xué)院,教育部北京市共建功能乳品重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100083;2.河北省畜產(chǎn)食品工程技術(shù)中心,河北 三河 065200)

        硬質(zhì)干酪是向原料乳(牛乳、羊乳、水牛乳等)中添加發(fā)酵劑、凝乳酶之后,經(jīng)發(fā)酵、排乳清、鹽搓、壓榨、成熟等工藝制作而成的一種干酪,因其獨(dú)特的質(zhì)地風(fēng)味與極高的營養(yǎng)價值而深受消費(fèi)者的喜愛[1]。風(fēng)味是影響消費(fèi)者選擇干酪的重要因素,干酪中的風(fēng)味物質(zhì)主要在干酪的成熟過程中通過糖酵解、脂肪分解和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)生。蛋白質(zhì)水解包括蛋白質(zhì)降解為游離氨基酸和游離氨基酸降解為風(fēng)味物質(zhì)兩步,參與該過程的酶主要有3 個來源:天然存在于牛乳中的蛋白酶、微生物來源的內(nèi)源性蛋白酶和添加的外源性蛋白酶。

        在中國,自由放養(yǎng)和小規(guī)模奶牛養(yǎng)殖仍占有一定比例[2],在這些養(yǎng)殖場中手動擠奶的方式會使體細(xì)胞混入原料奶中,包括上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、多核中性粒細(xì)胞(polymorphonuclears,PMNs)以及淋巴細(xì)胞[3]。在健康的牛乳中,巨噬細(xì)胞占35%~79%[4-5]、PMNs占3%~26%[6]、淋巴細(xì)胞約占16%~28%[7],上皮細(xì)胞隨著泌乳過程從乳腺脫落進(jìn)入牛乳當(dāng)中,在健康牛乳中的數(shù)量較低,有時不能被檢測出來[3]。體細(xì)胞組成及數(shù)量對干酪品質(zhì)具有重要影響。

        關(guān)于體細(xì)胞數(shù)(somatic cell count,SCC)對干酪品質(zhì)的影響已有大量研究,已有的研究結(jié)果表明,在全脂干酪體系下,高SCC會對硬質(zhì)干酪造成游離脂肪酸增加、產(chǎn)生腐臭和脂肪氧化的味道、降低感官評分等不利影響[8-12],但他們只關(guān)注了原料乳中體細(xì)胞的數(shù)量而并未解析體細(xì)胞組成,這些研究結(jié)合感官評價結(jié)果和游離脂肪酸測定結(jié)果,認(rèn)為體細(xì)胞對脂肪降解的影響主導(dǎo)著干酪的感官評分,但他們并未測定干酪的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)變化。事實(shí)上蛋白質(zhì)的水解也是風(fēng)味形成的一個重要過程,鮮有研究在脫脂干酪體系下排除脂肪的干擾,單獨(dú)探討體細(xì)胞主導(dǎo)的蛋白水解對干酪風(fēng)味物質(zhì)的影響。

        本研究采集了3 種不同SCC牛乳,解析其體細(xì)胞組成,并將其制作成脫脂契達(dá)干酪,通過測定干酪在成熟期的蛋白酶活力、蛋白水解程度及成熟后的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)含量和質(zhì)構(gòu)特性來探究SCC通過蛋白水解對干酪品質(zhì)的影響。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        原料乳選用正常乳和隱形乳房炎乳,取自河北福成奶牛場,原料乳均從工廠中的鮮奶貯藏罐取樣以排除奶牛個體間差異。

        Mouse Anti Bovine CD11b(FITC)、Mouse Anti Bovine CD14(FITC) 美國Bio-Rad公司;Anti-Cytokeratin 18 Antibody(FITC) 英國Abcam公司;CD5 Antibody(Alexa Flour 488) 美國Nouvus Biologicals公司;R704直投式發(fā)酵劑、Stamix 1150凝乳酶 中國科漢森公司。

        1.2 儀器與設(shè)備

        Fossmatic5000體細(xì)胞檢測儀 丹麥FOSS公司;FACS AriaIII流式細(xì)胞儀 美國BD Biosciences公司;氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(gas chromatography/mass spectrometer,GC-MS)儀(配有電子轟擊離子源及MassHunter數(shù)據(jù)處理分析系統(tǒng)) 美國Agilent公司;固相微萃取(solid-phase microextraction,SPME)頭(50/30 μm DVB/CAR/PDM)、DB-WAX色譜柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm) 美國色譜科公司;TMS-Pro型質(zhì)構(gòu)儀 美國FTC公司;AR2000型流變儀美國TA公司。

        1.3 方法

        1.3.1 原料乳制備

        原料乳在3 000×g、4 ℃條件下離心15 min脫去脂肪,收集下層,并將沉淀在離心瓶底部的體細(xì)胞刮下復(fù)添回原料乳中,使用Fossmatic 5000體細(xì)胞檢測儀測定原料乳組分及SCC[13]。

        1.3.2 原料乳體細(xì)胞組成測定

        參考Rivas等[14]的方法,使用FACS AriaIII流式細(xì)胞儀測定原料乳中體細(xì)胞組成,使用Mouse Anti Bovine CD11b(FITC)標(biāo)記PMNs[15];使用Mouse Anti Bovine CD14(FITC)標(biāo)記巨噬細(xì)胞[16];使用Anti-Cytokeratin 18 Antibody(FITC)標(biāo)記上皮細(xì)胞[17];使用CD5 Antibody(Alexa Flour 488)標(biāo)記淋巴細(xì)胞[18]。

        1.3.3 契達(dá)干酪制作與指標(biāo)的測定

        使用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的直投式發(fā)酵劑和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.05%的凝乳酶,參考Hu Ya’nan等[19]的方法進(jìn)行干酪的制作。干酪在4 ℃條件下成熟90 d,并取成熟0 d的干酪進(jìn)行水分、蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)的測定[20],成熟期間取0、15、30、60、90 d的樣品進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)的測定。

        1.3.4 總蛋白酶活力的測定

        選取成熟0、15、30、60、90 d的干酪,準(zhǔn)確稱取1.0 g,使用10 mL 20 g/L pH 7.0的檸檬酸三鈉緩沖液進(jìn)行溶解?;靹蚝?,于37 ℃水浴中保溫30 min。2 000×g離心5 min后取上清液按GB/T 23527—2009《蛋白酶制劑》[21]進(jìn)行測定。

        1.3.5 蛋白水解程度

        1.3.5.1 可溶性氮比例的測定

        選取成熟0、15、30、60、90 d的干酪進(jìn)行可溶性氮(soluble nitrogen,SN)的測定。參考Andrews等[22]的方法進(jìn)行pH 4.6可溶性氮(pH 4.6-SN)的測定,結(jié)果以其在總氮中的占比(pH 4.6-SN/TN)表示;參考Brandsma等[23]的方法進(jìn)行質(zhì)量分?jǐn)?shù)12%三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)可溶性氮的測定(12% TCA-SN),結(jié)果以其在總氮中的占比(12% TCA-SN/TN)表示。

        1.3.5.2 十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳

        取成熟0、15、30、60、90 d的干酪進(jìn)行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)實(shí)驗(yàn)。參考Laemmli[24]的方法,取0.75 g干酪于研缽,加25 mL pH 4.6醋酸緩沖液研磨成漿狀,40 ℃保持1 h。經(jīng)4 ℃、3 000×g離心30 min后取沉淀加6 mol/L尿素溶解并用BCA蛋白濃度法[25]測定蛋白質(zhì)量濃度,最終將質(zhì)量濃度調(diào)至1 μg/μL,并用5 倍體積的上樣緩沖液(pH 6.8,60 mmol/L Tris-HCl溶液、250 g丙三醇、20 g SDS、50 mLβ-巰基乙醇)稀釋后煮沸5 min,冷卻備用。SDS-PAGE實(shí)驗(yàn)條件為:分離膠和濃縮膠分別為質(zhì)量分?jǐn)?shù)12%和質(zhì)量分?jǐn)?shù)6%的丙烯酰胺,濃縮膠電壓80 V,分離膠電壓120 V,凝膠經(jīng)掃描儀掃描成像并用Quantity One軟件進(jìn)行蛋白分子定性與定量分析。

        1.3.6 干酪風(fēng)味的測定

        參考Pinho等[26]的方法采用頂空-SPME與GC-MS技術(shù)(headspace-SPME-GC/MS,HS-SPME-GC/MS)測定干酪成熟90 d后的風(fēng)味物質(zhì)。取10 g干酪于研缽,加等量的無水硫酸鈉研磨至粉末,迅速放入50 mL頂空瓶中并封蓋,于40 ℃水浴中平衡30 min。插入SPME頭,推出后于40 ℃水浴中吸附30 min,萃取頭首次使用前需260 ℃老化1 h,之后每次使用前230 ℃老化10 min。完成吸附后縮回SPME頭,進(jìn)行GC-MS實(shí)驗(yàn)。GC條件:色譜柱為DBWAX;載氣為氦氣,流速為1 mL/min,不分流進(jìn)樣;進(jìn)樣口溫度230 ℃,解吸附(溶劑延遲)時間3 min;升溫程序:起始溫度40 ℃,以3 ℃/min升至120 ℃,保持2 min,再以10 ℃/min升至230 ℃,保持2 min。MS條件:離子化模式為電子轟擊;離子源溫度230 ℃,四極桿溫度150 ℃;質(zhì)量掃描范圍m/z35~600。

        1.3.7 干酪品質(zhì)的測定

        1.3.7.1 質(zhì)構(gòu)特性的測定

        取成熟0、15、30、60、90 d的干酪進(jìn)行質(zhì)構(gòu)實(shí)驗(yàn),參考Hu Ya’nan等[19]的方法,使用TMS-Pro型質(zhì)構(gòu)儀對不同成熟期的干酪進(jìn)行質(zhì)構(gòu)實(shí)驗(yàn)。樣品先在室溫至少放置1 h以平衡溫度,再切成邊長為1.5 cm的正方體進(jìn)行實(shí)驗(yàn),壓縮形變量為樣品高度的1/3。

        1.3.7.2 流變特性的測定

        取成熟90 d的干酪進(jìn)行流變實(shí)驗(yàn),參考Brickley等[27]的方法,使用AR2000型流變儀對不同成熟期的干酪進(jìn)行流變實(shí)驗(yàn)。樣品先在室溫至少放置1 h以平衡溫度,選用直徑20 mm的鋁制探頭,調(diào)整間隙為2 mm,升溫范圍20~80 ℃,升溫速度3 ℃/min。

        1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

        每組實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3 次并取平均值。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel軟件整理和制圖,SPSS 17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析,各表中數(shù)值以表示,以P<0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 原料乳成分與體細(xì)胞組成

        表1 原料乳成分與體細(xì)胞組成Table 1 Chemical composition and somatic cell composition of raw milk

        原料乳中成分及體細(xì)胞組成受很多方面因素的影響,如年齡和泌乳階段、季節(jié)、應(yīng)激、奶牛管理水平等[16]。本實(shí)驗(yàn)將收集到的原料乳按照SCC從多到少依次分為A、B、C 3 組,其成分及體細(xì)胞組成如表1所示。3 組脫脂乳的蛋白和乳糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)沒有顯著差異(P>0.05)。但體細(xì)胞組成有顯著差異,其中A組和B組的SCC分別為(4.03±0.60)×104個/mL和(29.30±0.70)×104個/mL;巨噬細(xì)胞是最主要的體細(xì)胞,A組和B組分別占(75.19±1.32)%和(66.22±1.27)%,這與前人的研究結(jié)果[4,14]一致;而C組的SCC顯著高于A、B兩組(P<0.05),達(dá)(86.40±1.50)×104個/mL,且PMNs和上皮細(xì)胞的占比較A、B兩組顯著提高,分別為(38.81±0.84)%和(6.46±0.23)%。當(dāng)有異物入侵乳腺或發(fā)生乳房炎時,乳腺的PMNs會大量增殖,淋巴細(xì)胞也會遷移到乳腺,導(dǎo)致乳中的體細(xì)胞增加,而且在乳房炎發(fā)生時,更多的上皮細(xì)胞會脫落并進(jìn)入到乳中[28]。

        2.2 成熟0 d的干酪組分

        成熟0 d的脫脂契達(dá)干酪組分如表2所示,不同組干酪的蛋白質(zhì)、水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)沒有顯著性差異(P>0.05),說明SCC對干酪組分沒有影響。

        表2 脫脂契達(dá)干酪組分(成熟0 d)Table 2 Compositions of defatted Cheddar cheese after 0 d of ripening

        2.3 體細(xì)胞組成對總蛋白酶活力的影響

        在大多數(shù)干酪中,蛋白質(zhì)水解是成熟過程中最復(fù)雜,也是最重要的反應(yīng)。凝乳酶、血纖維蛋白溶酶和微生物來源的蛋白酶水解蛋白質(zhì)生成短肽、氨基酸的混合物,直接改變干酪的風(fēng)味與質(zhì)構(gòu)[29]。在本實(shí)驗(yàn)中,影響總蛋白酶活力的因素有:凝乳酶殘留、發(fā)酵劑、體細(xì)胞、外源微生物(非發(fā)酵劑)。由1.3.3節(jié)的干酪制作工藝和2.1節(jié)的原料乳成分可知,凝乳酶和發(fā)酵劑的添加量是一樣的,且各組原料乳的菌落總數(shù)無顯著差異,因此可認(rèn)定不同組間總蛋白酶活力差異是由體細(xì)胞造成的。原料乳體細(xì)胞中也含有多種蛋白質(zhì)水解酶,最主要的有組織蛋白酶D、B、彈性蛋白酶和血纖維蛋白溶酶酶原[15,22]。體細(xì)胞會在加工及貯藏過程中破裂,其胞內(nèi)蛋白酶釋放后會影響干酪成熟時蛋白質(zhì)水解,進(jìn)而對干酪的質(zhì)構(gòu)特性及風(fēng)味產(chǎn)生影響。不同SCC原料乳制作的干酪總蛋白酶活力在貯藏期的變化如圖1所示,3 組干酪的總蛋白酶活力在貯藏期均有明顯的上升,且干酪中SCC越高,蛋白酶活力也越高(也包括外源污染微生物釋放的蛋白酶,即SCC越高,一般微生物菌落總數(shù)也越高)。其中,C組的蛋白酶活力在貯藏期結(jié)束時遠(yuǎn)高于A、B兩組,這一方面是由于C組有較高的SCC,有更多的細(xì)胞破裂釋放更多胞內(nèi)蛋白酶;另一方面,C組含有更高比例的PMNs,Luo Jie等[20]曾報道較高PMNs比例的原料乳制得的干酪具有更高的血纖維蛋白溶酶活性。

        圖1 不同體細(xì)胞組成對脫脂契達(dá)干酪蛋白酶活力的影響Fig. 1 Effect of somatic cell composition on total protease activity during cheese ripening

        2.4 體細(xì)胞組成對蛋白質(zhì)水解的影響

        不同體細(xì)胞組成干酪成熟過程中蛋白質(zhì)的SDS-PAGE圖如圖2所示。在干酪成熟過程中,α-酪蛋白和β-酪蛋白水解較為明顯,且αs2-酪蛋白的水解尤為顯著,而β-乳球蛋白和α-乳白蛋白的水解不明顯,這與前人的研究結(jié)果[23,30]一致。Quantity One分析結(jié)果顯示,干酪成熟90 d時C組αs2-酪蛋白(3 265±56)和β-酪蛋白(12 335±53)的灰度顯著小于A、B組(A組αs2-酪蛋白灰度為11 357±78、β-酪蛋白灰度為15 893±45;B組αs2-酪蛋白灰度為3 8 2 9±3 2、β-酪蛋白灰度為14 399±38)(P<0.05),說明C組的蛋白水解作用最強(qiáng),這與C組的體細(xì)胞組成有關(guān)。有研究指出,αs2-酪蛋白對于凝乳酶有較好的抵抗能力,血纖維蛋白溶酶是其主要的水解酶[31];β-酪蛋白可以被凝乳酶和血纖維蛋白溶酶水解,其中血纖維蛋白溶酶起著非常重要的作用[32]。C組的體細(xì)胞組成中有著較高比例的PMNs以及較高的血纖維蛋白溶酶活性,所以使αs2-酪蛋白和β-酪蛋白得到較大程度的水解。

        圖2 不同體細(xì)胞組成脫脂契達(dá)干酪成熟過程中蛋白質(zhì)水解情況Fig. 2 Effect of somatic cell composition on proteolysis during cheese ripening

        可溶性氮比例是評價干酪成熟度的重要指標(biāo),當(dāng)干酪蛋白質(zhì)發(fā)生二級降解時,干酪中的可溶性氮含量增加。pH 4.6可溶性氮是由殘留凝乳酶降解酪蛋白產(chǎn)生,被認(rèn)為是“成熟廣度”的標(biāo)志[33]。12% TCA可溶性氮是由發(fā)酵劑菌株和乳中內(nèi)在微生物對酪蛋白作用產(chǎn)生,通常含有更多的小分子肽,被認(rèn)為是干酪“成熟深度”的標(biāo)志[33]。體細(xì)胞組成對干酪成熟過程中可溶性氮比例的影響如圖3所示。干酪的成熟廣度和深度都受體細(xì)胞影響,在成熟過程中,3 組干酪的12% TCA-SN/TN和pH 4.6-SN/TN都呈現(xiàn)上升的趨勢,且SCC越高,12% TCA-SN/TN和pH 4.6-SN/TN上升越快;C組干酪因其高SCC及高比例PMNs而使12% TCA-SN/TN和pH 4.6-SN/TN明顯高于其他兩組(P<0.05)。

        圖3 體細(xì)胞組成對脫脂契達(dá)干酪成熟過程中可溶性氮比例的影響Fig. 3 Effect of somatic cell composition on soluble nitrogen ratio during cheese ripening

        2.5 體細(xì)胞組成對干酪揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)含量的影響

        揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)對干酪的感官特性具有重要的影響,其可在食用前被嗅聞,也可在干酪的食用過程中,在口腔溫度的加熱下從干酪中揮發(fā)出來并被人體感知從而產(chǎn)生感官體驗(yàn)。揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的形成與干酪中蛋白質(zhì)的水解有很大的關(guān)系。如表3所示,A組檢測到的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)最少,共20 種,其中包含醇類9 種、酯類2 種、醛類3 種、酮類4 種;B組檢測到24 種揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì),其中包含醇類10 種、酯類3 種、醛類6 種、酮類4 種;C組檢測到的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)最多,有35 種,其中包含醇類12 種、酯類6 種、醛類8 種、酮類7 種。檢測到的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)越多表示成熟程度越高,這種趨勢也與2.4節(jié)中3 組干酪的12% TCA-SN/TN和pH 4.6-SN/TN的結(jié)果一致。

        乙醇是葡萄糖分解和氨基酸分解代謝中常見的終產(chǎn)物,在3 組干酪測得的醇類中,A組以乙醇為主,這與Arora等[34]用正常牛乳進(jìn)行實(shí)驗(yàn)獲得的結(jié)果一致;B、C兩組的乙醇含量減少,且醇的種類增加;C組的正己醇含量顯著高于A、B兩組,正己醇具有未成熟果實(shí)的青澀味,這種味道被認(rèn)為是干酪中的不良風(fēng)味并且與干酪蛋白的過分水解有關(guān)。

        酯類、酸類和烷類物質(zhì)在3 組干酪中的含量均很低,這是因?yàn)樗鼈兊纳膳c脂肪代謝相關(guān),而實(shí)驗(yàn)所用的脫脂乳中脂肪很少甚至沒有,因此與脂肪代謝相關(guān)的風(fēng)味物質(zhì)含量普遍較低。干酪中的醛類和酮類通常帶有香氣特征,對干酪的風(fēng)味有很大的貢獻(xiàn)。3-羥基-2-丁酮具有奶油味,是乳制品中常見的特征風(fēng)味物質(zhì)之一,其通過檸檬酸鹽代謝途徑經(jīng)雙乙酰還原生成,3 組干酪中的3-羥基-2-丁酮含量均最高,且B組的含量((34.57±1.56)%)較其他兩組更高;辛醛、壬醛和2-壬酮具有未成熟果實(shí)的青澀味和脂肪酸敗味,葵醛具有肥皂味和花香味,以上物質(zhì)在C組中的含量顯著高于A、B兩組(P<0.05),且C組干酪中也檢測到少量具有肥皂味的仲辛酮((0.31±0.01)%)和大量具有未成熟果實(shí)的青澀氣味的己醛((6.38±0.56)%),這些物質(zhì)的產(chǎn)生與蛋白質(zhì)過分水解有關(guān),且對干酪風(fēng)味具有負(fù)面影響,這也與2.4節(jié)中C組蛋白質(zhì)水解程度最高的結(jié)果一致。以上結(jié)果說明B組較高的SCC可以增加干酪特征風(fēng)味物質(zhì)的含量,但C組過高的SCC以及高蛋白水解程度會導(dǎo)致辛醛、壬醛、2-壬酮和癸醛等對干酪的風(fēng)味有負(fù)面影響物質(zhì)的產(chǎn)生。

        表3 不同體細(xì)胞組成對脫脂契達(dá)干酪中的揮發(fā)性風(fēng)味化合物相對含量的影響Table 3 Effect of somatic cell composition on volatile components in cheese

        2.6 體細(xì)胞組成對干酪的質(zhì)構(gòu)和流變特性的影響

        圖4 不同體細(xì)胞組成對脫脂契達(dá)干酪質(zhì)構(gòu)和流變特性的影響Fig. 4 Effect of somatic cell composition on textural and rheological properties of cheese

        本實(shí)驗(yàn)通過測定90 d成熟過程中干酪的硬度和彈性變化來反映不同SCC與組成對干酪質(zhì)構(gòu)品質(zhì)的影響,結(jié)果如圖4所示。在成熟過程中,3 組干酪的硬度均有下降的趨勢,且A組干酪的硬度顯著高于B、C兩組(P<0.05);3 組干酪的彈性無論是在組間還是在成熟過程中均沒有出現(xiàn)顯著差異。硬度反映了干酪中保持形狀的內(nèi)部結(jié)合力,由2.4節(jié)結(jié)果可知,B、C兩組干酪在成熟過程中αs2-酪蛋白被降解的程度較高,這會減小干酪內(nèi)部酪蛋白的結(jié)合力,從而導(dǎo)致硬度減小。αs1-酪蛋白是蛋白網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的基石,干酪的彈性與干酪中完整αs1-酪蛋白的結(jié)構(gòu)密切相關(guān),其降解會削弱酪蛋白網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),進(jìn)而影響干酪的彈性[35]。3 組干酪的彈性在成熟期沒有出現(xiàn)顯著差異,說明αs1-酪蛋白網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)在成熟期基本沒有改變,這也與2.4節(jié)中αs1-酪蛋白被降解程度低的結(jié)果一致。

        本研究選用成熟90 d的干酪進(jìn)行不同體細(xì)胞組成對干酪流變特性影響的研究,結(jié)果如圖4c所示。干酪的儲能模量(G')會隨溫度升高而減小,這與酪蛋白分子間的作用力有關(guān),當(dāng)加熱時酪蛋白間氫鍵作用力降低,進(jìn)而導(dǎo)致G'的減小,增加干酪的黏性。當(dāng)溫度小于50 ℃時,在相同溫度下,A組的G'最高,C組的G'最低。低G'表明凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)中化學(xué)鍵的數(shù)量較少或強(qiáng)度較低,凝膠結(jié)構(gòu)更容易被破壞。C組的高SCC及高蛋白酶活性會促進(jìn)酪蛋白水解,進(jìn)而使C組干酪的酪蛋白凝膠強(qiáng)度降低,G'降低。

        3 結(jié) 論

        本實(shí)驗(yàn)選用不同SCC的原料乳制作脫脂契達(dá)干酪,研究了不同SCC及組成干酪的蛋白質(zhì)水解程度及其對干酪風(fēng)味和品質(zhì)的影響,結(jié)果表明較高SCC可提升干酪特征風(fēng)味物質(zhì)3-羥基-2-丁酮的含量,但過高SCC會因其高比例PMNs和高αs2酪蛋白水解活力而降低干酪硬度,增加不良風(fēng)味物質(zhì)的種類與含量。本研究為原料乳及干酪產(chǎn)品質(zhì)量控制提供了理論依據(jù)。

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