呂婷婷

272000濟(jì)寧市第一人民醫(yī)院

丹參素鈉其實(shí)就是丹參素鈉鹽，主要應(yīng)用于心腦血管、炎癥以及腫瘤疾病中。但是在實(shí)際應(yīng)用的過(guò)程中，由于該種藥物具有滲透性低、溶解性高的特點(diǎn)，無(wú)法將生物功能充分發(fā)揮，同時(shí)也不能長(zhǎng)期使用目前的普通注射劑。因此，本文進(jìn)一步探究了關(guān)于丹參素鈉-PLGA緩釋微球的制備及藥劑學(xué)性能評(píng)價(jià)，詳細(xì)過(guò)程如下。

資料與方法

使用的設(shè)備：恒溫磁力攪拌器、分析天平、掃描電子顯微鏡、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、激光粒度分析儀、全自動(dòng)X射線(xiàn)衍射儀以及半自動(dòng)冰凍切片機(jī)。

使用的材料：酯封端聚(乳酸-羥基乙酸)共聚物75/25、甲氧基聚二乙醇-聚乳酸乙醇酸共聚物75/25、丹參素鈉原料以及丹參素鈉對(duì)照品[1]。

結(jié) 果

測(cè)量丹參素鈉含量：①制備對(duì)照品溶液：將5 mg的對(duì)照品放在0.2 g/L的量瓶中，經(jīng)稀釋、搖勻制作成對(duì)照品溶液。②制備供試品溶液：用精密稱(chēng)對(duì)10 mg的丹參素鈉-PLGA緩釋微球進(jìn)行稱(chēng)取，將其放于10 mL量瓶中，與0.5 mL的甲烷混合，通過(guò)稀釋、靜置，讓二氯甲烷充分發(fā)揮，使高分子材料完全析出，過(guò)濾后，將濾液取出。③波長(zhǎng)選擇檢測(cè)：對(duì)0.04 g/L丹參素鈉進(jìn)行適量的選取，用水做空白溶劑，用200～500 nm掃描。結(jié)果顯示，丹參素鈉最大吸收在280 nm，未受空白溶劑的影響，因此選擇檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm。④建立曲線(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)：對(duì)不同容量的對(duì)照品溶液進(jìn)行吸取，分別放置在10 mL量瓶中，加水后定容至刻度，在280 nm處對(duì)吸光度A進(jìn)行測(cè)定，并將其作為縱坐標(biāo)，橫坐標(biāo)用質(zhì)量溶度表示，得出Y=0.012 3X-0.000 74(r=1.000)這一回歸方程，10～70 mg/L為線(xiàn)性范圍。⑤回收率的測(cè)定分析：取不同容量丹參素鈉對(duì)照品溶液，將其加入10 mg的空白微球中，并防止在10 mL的量瓶中，在280 nm處對(duì)A進(jìn)行測(cè)定，回收率為98.2%～99.9%，平均為98.7%。

丹參素鈉-PLGA微球制備：用精密稱(chēng)對(duì)適量的丹參素鈉進(jìn)行提取，與水相溶，制備成溶液，成為內(nèi)相水(W)，混入一定濃度的PLGA的二氯甲烷和丙酮的混合液，進(jìn)行W/O初乳的乳化，然后用注射器將含司盤(pán)80(span80)和正己烷的液體石蠟溶液，攪拌4 h，使其固化，通過(guò)抽濾、洗滌、干燥后，完成制備[2]。

選定處方工藝：用單因素試驗(yàn)考察法，對(duì)外油相溫度、材料種類(lèi)、濃度、正己烷的加入量對(duì)微球形成造成的影響進(jìn)行分析。①確定外油相溫度：質(zhì)量濃度為125 g/L的PLGA，300μL的內(nèi)水相體積，比例為3：7的二氯甲烷-丙酮，用200 mL的液體石蠟和6 mL的正己烷做外油相，用0.25%司盤(pán)80當(dāng)作乳化劑，設(shè)定轉(zhuǎn)速為1 400 r/min進(jìn)行4 h的攪拌。對(duì)不同溫度為微球形態(tài)造成的影響進(jìn)行觀察。結(jié)果顯示，當(dāng)溫度為55℃時(shí)，微球呈現(xiàn)出的狀態(tài)最好。

丹參素鈉-PLGA微球的化學(xué)劑性能：①粒徑的測(cè)定：在恒溫條件下將適量的丹參素鈉-PLGA混懸液取出，利用激光粒度分析儀對(duì)微球的粒徑進(jìn)行測(cè)定與分布。②觀察丹參素鈉-PLGA的形態(tài)特征：將少量的丹參素鈉-PLGA取出，利用電子顯微鏡對(duì)其形態(tài)進(jìn)行觀察，結(jié)果顯示呈球形，并具有良好的完整性，將微球與明膠溶液相混，在1 mL的注射器中固化。在切片前，OCT包埋劑將微球在冷凍切片機(jī)上包埋，在溫度為-30℃時(shí)，用手術(shù)刀對(duì)其進(jìn)行厚度為20μm的切片，干燥后，用顯微鏡對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察，結(jié)果顯示，在乙烷加至6 mL后，微球內(nèi)部蜂窩狀空洞減小[3]。③藥物在材料中分散情況的觀察與方法的選用：將不同狀態(tài)下的丹參素鈉通過(guò)X線(xiàn)衍射法進(jìn)行藥物在材料中分散情況的觀察。結(jié)果顯示，在2θ=15.797°時(shí)，丹參素鈉特征衍射峰最強(qiáng)，PLGA為無(wú)定型物，衍射峰狀態(tài)為寬而扁的饅頭形，微球與兩者的物理混合物峰型相同，但丹參素鈉的特征衍射峰強(qiáng)度減弱，說(shuō)明部分藥物依然會(huì)在載體材料中以晶體狀態(tài)分散存在。不同考察因素對(duì)丹參素鈉-PLGA微球質(zhì)量的影響，見(jiàn)表1。

討 論

W/O/W能型乳化溶劑能夠?qū)⒍喾N水溶性藥物通過(guò)揮發(fā)法進(jìn)行微球的制備。本次試驗(yàn)顯示，在利用W/O/W能型乳化溶劑揮發(fā)法對(duì)丹參素鈉-PLGA緩釋微球時(shí)，對(duì)其質(zhì)量以及性能造成較大影響的因素主要有材料的種類(lèi)、溶液攪拌時(shí)的轉(zhuǎn)速、正乙烷的加入量、司盤(pán)80(%)、材料的濃度、外油相溫度以及二氯甲烷與丙酮的比例。其中外油相的溫度能夠?qū)ξ⑶虺汕蛐栽斐芍苯拥挠绊?，如果溫度過(guò)低，就會(huì)導(dǎo)致樣品很快變黏，而高溫度時(shí)，制備的微球固化速度相對(duì)較快，可有效避免上述問(wèn)題的發(fā)生。本次實(shí)驗(yàn)的有機(jī)相選用了二氯甲烷和丙酮，主要原因在于二氯甲烷的沸點(diǎn)較低，而丙酮具有一定的水溶性，二者能夠在應(yīng)用后相融合，并在外油相中擴(kuò)散，但是如果加入的數(shù)量過(guò)多，就會(huì)造成微球載藥量與包封率下降。而在試驗(yàn)中選用PLGA50/50COOR主要原因在于其具有較好的親水性，能夠與水溶性丹參素鈉相溶，可以促進(jìn)載藥量與包封率的有效提高。

表1 不同因素對(duì)丹參素鈉-PLGA微球質(zhì)量的影響(n)