吳 丹 張夏平 劉冬冬 李 偉

（吉林省動物疫病預防控制中心，吉林長春 130062）

布魯氏菌病被稱為補兵，是一種由布魯氏菌屬引起的一種奀瘦共患的傳染病，是一種細胞內(nèi)寄生的病原菌，主要的侵害部位就是動物的淋巴系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)，能夠感染的生物型是比較多，其中羊布魯氏菌的致病性是最強的，在臨床上也是牛、羊、豬的布魯氏菌病的影響最大，病畜主要是通過流產(chǎn)物、精液和乳汁排菌。免疫接種的范圍主要是疫情呈地方性流行的區(qū)域，主要的免疫對象是免疫接種范圍內(nèi)的牛、羊、豬等等，主要是通過采用滴眼免疫、灌服免疫和自由飲水免疫的方法對實驗羊只進行疫苗免疫，然后對動物血清進行采集，然后通過虎紅平板、試管凝集等方法對免疫前后的不同時期的抗體水平進行對比，然后選取出最佳的免疫方法，具有一定的推廣價值。

1 實驗材料

1.1 實驗動物

對某地區(qū)某羊場的實驗羊只主要有100只，大都是6～10月齡之間的羊只。在經(jīng)過布病虎紅凝集試驗、試管凝集試驗之后進行檢測均為陰性；隨機分為4組，每組為25只，分別為滴眼免疫組（A組）、灌服免疫組（B組）、自由飲水免疫組（C組）、對照組（D組）。被試驗的羊只都要進行耳標標記，要按照正常的聲場對羊只進行隔離飼養(yǎng)和管理[1]。

1.2 實驗器材

微量加樣器、林心肌、消毒器、消毒好的玻璃板、牙簽注射器、一次性手套、防護服和電冰箱。

1.3 試劑

病虎紅凝集抗原、陰陽性血清購自中國獸藥監(jiān)察所；布病試管凝集試驗抗原、陽性血清：中國獸藥監(jiān)察所。

2 試驗方法

使用生理鹽水按照相關(guān)的說明對布病疫苗進行稀釋，然后按照預先設(shè)計好的內(nèi)容進行分組，對A組的動物實施滴眼免疫的方式，對于B組使用灌服的方式進行免疫；將疫苗吸入到去掉針頭的注射器當中，然后進行灌服；對C組進行自由飲水的免疫，對照組不進行免疫處理，各組的羊只都要進行隔離飼養(yǎng)。

表1 各個實驗組試管凝集實驗平均凝集效價

在進行免疫后的30d、45d、60d、90d和120d以及150d，分別對試驗的羊只進行頸靜脈的采血處理，然后離心對血清進行分離，在實驗室中使用布病虎紅凝集試驗、試管凝集試驗的方式，分別對試驗羊的血清抗體水平進行一定的檢驗，具體的操作要按照相關(guān)的國家標準來進行[2]。

3 實驗結(jié)果

本次試驗采集的血清都是事先通過虎紅平板檢測的，除了對照組顯示的是陰性之外，剩余的各組都是陽性。然后對各個組進行試管凝集試驗，對照組為陰性，其余組陽性只數(shù)與虎紅平板結(jié)果數(shù)是保持一致的。

對經(jīng)過免疫的羊只在其30d、45d、60d、90d和120d以及150d進行血清的采集，通過試管凝集實驗可以對平均凝集效價進行確定，然后進行一定的對比之后可以發(fā)現(xiàn)，各個實驗組的抗體活性率都在面以后的30d之后達到了頂峰，其中B組的抗體升得最快，且血清抗體也比較高，可以如表1所示：

4 結(jié)語

綜上所述，實驗最開始是采用的是虎紅平板對所有未免疫的羊只進行檢測，這樣的結(jié)果就是全部為陰性，然后通過試管凝集實驗進行復檢，結(jié)果具有一致性。因為虎紅平板實驗檢測結(jié)果判定更具有主觀性，因此需要結(jié)合虎紅平板的初檢和試管凝集實驗的再次檢驗，實驗結(jié)果主要是以試管凝集試驗結(jié)果為主。對試驗結(jié)果進行分析之后可以發(fā)現(xiàn)，試驗羊使用滴眼免疫效率為84%，而使用注射器進行灌服免疫的有效率為92%，直接將布病疫苗加水讓牛羊自由飲水的免疫方式的有效率在68%，而且對不同時期的平均凝集效價進行觀察也可以看出，灌服免疫的平均凝集效價組稿，這就說明采用一次性注射微進行灌服免疫的效果為最佳，在人力允許的情況下可以進行廣泛的使用。對于一次性注射器灌服免疫來說，它最大的優(yōu)點就是可以減少不必要的浪費現(xiàn)象，而且采用的是人工保定的方式，單只灌服，能夠讓的免疫動物不出現(xiàn)漏免的情況，同時還能避免因為疫苗服用不均衡的問題而出現(xiàn)免疫效果的不同，同時在進行免疫之后還能對注射器進行集中規(guī)范的處理，避免布魯氏菌病疫苗對于環(huán)境的影響，能夠在最大程度上對人畜安全進行有效保證。