王金

［鄭州大學附屬兒童醫(yī)院（河南省兒童醫(yī)院、鄭州兒童醫(yī)院） 兒研所，河南 鄭州 450018］

慢性粒細胞白血病在青少年及兒童中較為少見，病因也尚未完全清楚。近年來，發(fā)病率呈上升趨勢，一旦發(fā)病對患兒的身心健康影響巨大，故需引起足夠的重視［1-3］。慢性粒細胞白血病病程一般較長，其生存期普遍在3～5年間，而且對放化療均高度抗拒，多經伊馬替尼等藥物治療，治療難度較大，而分析核型有助于了解病情嚴重程度，判斷預后情況。本次研究選擇2014年2月至2017年1月在本院接受治療的慢性粒細胞白血病患者128 例，均經由骨髓及外周血液樣本經培養(yǎng)后，采用R 顯帶技術分析染色體核型；急變期積極治療者隨訪6 個月，以6 個月內患者死亡或6個月為隨訪截止，獲得一定研究成果，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究選擇 2014年 2月至 2017年1月在本院接受治療的慢性粒細胞白血病患者128 例，對照組，男89 例（69.53%），女39 例（30.47%），年齡3～12 歲，平均（8.75±1.16）歲。納入標準：①入院后均接受血尿常規(guī)、骨髓穿刺等檢查，結合臨床表現，明確慢性粒細胞白血病診斷；②年齡均≤12 歲；③意識清楚，無精神系統(tǒng)疾病，人格認知均正常；④所有患者、法定監(jiān)護人均對本次研究內容知情同意，自愿參與，并同醫(yī)院簽訂知情同意書。排除標準：①除慢性粒細胞性以外其他類型白血??；②重要臟器嚴重疾病者；③依從性較差者；④傳染性疾病，除血液系統(tǒng)以外其他臟器或系統(tǒng)惡性疾病。

1.2 方法

所有慢性粒細胞患者均在空腹狀態(tài)下抽取外周靜脈血細胞樣本，并擇期抽取骨髓樣本，均經1～2 d 短期培養(yǎng)，經秋水酰胺處理、固定等一系列步驟后，在R 顯帶及染色后，利用顯微鏡觀察并分析核分裂像，參考《人類細胞遺傳學國際命名體制（ISCN1995）》描述染色體核型以及核異常者。其中骨髓活檢方法如下：常規(guī)皮膚消毒，取患兒髂前或髂后上棘，局麻后，經骨髓穿刺針通過兩步法抽取骨髓樣本；骨髓樣本處理后，以無擠壓、至少包含3 個骨小梁間區(qū)、20 個分裂像為標準判斷合格樣本［4-5］。明確診斷后積極化療者，觀察并分析治療效果、治療后6 個月隨訪情況。其中，ISCN （International System for Human Cytogenetic Nomenclature）為人類染色體命名國際規(guī)則。

1.3 觀察指標

觀察指標包括pH 檢測結果，變異型核型分布，染色體核型演變情況，以及其中包含的急變期患者、慢性期患者及加速期患者例數及所占比例；部分患者積極化療，觀察并分析治療效果（完全緩解標準為無pH 陽性細胞，白細胞計數＜10×109/L，血紅蛋白≥100 g/L，無效標準為白細胞及血紅蛋白均未見明顯變化，部分緩解標準為介于完全緩解及無效標準之間）；隨訪6 個月，以6 個月內患者死亡或6 個月為隨訪截止。其中，慢性粒細胞白血病不同染色體分期診斷參考《WHO關于慢性骨髓增殖性疾病的分類和診斷標準》［6］。

1.4 統(tǒng)計學方法

本次研究以EXCEL 軟件處理數據，計數資料以百分比（%）表示，計數資料組間比較采用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 慢性粒細胞白血病染色體分期核型演變情況分布

128 例慢性粒細胞白血病患者中包含pH 陽性者 115 例（89.84%），pH 染色體陰性者 13 例（10.16%）；而pH陽性者中，變異型8例（6.96%），染色體核型演變者25 例（21.74%），包括急變期20 例、慢性期4 例及加速期1 例；附加染色體結構異常者25 例，包括單純結構及數量異常者各 7 例、6 例，其他異常者 12 例。見表1、2。

表1 染色體分期核型演變情況及附加染色體情況分布

表2 染色體不同分期與染色體異常附加情況分布 例（%）

2.2 慢性粒細胞白血病治療效果及隨訪情況

急變期29 例中積極化療者10 例，完全緩解者4 例，部分緩解1 例，治療無效者5 例（均染色體復雜異常），治療后6 個月內死亡1 例。

3 討論

白血病是一種造血干細胞惡性克隆性疾病，嚴重者可導致患者死亡。白血病可分為急性白血病以及慢性白血病，根據其疾病特點不同而分為淋巴細胞性白血病、粒細胞性白血病等疾病，男性患者偏多。而慢性粒細胞白血病源于多能干細胞，其病變主要涉及髓系粒細胞以及外周血液循環(huán)粒細胞，以粒細胞異常惡性增多、不成熟及脾大為主要臨床特征，屬于獲得性異常，其特征性標志為pH 染色體，即費城染色體［9 號染色體易位至 22 號，即t（9；22）（q34；q11.2）］，可分為3 個不同亞型，蛋白編碼分別為P210 蛋白、P230 蛋白及 P190 蛋白［7-8］。而且 pH 染色體在慢性粒細胞白血病與骨髓增生異常綜合征的鑒別診斷方面具有良好的臨床價值［9］。相關研究多認為白血病患者染色體核型與病情嚴重程度、預后之間存在緊密關聯(lián)，這表明分析染色體核型對評估病情、判斷預后具有良好的臨床價值［10-12］。

本次研究中，128 例慢性粒細胞白血病患者中pH 陽性率89.84%、陰性率10.16%；提示慢性粒細胞白血病中pH 陽性率較高，不僅證實上述觀點，還可將慢性粒細胞白血病分為pH 陽性、pH陰性，兩個不同類型。在慢性粒細胞白血病病變過程中存在不同時期，即慢性期，加速期及急變期，pH 陽性在不同時期內普遍存在。而pH 陽性者中，變異型比例6.96%，染色體核型演變者發(fā)生率21.74%，包括急變期68.97%、慢性期4.17%及加速期33.33%；其中以急變期比例最高；這表明pH 陽性+染色體核型演變意味著慢性粒細胞白血病病情進展速度變快，而且隨著病情的加重，染色體核型演變率逐漸提高，故了解慢性粒細胞白血病染色體核型及附加染色體情況，有助于分析病情嚴重程度。在急變期29 例中積極化療者10 例，完全緩解者4 例，治療無效者5 例，治療后6 個月內死亡1 例；而治療無效者中均為附加其他類型，即染色體復雜附加者；提示染色體附加情況與治療效果、預后之間存在一定的關聯(lián)。本文并未就BCR-ABL（P210）融合基因、典型易位與復雜易位進行詳細研究，且樣本量較小，研究時間較短，故具有一定的局限性。

總之，慢性粒細胞白血病核型與判斷白血病患者預后之間存在一定關聯(lián)，而附加染色體的復雜程度越高，提示該患者預后可能越差。