鐘喬華，謝細(xì)娜，巫 娟，陳 琦，鄒俊忠，盧松耀

（廣東省揭陽(yáng)市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 揭陽(yáng)522000）

血清肌酐測(cè)定對(duì)腎功能評(píng)估、治療選擇、預(yù)后判斷均具有積極意義［1］。尤其在健康體檢過程，經(jīng)常會(huì)遇到有一些人的腎功能檢驗(yàn)結(jié)果中其他項(xiàng)目都正常，僅有肌酐輕度增高的情況，這時(shí)不但醫(yī)生難以作出正確診斷，也給受檢者增添了心理負(fù)擔(dān)，從而導(dǎo)致臨床醫(yī)生對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生了懷疑。為了了解本院肌酐檢測(cè)系統(tǒng)的性能狀況，根據(jù)國(guó)內(nèi)外有關(guān)性能評(píng)價(jià)的文件和報(bào)道，結(jié)合臨床工作實(shí)際，對(duì)其進(jìn)行性能驗(yàn)證，并與邁瑞配套肌酐檢測(cè)試劑進(jìn)行比對(duì)，以便為臨床診療提供有效的參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

材料和方法

1 評(píng)價(jià)系統(tǒng)

檢測(cè)儀器為日立7600全自動(dòng)生化分析儀，試劑：肌酐CREA試劑（酶法）：（上?？迫A公司，批號(hào)：20171222）；校準(zhǔn)品：科華校準(zhǔn)品（批號(hào)：20171222）；質(zhì)控品：朗道1025UN，793UE。

2 對(duì)照系統(tǒng)

邁瑞B(yǎng)S-800M及其配套試劑，質(zhì)控品：伯樂20401／20402。

3 方法

首先，測(cè)定2個(gè)水平質(zhì)控品，根據(jù)相關(guān)質(zhì)控規(guī)則進(jìn)行判斷，在控后方可進(jìn)行性能評(píng)價(jià)和對(duì)比。

3.1 精密度驗(yàn)證

3.1.1 方法 參考《WS／T 492-2016臨床檢驗(yàn)定量測(cè)定項(xiàng)目精密度與正確度性能驗(yàn)證》［2］，連續(xù)測(cè)定5 d，每天分析一個(gè)批次，每批分析兩個(gè)濃度水平，每一個(gè)濃度水平同一樣品重復(fù)測(cè)定3次。收集數(shù)據(jù)，計(jì)算批內(nèi)精密度以及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不精密度。

3.1.2 判定標(biāo)準(zhǔn) 批內(nèi)精密度 ＜1／4 TEa、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不精密度＜1／3 TEa，肌酐允許總誤差（TEa）為12%［3］。

3.2 正確度驗(yàn)證

3.2.1 方法 依據(jù)參考文獻(xiàn)［4］，用日立7600全自動(dòng)生化分析儀對(duì)衛(wèi)計(jì)委臨檢中心發(fā)放的5個(gè)不同濃度的EQA調(diào)查品進(jìn)行Cr檢測(cè)，采用同期EQA結(jié)果計(jì)算5份EQA調(diào)查品的相對(duì)偏倚，計(jì)算公式為相對(duì)偏倚 ＝［（｜本室測(cè)定均值-靶值｜）／靶值］×100%。

3.2.2 判斷標(biāo)準(zhǔn) 必須為成功的EQA，且平均偏倚≤1／2TEa。

3.3 線性范圍驗(yàn)證

3.3.1 方法 參考CLSI EP6-A2文件［5］，將高值（H）和低值（L）肌酐混合血清配制成6個(gè)濃度肌酐樣品，均檢測(cè)2次，記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，對(duì)2次測(cè)定值計(jì)算均值并與稀釋后的理論值比較。采用線性回歸分析，并列出回歸方程Y＝b X＋a，同時(shí)計(jì)算相關(guān)系數(shù)R，判斷其是否為線性，從而進(jìn)一步判斷廠家給出的線性范圍是否可接受。

3.3.2 判斷標(biāo)準(zhǔn) 若R≥0.975或R2≥0.95，b在0.97～1.03范圍內(nèi)，可判斷廠家提供的線性范圍可以接受。

3.4 臨床可報(bào)告范圍驗(yàn)證

3.4.1 方法 取一份高值標(biāo)本，分別用稀釋液做不同倍數(shù)（2、4、8、16、32、64倍）的稀釋，稀釋好的標(biāo)本分別測(cè)定2次，收集實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算理論值以及相對(duì)偏倚。

3.4.2 判定標(biāo)準(zhǔn) 相對(duì)偏倚小于10%的稀釋倍數(shù)為最大稀釋倍數(shù)；臨床可報(bào)告范圍（clinical reportable range，CRR）＝線性范圍×最大稀釋倍數(shù)。

3.5 參考區(qū)間驗(yàn)證

本室參考范圍選用《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》／廠商推薦的項(xiàng)目參考范圍。

3.5.1 方法 參考CLSI C28-A2文件［6］，從我院體檢人群中收集40例肝、腎功能及脂類項(xiàng)目結(jié)果均正常的健康人血清標(biāo)本，年齡16～56歲，其中男20例，女20例，使用本實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)，并計(jì)算比值R。

3.5.2 驗(yàn)證判斷R＝測(cè)定結(jié)果在參考范圍內(nèi)的例數(shù)／總測(cè)定例數(shù)≥90%表示該項(xiàng)目參考區(qū)間驗(yàn)證合格。

3.6 比對(duì)試驗(yàn)

3.6.1 樣本測(cè)定 按照EP9-A3文件［7］要求，分別在日立7600和邁瑞B(yǎng)S-800M上隨機(jī)測(cè)定40份血清肌酐樣本（覆蓋高、中、低濃度，在測(cè)定范圍內(nèi)盡量平均分布），每份樣本每種方法單次測(cè)定，并記錄測(cè)定結(jié)果。測(cè)定之前對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，室內(nèi)質(zhì)控在控。

3.6.2 離群值檢查 按照EP9-A3文件要求及文獻(xiàn)［8］內(nèi)容中描述的廣義極端學(xué)生化偏差（ESD）方法對(duì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行離群值檢查。

3.6.3 方法比對(duì)與偏倚評(píng)估 繪制散點(diǎn)圖、偏差圖，根據(jù)數(shù)據(jù)特征選擇合適的回歸分析模型（OLR、WLS、Deming、Passing-Baklok）擬合回歸方程，然后計(jì)算各個(gè)參數(shù)在給定值處的偏倚，以小于1／2TEa（±6.0%）為可接受標(biāo)準(zhǔn)。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用Microsoft Excel 2007、SPSS 25.0軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，回歸和偏移分析采用WLS模型計(jì)算，顯著性檢驗(yàn)采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 精密度驗(yàn)證結(jié)果

批內(nèi)精密度 ＜1／4Tea，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不精密度 ＜1／3Tea，符合質(zhì)量要求。見表1。

表1 精密度驗(yàn)證結(jié)果

2 正確度驗(yàn)證結(jié)果

5個(gè)EQA調(diào)查品的相對(duì)偏移為0.33%～3.51%，均 ＜1／2 TEa，符合質(zhì)量目標(biāo)要求。見表2。

表2 正確度驗(yàn)證結(jié)果

3 線性范圍驗(yàn)證結(jié)果

b＝1.025（在0.97～1.03范圍內(nèi)），R2＝0.999≥0.95，可接受的線性范圍為13.16～8206.5μmol／L。見圖1。

圖1 Cr線性分析

4 臨床可報(bào)告范圍驗(yàn)證結(jié)果

臨床可報(bào)告范圍驗(yàn)證結(jié)果，見表3。

表3 可報(bào)告范圍驗(yàn)證結(jié)果

從表3可見，1：16稀釋度的相對(duì)偏倚小于10%，表示我科所檢測(cè)CR的最大稀釋倍數(shù)為16倍，臨床可報(bào)告范圍為13.16～13 1304μmol／L。

5 參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

通過對(duì)男女各20例健康體檢者的血清肌酐進(jìn)行測(cè)定并統(tǒng)計(jì)分析，分別有19例（R≥90%）在各參考區(qū)間內(nèi)，驗(yàn)證通過，表明本實(shí)驗(yàn)室引用的參考區(qū)間符合臨床要求。

6 比對(duì)試驗(yàn)

6.1 離群值檢驗(yàn) 對(duì)40份標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果繪制散點(diǎn)圖，目測(cè)結(jié)果可見有一個(gè)明顯異常值點(diǎn)，采用ESD法進(jìn)一步檢驗(yàn)后確認(rèn)該結(jié)果為離群值，剔除后，補(bǔ)充相近水平標(biāo)本，重新分析，未發(fā)現(xiàn)有離群值點(diǎn)。

6.2 方法比對(duì)和偏倚評(píng)估

6.2.1 偏差圖的潛在特征分析 參照EP9-A3文件對(duì)無離群值的40組結(jié)果繪制偏差圖。偏差圖結(jié)果顯示，日立7600和邁瑞B(yǎng)S-800M肌酐檢測(cè)結(jié)果間的差值，具有恒定的CV變化，采用WLS回歸分析，偏差圖見圖2。

圖2 邁瑞B(yǎng)S-800M和日立7600檢測(cè)Cr水平偏倚

6.2.2 偏倚評(píng)估 根據(jù)特征分析，采用WLS回歸分析，回歸方程及其各參數(shù)結(jié)果見表4，將肌酐的醫(yī)學(xué)決定水平40、141、530μmol／L分別代入回歸方程，其偏移結(jié)果見表5。

表4 日立7600和邁瑞B(yǎng)S-800M檢測(cè)Cr比對(duì)回歸方程及各參數(shù)結(jié)果

表5 日立7600和邁瑞B(yǎng)S-800M檢測(cè)Cr比對(duì)回歸模型醫(yī)學(xué)決定水平處的偏移結(jié)果

討 論

在我國(guó)，部分實(shí)驗(yàn)室為節(jié)藥成本采用非配套試劑，導(dǎo)致檢測(cè)系統(tǒng)缺乏完整性，按要求這些實(shí)驗(yàn)室均應(yīng)對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)的有關(guān)性能參數(shù)進(jìn)行評(píng)估［9］。由于我院酶法肌酐檢測(cè)試劑為非配套試劑，為了了解我院肌酐檢測(cè)系統(tǒng)的性能狀況，以便更好的為臨床診斷和治療提供有效的參考，我們依據(jù)國(guó)內(nèi)外有關(guān)性能評(píng)價(jià)的文件和報(bào)道，結(jié)合臨床工作實(shí)際，對(duì)其精密度等性能進(jìn)行驗(yàn)證。

在進(jìn)行標(biāo)本檢驗(yàn)時(shí)，通常1次檢驗(yàn)即發(fā)出報(bào)告，對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)精密度要求較高。本組研究結(jié)果顯示，批內(nèi)精密度＜1／4Tea，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不精密度 ＜1／3Tea，符合質(zhì)量要求，說明檢測(cè)系統(tǒng)的精密度良好，測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定。

在實(shí)際工作中，由于大部分實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)系統(tǒng)都是非配套系統(tǒng)，以及有證參考物質(zhì)價(jià)格昂貴且不好購(gòu)買等，使得正確度驗(yàn)證操作起來有一定難度，為此，我們參考有關(guān)文獻(xiàn)［10］，將衛(wèi)生部室間質(zhì)評(píng)檢測(cè)結(jié)果與靶值進(jìn)行相關(guān)性分析，從而進(jìn)行正確度驗(yàn)證，結(jié)果顯示，衛(wèi)計(jì)委臨檢中心發(fā)放的EQA調(diào)查品5個(gè)水平與靶值的相對(duì)偏倚為0.33%～3.51%，均＜1／2 TEa，符合質(zhì)量目標(biāo)要求。

線性范圍驗(yàn)證結(jié)果顯示，該檢測(cè)系統(tǒng)可接受的線性范圍為13.16～8206.5μmol／L，且b＝1.025（在0.97～1.03范圍內(nèi)），R2＝0.999≥0.95，說明測(cè)定值與理論值符合性良好。經(jīng)過驗(yàn)證，得出該檢測(cè)系統(tǒng)的最大稀釋倍數(shù)為16倍，臨床可報(bào)告范圍為13.16～131304μmol／L。參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果顯示，本研究男女各20例健康體檢者的血清肌酐中各有19例（R≥90%）在參考區(qū)間內(nèi)，提示參考區(qū)間符合臨床要求。

在保證檢測(cè)系統(tǒng)分析性能符合質(zhì)量要求的前提下，質(zhì)量管理的主要目標(biāo)是實(shí)現(xiàn)同一項(xiàng)目在不同檢測(cè)系統(tǒng)間具有可比性，而通過比對(duì)實(shí)驗(yàn)，是實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確度溯源和患者標(biāo)本檢驗(yàn)結(jié)果可比性的重要途徑之一［11］。本研究中邁瑞B(yǎng)S-800M肌酐檢測(cè)系統(tǒng)具有量值溯源性，故可作為我院肌酐檢測(cè)系統(tǒng)溯源性和比較的目標(biāo)，我們采用最新的EP9-A3文件評(píng)估兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)的可比性，結(jié)果顯示：在散點(diǎn)圖中可見有一個(gè)明顯異常值點(diǎn)，采用ESD法進(jìn)一步檢驗(yàn)后確認(rèn)該結(jié)果為離群值，將其剔除，并補(bǔ)充相近水平標(biāo)本，重測(cè)未發(fā)現(xiàn)離群值點(diǎn)；偏差圖結(jié)果顯示，邁瑞B(yǎng)S-800M和日立7600肌酐檢測(cè)結(jié)果間的差值，具有恒定CV的變化，采用WLS回歸分析，結(jié)果顯示斜率的95%CI為0.9738～0.9743，截距的95%CI為2.3149～3.6875，比例偏移為-2.62%～-2.57%，小于可接受標(biāo)準(zhǔn)；在不同的醫(yī)學(xué)決定水平處，兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)的偏倚也均小于可接受標(biāo)準(zhǔn)，表明兩個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)的檢測(cè)結(jié)果具有高度一致性。

綜上所述，該國(guó)產(chǎn)酶法肌酐檢測(cè)試劑在日立7600全自動(dòng)生化分析儀上的分析性能良好，具有極好的精密度、正確度和較寬的線性范圍，與邁瑞B(yǎng)S-800M肌酐檢測(cè)結(jié)果具有良好的一致性，因此可滿足臨床應(yīng)用需求。