王懷禹

（南充職業(yè)技術(shù)學(xué)院，四川 南充 637131）

理論分析

豬偽狂犬?。≒R）是偽狂犬病病毒（PRV）引起的高度接觸性和急性傳染病。PRV是豬偽狂犬病的病原，具有嗜神經(jīng)性，它感染豬群以后將使母豬產(chǎn)生繁殖障礙，導(dǎo)致母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎，新生仔豬產(chǎn)生腹瀉和神經(jīng)癥狀，尤其是小豬的致死率非常高；公豬的睪丸腫脹、萎縮，成年豬感染后雖不易死亡，但可長期帶毒。該病毒自1902年被匈牙利學(xué)者Aueszky發(fā)現(xiàn)以來，給世界范圍內(nèi)的養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。迄今為止，該病毒已經(jīng)出現(xiàn)了100多年，但在很多養(yǎng)豬國家仍然無法得到有效根除。1947年，我國獸醫(yī)行業(yè)的先驅(qū)劉永純先生率先從貓體內(nèi)分離到該病毒，首次在貓上發(fā)現(xiàn)PRV感染的案例，確認了該病在我國的存在。1956年，周圣文首次發(fā)現(xiàn)國內(nèi)哺乳仔豬被PRV感染。此后PRV給我國養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大損失，尤其是2011年以來，偽狂犬病毒變異株的出現(xiàn)和廣泛流行，嚴重制約了生豬產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。

表1 不同商用豬偽狂犬疫苗優(yōu)缺點對比

1 豬偽狂犬疫苗應(yīng)用概況

目前，國內(nèi)外商用的豬偽狂犬疫苗大致可分為以下3類（見表1）：一是將分離的野毒或強毒經(jīng)甲醛滅活后，加佐劑乳化制成油乳劑滅活疫苗；二是將分離的野毒或強毒經(jīng)非豬源細胞或者雞胚反復(fù)傳代致弱后研制的弱毒疫苗；三是利用基因工程技術(shù)構(gòu)建的基因缺失疫苗。3類疫苗各有其優(yōu)缺點，它們在豬偽狂犬病的防控方面起著非常重要的作用。根據(jù)調(diào)研數(shù)據(jù)，我國大規(guī)模豬場豬偽狂犬疫苗品牌使用比較集中，進口品牌約占40%，前十大品牌使用率高達92%，其中，Bartha-K61株疫苗（缺失gE/gI）是一個非常安全的疫苗，在世界上應(yīng)用最為廣泛，使用比例達80%以上。此外，一些基因工程疫苗例如核酸疫苗、亞單位疫苗及重組疫苗尚在研究之中。

2 豬偽狂犬疫苗免疫現(xiàn)狀

在20世紀(jì)90年代，我國從匈牙利引進PRV的經(jīng)典弱毒苗Bartha-K61株，該疫苗毒力弱，免疫效果好，經(jīng)過大量生產(chǎn)并廣泛應(yīng)用到各大豬場后，豬偽狂犬病在我國流行的狀況得到了有效控制，參照國外尤其是美國對豬PRV的凈化方法，許多豬場完成了對該病原的凈化。但在2011年，豬偽狂犬病在經(jīng)過Bartha-K61株免疫過的豬場暴發(fā)，并從華北開始蔓延至全國，主要表現(xiàn)為母豬流產(chǎn)死胎、仔豬死亡率高；分離出的PRV流行毒株再次發(fā)生了變異，新產(chǎn)生的毒株與經(jīng)典PRV弱毒苗Bartha-K61分別屬于不同的亞群，使現(xiàn)有的疫苗接種后無法產(chǎn)生足夠有效地保護作用，導(dǎo)致PRV在國內(nèi)再次流行，許多豬場和地區(qū)的PRV凈化工作毀于一旦。

一直以來，人們通常使用優(yōu)質(zhì)PRV-gE基因缺失疫苗對豬實施強化免疫，這在豬偽狂犬病的防控上功不可沒，免疫的同時結(jié)合PRV-gE抗原和PRV-gE抗體檢測，實施淘汰和凈化被野毒感染的豬只，成為控制和凈化豬偽狂犬病的重要途徑。通過對近5年國內(nèi)相當(dāng)部分規(guī)?；i場PRV-gE抗體檢測分析，發(fā)現(xiàn)國內(nèi)目前對豬偽狂犬病的凈化效果還不盡人意。陳文雄[1]檢測分析了2013—2014年華南地區(qū)99個豬場臨床樣品（腦、扁桃體、淋巴結(jié)和胎衣），PRV平均陽性率為29.3%，表明偽狂犬病毒在華南地區(qū)豬群中廣泛流行，感染率較高。王慧等[2]檢測分析了湖南省2013—2017年14個規(guī)模化豬場血清樣品，PRV-gE抗體平均陽性率為32.8%。張躍等[3]PRV-gE抗體檢測發(fā)現(xiàn)，場（戶）陽性率高達84.08%，樣品平均陽性率高達53.36%；陽性率在不同階段豬群的變化趨勢為：經(jīng)產(chǎn)母豬（58.28%）＞育成豬（57.55%）＞育肥豬（54.49%）＞后備母豬（37.46%）；另外在散養(yǎng)戶的樣品陽性率（66.42%）大于規(guī)模豬場的陽性率（47.71%），可能由于多數(shù)散養(yǎng)戶免疫意識淡薄，不注意引種場的疫病凈化程度，引進種豬時不實施檢疫，免疫程序不科學(xué)規(guī)范，生物安全措施和管理不到位。研究結(jié)果表明，北京市PRV野毒感染面廣且較為嚴重。鄭藝杰[4]對福建龍海市10個規(guī)?；i場偽狂犬病進行血清學(xué)檢測與評價，10個豬場均接種了PRV-gE基因缺失疫苗，但仍然在不同階段群豬群檢測出程度不同的陽性率，gE抗體平均陽性率變化趨勢為：種公豬（41.96%）＞肥育豬（40.5%）＞生產(chǎn)母豬（37.0%）＞后備母豬（32.28%），gE抗體平均陽性率均在30%以上，表明這些豬場仍存在較高的PRV野毒感染率，尤其是種公豬和肥育豬帶毒現(xiàn)象較為嚴重，表明在養(yǎng)豬生產(chǎn)中存在免疫盲區(qū)?？岛V利[5]檢測了2015—2017年河南等18個?。ㄊ校┮?guī)?；i場的9 447份血清樣品，結(jié)果表明，在檢測的5 699份樣品中，PRV-gE抗體總陽性率為60.33%，表明國內(nèi)豬場豬群感染PRV野毒的情況十分普遍且呈逐年增高趨勢；研究還發(fā)現(xiàn)2017年P(guān)RV的野毒感染在河南等7個養(yǎng)豬大省達到了一個相當(dāng)高的程度，從一個側(cè)面反映了我國PRV感染的嚴重性。李海琴等[6]通過對江西32個規(guī)模化豬場1 820份血清樣品進行檢測后發(fā)現(xiàn)，該地區(qū)豬場PRV野毒感染率較高，豬場PRV-gE抗體總陽性率和場陽性率分別到達37.4%和65.6%。

3 豬偽狂犬病疫苗免疫存在的問題

從前面的分析可以看出，國內(nèi)大中型豬場基本上都實施了豬偽狂犬疫苗強化免疫，這在一定程度上阻止了我國豬偽狂犬病的大面積流行。但從免疫現(xiàn)狀及效果來看，在免疫意識、免疫程序及劑量、疫苗選擇、免疫覆蓋面等方面仍然存在一些不容忽視的問題，導(dǎo)致很多豬場豬偽狂犬病凈化不徹底，老病新發(fā)現(xiàn)象仍然很普遍，野毒抗體陽性率多在30%以上，嚴重制約了養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

3.1 疫苗選擇存在誤區(qū)

目前，商用豬偽狂犬疫苗品種較多，往往讓養(yǎng)豬人難以選擇。存在的誤區(qū)主要有：一是認為疫苗抗原含量越高越好。安全有效的疫苗中抗原含量始終處于一個合理區(qū)間，并非抗原含量越高越好。相反，抗原劑量過高易導(dǎo)致免疫耐受反應(yīng)致免疫失敗。二是認為基因缺失越多的疫苗免疫效果越好。疫苗的免疫原性與其抗原性相關(guān)，而基因缺失太多的疫苗易減弱制苗毒株的抗原性，免疫效果自然大打折扣。三是認為疫苗聯(lián)合免疫效果好。不可否認，聯(lián)合免疫是未來疫苗免疫發(fā)展的趨勢，但目前聯(lián)合免疫技術(shù)并不成熟，還有待于進一步研究和驗證。四是認為弱毒疫苗之間混用效果好。不同基因缺失的弱毒疫苗混用，會給PRV的檢測診斷帶來困難。

3.2 免疫程序不合理

一是存在免疫盲區(qū)。對于一點式生產(chǎn)的豬場，如果免疫覆蓋不全面，存在免疫盲區(qū)，如只重視種母豬或仔豬的免疫，忽視對肥育豬的免疫，都是不正確的做法，將會導(dǎo)致PRV在未免疫豬群中潛伏。二是免疫間隔時間過長。如同一頭母豬同一種疫苗免疫時間間隔過長，不僅浪費了疫苗效果，而且非常容易導(dǎo)致野毒入侵和擴散。三是仔豬免疫中存在的問題。母豬的免疫狀況直接影響到仔豬的免疫時間和次數(shù)。研究資料表明，國外母豬在正常的飼喂和衛(wèi)生條件下，對其實施規(guī)范免疫后，一般其仔豬體內(nèi)的母源抗體可持續(xù)8～14周，而國內(nèi)豬場仔豬母源抗體的持續(xù)時間可能達不到這個時間長度，這與豬場相對粗放的生產(chǎn)管理方式，較低的飼喂水平，不盡如人意的生物安全措施以及免疫程序等有關(guān)。四是許多豬場不加檢測分析便實施全群統(tǒng)一接種。由于部分豬存在抗體干擾和免疫抑制，加之場內(nèi)可能存在帶毒豬和處于亞健康狀態(tài)的豬，因此，省去免疫前的PRV-gE抗體檢測而盲目實施全群免疫，這種做法風(fēng)險極大，其后果就是導(dǎo)致免疫失敗，給豬場造成經(jīng)濟損失。

3.3 免疫劑量不足或劑量過大

部分豬場在免疫接種劑量上存在誤區(qū)：一是習(xí)慣于減輕仔豬初次接種量。認為豬免疫劑量與其月齡成正相關(guān)，事實上仔豬免疫系統(tǒng)未完全建立，若需免疫系統(tǒng)產(chǎn)生有效的免疫反應(yīng)和免疫保護則疫苗抗原劑量必須滿足要求。此外，很多廠家生產(chǎn)的PRV疫苗質(zhì)量參差不齊，也是導(dǎo)致免疫效果不佳的原因之一。有研究指出，肉豬使用國產(chǎn)PRV-gE缺失苗基本無效。二是很多豬場喜歡一味地加大疫苗免疫劑量。疫苗抗體產(chǎn)生量并不與疫苗免疫劑量成正比，也就是說疫苗免疫劑量只要達到合理值即可，因為其抗體的產(chǎn)生量很有限，若再增加劑量，反而還會引起免疫副作用，而且還會增加使用成本。正確的做法是按照疫苗生產(chǎn)廠家推薦劑量使用。

4 豬偽狂犬病疫苗免疫面臨的挑戰(zhàn)

從防疫的視角看，豬偽狂犬病免疫面臨的最大挑戰(zhàn)是現(xiàn)有疫苗不能對PRV變異毒株提供完全保護。從豬偽狂犬病的免疫現(xiàn)狀看，近幾年，許多規(guī)?；i場盡管使用基因缺失活疫苗進行了免疫，但仍然出現(xiàn)豬偽狂犬病流行的現(xiàn)象，并從不同地區(qū)發(fā)病死亡的仔豬組織中分離到多株豬偽狂犬病毒，如HeN1株、JS-2012株、TJ株、ZJ01株等。陳文雄[1]近年在華南地區(qū)豬場的病料樣品中成功分離到6株P(guān)RV（命名為YC、ST、FL、BE、SY和YQ），分離毒株之間gE基因氨基酸同源性為98.1%～99.8%。6株病毒位于同一分支，表明分離株之間的進化關(guān)系較近，與我國當(dāng)前流行的PRV變異株HeN1、HN1201以及HJL8形成獨立分支，與國外經(jīng)典毒株Becker株、Kaplan株等遺傳關(guān)系相對較遠。相較早期的PRV毒株，新分離毒株在第47位和496位有1個aa插入。對YC分離株進行致病力進行分析，發(fā)現(xiàn)其感染仔豬后出現(xiàn)典型PRV癥狀，致病性較強。

目前我國PRV存在Ⅰ型和Ⅱ型2個基因型，臨床分離出來的多為Ⅱ型，而市場上主流的Bartha-K61株疫苗主要針對的是Ⅰ型病毒，造成其對變異后的病毒保護力不足。研究表明，Bartha-K61株對變異前毒株攻擊可提供100%的保護，但對變異后毒株的供給只能提供50%的保護。研究表明，豬偽狂犬病毒新分離毒株存在變異現(xiàn)象且變異株的致病性有所增強，現(xiàn)有的PRV-gE基因缺失疫苗難以為新的流行毒株提供安全有效地保護，導(dǎo)致無法有效阻止PRV在豬群之間乃至地區(qū)之間的傳播循環(huán)，這很有可能是偽狂犬野毒感染率居高不下的一個重要原因?？梢?，豬場的豬偽狂犬病疫苗免疫不是一勞永逸的，為PRV感染豬接種疫苗也只能緩解臨床癥狀和減少排毒，對于那些潛伏感染帶毒豬發(fā)生的不定期間歇性排毒卻是不可避免的，因而控制和凈化豬偽狂犬病的最大障礙是豬場長期存在被PRV感染的帶毒豬。

5 豬偽狂犬病疫苗的免疫策略

國家對豬偽狂犬病的控制和凈化是有目標(biāo)規(guī)劃的，要求到2020年全國所有種豬場豬偽狂犬病要達到凈化標(biāo)準(zhǔn)，面對新近國內(nèi)豬場豬偽狂犬病流行的嚴峻態(tài)勢，做好基礎(chǔ)免疫，防控和凈化豬偽狂犬病已刻不容緩。除做好生物防控外，疫苗免疫接種仍是預(yù)防和控制豬偽狂犬病的有效措施。一是豬場應(yīng)當(dāng)選擇與場內(nèi)流行或者區(qū)域內(nèi)流行的毒株作為PRV疫苗株，制定科學(xué)合理的免疫程序，定期開展PRV-gB和PRV-gE抗體監(jiān)測及風(fēng)險評估，得到原始的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)資料，準(zhǔn)確分析豬場的免疫現(xiàn)狀，科學(xué)制定免疫方案，把控好每一個免疫環(huán)節(jié)，選擇質(zhì)量優(yōu)質(zhì)的疫苗，提升中和抗體水平，提高免疫效果。二是加強飼料質(zhì)量管控，防止豬重金屬、抗生素等藥物殘留導(dǎo)致的疫苗免疫效果不佳。三是做好豬場其他重大動物疫病的監(jiān)測與檢測工作，防止豬藍耳病等疫病單一或協(xié)同感染造成豬的免疫抑制，甚至免疫失敗。四是加強種豬的免疫強化，及時對種公豬和后備母豬進行PRV-gE抗體篩查，對被感染的陽性種豬要實行淘汰制度，以保障新生仔豬的品質(zhì)。

隨著養(yǎng)豬規(guī)模化進程的加速進行，在環(huán)保高壓態(tài)勢下，豬偽狂犬病免疫在中大規(guī)模養(yǎng)豬場的免疫比例會進一步提高，特別是散戶、專業(yè)大戶和小規(guī)模養(yǎng)殖戶豬偽狂犬病免疫比例將會有一個明顯的提升，這將會加快豬偽狂犬疫苗的研制步伐，加速國內(nèi)養(yǎng)豬場豬偽狂犬病的凈化進程。