黃明琦， 張曉， 鮑佳志， 羅雄， 孫靜， 黃世祥

(1.貴州醫(yī)科大學(xué) 公共衛(wèi)生學(xué)院， 貴州 貴陽(yáng) 550025； 2.貴州醫(yī)科大學(xué)附院, 貴州 貴陽(yáng) 550004； 3.貴州醫(yī)科大學(xué) 科技創(chuàng)新與產(chǎn)業(yè)發(fā)展處， 貴州 貴陽(yáng) 550025； 4.貴州醫(yī)科大學(xué) 教務(wù)處， 貴州 貴陽(yáng) 550025)

隨著人民生活方式的改變、體力活動(dòng)減少、飲食結(jié)構(gòu)改變，肥胖人群的比例逐漸升高，并趨向于年輕化[1]；且肥胖更增加了糖尿病、非酒精性脂肪肝、動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓及痛風(fēng)等疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)[2]，肥胖還增加某些惡性腫瘤的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)[3-4]。越來(lái)越多的人對(duì)減肥產(chǎn)品感興趣，但是又擔(dān)心產(chǎn)品安全問(wèn)題，希望使用天然、健康的減肥產(chǎn)品[5]。本研究采用高脂飼料建立肥胖小鼠模型，用魔芋、絞股藍(lán)、荷葉制成復(fù)方進(jìn)行干預(yù)，通過(guò)監(jiān)測(cè)小鼠體質(zhì)量及血脂指標(biāo)進(jìn)行效果評(píng)價(jià)，為開(kāi)發(fā)降血脂減輕體質(zhì)量的天然減肥產(chǎn)品提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物、試劑及儀器

清潔級(jí)昆明小鼠，體質(zhì)量18～22 g，購(gòu)于貴州醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，批號(hào)SYXK(黔)2018-0001。膽固醇(TC)測(cè)定試劑盒、甘油三酯(TG)測(cè)定試劑盒、高密度脂蛋白(HDL-C)測(cè)定試劑盒、低密度脂蛋白(LDL)測(cè)定試劑盒(南京建成生物工程研究所A113-1)，魔芋(毫州寶豐生物科技有限公司)，絞股藍(lán)(貴州阜康堂大藥房)，荷葉(貴州阜康堂大藥房)。酶標(biāo)儀(美國(guó)Thermo公司)，全自動(dòng)生化分析儀(美國(guó)杜邦公司AR型)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1魔芋降脂方的制作 取荷葉500 g、絞股藍(lán)500 g，加冷水浸泡30 min，水淹過(guò)藥面約3～5 cm，武火將浸泡的中藥燒開(kāi)，文火再煎煮20 min濾出藥液，再如法煎煮兩次，將3次煎煮的藥液混勻，進(jìn)行再煎煮熬制成濃中藥汁，取250 g的魔芋粉加入到中藥汁，充分?jǐn)噭蚝笾谱鞒山y(tǒng)一大小的糕狀，4 ℃冰箱放置備用。

1.2.2分組及肥胖小鼠模型建立 將60只小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、魔芋降脂方低、中、高劑量組及模型組(后4組為造模組)。對(duì)照組16只小鼠普通飼料喂養(yǎng)12周，其余44只小鼠(造模組)用于建立肥胖模型，分為3個(gè)籠子喂養(yǎng)，分別為15只、15只、14只，高脂飼料喂養(yǎng)12周，高脂飼料包括72.8%普通飼料、10%蔗糖、10%豬油、0.2%豬膽鹽、2%膽固醇；各組小鼠自由攝食、自由進(jìn)水，每天記錄進(jìn)水量、進(jìn)食量，定期稱(chēng)量小鼠體質(zhì)量。在喂食12周后，所有小鼠通過(guò)眼眶后靜脈叢采血，3 000 r/min離心10 min，取血清，24 h內(nèi)經(jīng)酶標(biāo)儀檢測(cè)血清TC、TG、LDL-C及HDL-C 水平，結(jié)合體質(zhì)量判斷肥胖模型是否建立成功[6-7]。將建模成功的小鼠隨機(jī)分為魔芋降脂方低、中、高劑量組和模型組，每組11只小鼠，魔芋降脂方低、中、高劑量組小鼠分別給予 0.25、0.50、0.75 g/kg魔芋降脂方，連續(xù)灌胃4周，模型組及對(duì)照組給予等量蒸餾水灌胃。

1.3 觀(guān)察指標(biāo)

干預(yù)4周，測(cè)量小鼠體質(zhì)量后，采用眼球取血與心臟取血的方法得到小鼠血樣，3 000 r/min離心10 min，取血清，24 h內(nèi)用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清中的TC、TG、LDL-C、HDL-C，判斷魔芋降脂方降血脂、減輕體質(zhì)量的效果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 體質(zhì)量及血脂指標(biāo)

對(duì)照組與造模的4組小鼠初始體質(zhì)量比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，造模小鼠進(jìn)行12周高脂飼料喂養(yǎng)后，造模組小鼠的體質(zhì)量、TC、TG、HDL-C高于對(duì)照組(P<0.01)，體質(zhì)量變化大于對(duì)照組(P<0.01)，表明模型建立成功。見(jiàn)表1。

表1 對(duì)照組及造模組小鼠體質(zhì)量比較Tab.1 Comparison of body mass of mice in control group and model group

與對(duì)照組相比，(1)P<0.01，(2)P<0.05

2.2 魔芋降脂方對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響

由表2可見(jiàn)，模型組小鼠各周的體質(zhì)量均明顯高于對(duì)照組(P<0.01)，魔芋降脂方各劑量組小鼠干預(yù)第3周、第4周時(shí)體質(zhì)量與對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與模型組相比，魔芋降脂方低劑量組小鼠在干預(yù)第3周、第4周時(shí)體質(zhì)量明顯下降(P<0.01)，中劑量組及高劑量組小鼠在干預(yù)第2周、第3周、第4周時(shí)體質(zhì)量明顯下降(P<0.01)。與低劑量組相比，中劑量組及高劑量組的體質(zhì)量明顯下降(P<0.05)；中劑量組與高劑量組的體質(zhì)量比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

組別體質(zhì)量(g)初始干預(yù)第1周干預(yù)第2周干預(yù)第3周干預(yù)第4周體質(zhì)量變化(g)對(duì)照組40.90±1.8243.24±1.5344.52±1.7747.06±1.9646.66±1.625.76±2.09模型組54.33±3.52(1)55.18±3.37(1)54.41±2.96(1)54.61±3.05(1)54.47±2.81(1)0.71±0.14(1)魔芋降脂方 低劑量組54.26±3.28(1)54.30±2.86(1)51.45±3.85(2)47.77±4.60(3)46.52±3.75(4)7.74±1.47(4) 中劑量組54.25±3.10(1)53.93±3.17(1)48.40±3.30(3)44.31±3.14(4)43.38±3.22(4)10.87±1.32(2)(4) 高劑量組54.27±3.21(1)54.23±3.26(1)50.72±3.67(2)(3)45.34±3.57(4)44.01±2.76(4)10.26±1.12(2)(4)

與對(duì)照組相比，(1)P<0.01，(2)P<0.05；與模型組相比，(3)表示P<0.05,(4)表示P<0.01

2.3 魔芋降脂方對(duì)小鼠血脂的影響

由表3可見(jiàn)，模型組小鼠血清TC、HDL-C水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；魔芋降脂方高劑量組小鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C水平均低于對(duì)照組 (P<0.05)，中劑量組小鼠血清TC、TG、LDL-C水平均低于對(duì)照組 (P<0.05)，低劑量組小鼠血清TG、LDL-C水平均低于對(duì)照組 (P<0.05)、HDL-C水平高于對(duì)照組 (P<0.05)。與低劑量組相比，中劑量組及高劑量組血清TC、TG、LDL-C水平明顯下降(P<0.05)；中劑量組與高劑量組血清TC、TG、LDL-C水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

組別TCTGHDL-CLDL-C對(duì)照組2.94±0.341.17±0.211.20±0.070.42±0.03模型組3.65±0.41(1)1.24±0.081.35±0.79(2)0.45±0.03魔芋降脂方 低劑量組2.67±0.25(3)1.03±0.07(1)(3)1.28±0.05(1)0.19±0.03(2)(3) 中劑量組2.30±0.22(2)(3)0.98±0.03(1)(3)1.20±0.09(3)0.16±0.02(2)(3) 高劑量組2.19±0.08(2)(3)0.99±0.04(1)(3)1.10±0.05(1)(3)0.18±0.03(2)(3)

與對(duì)照組相比，(1)P<0.05,(2)P<0.01；與模型組相比，(3)P<0.01

3 討論

肥胖是指機(jī)體脂肪總含量過(guò)多和(或)局部含量增多及分布異常,是一種由遺傳和環(huán)境等因素共同引起,并對(duì)健康造成一定影響的慢性代謝性疾病[8]，其發(fā)生的最根本原因是脂肪穩(wěn)態(tài)失衡,從而引起脂肪細(xì)胞中脂肪的過(guò)量積累[9]。

我國(guó)關(guān)于肥胖的相關(guān)記載最早可以追溯至《黃帝內(nèi)經(jīng)》時(shí)期，從古代開(kāi)始中醫(yī)對(duì)肥胖就有較深刻的認(rèn)識(shí)，到了現(xiàn)代，中醫(yī)從證型、證候，外在癥狀等方面對(duì)肥胖進(jìn)行了更為系統(tǒng)深入的研究[10]，認(rèn)為肥胖及血脂升高的病因病機(jī)與“痰”、“瘀”密切相關(guān)，對(duì)肥胖及高脂血癥的臨床治療，多采用祛瘀化痰之法[11]。魔芋降脂方是由魔芋、荷葉、絞股藍(lán)等復(fù)合而成。魔芋可活血化瘀、解毒消腫、寬腸通便、化痰軟堅(jiān)等，現(xiàn)代研究表明其中含有魔芋葡甘聚糖(konjac glucomannan，KGM)，魔芋KGM能在消化道內(nèi)與膽固醇結(jié)合，阻礙中性脂肪與膽固醇的吸收，有效抑制回腸黏膜對(duì)膽汁酸的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)，吸附膽酸，使膽汁酸的腸肝循環(huán)被部分阻斷，從而降低血脂，增加固類(lèi)醇的排出量，最終消耗體內(nèi)脂肪，達(dá)到減肥的效果，通過(guò)抑制膽固醇的合成和促進(jìn)膽汁酸的排除實(shí)現(xiàn)降低血清中總膽固醇的作用[11]。荷葉能清熱解暑、消水腫、緩解便秘、排水利尿等，研究表明荷葉中主要含有的荷葉黃酮，通過(guò)加強(qiáng)人體結(jié)合膽酸鹽的能力及抑制FAS的活性，達(dá)到降脂作用，其荷葉生物堿通過(guò)抑制胰脂肪酶，達(dá)到減重之效[12]。絞股藍(lán)全草可藥食兼用，具有清熱解毒、補(bǔ)氣、止咳、祛痰的功效，同時(shí)研究表明其具有抑制腫瘤、防止衰老、降低血脂、增強(qiáng)免疫等藥理作用[13]。

本研究通過(guò)對(duì)小鼠的體質(zhì)量及血脂的檢測(cè)，表明喂高脂飼料致肥胖模型建立成功。灌胃魔芋降脂方小鼠體質(zhì)量明顯低于模型組，血脂明顯降低，且在減輕體質(zhì)量的同時(shí)，小鼠的活動(dòng)無(wú)異常，攝食量、進(jìn)水量也未降低。在給藥的三個(gè)劑量組中進(jìn)行體質(zhì)量及血脂的比較，低劑量組與中劑量組及高劑量組之間均存在差異，中劑量組與高劑量組之間差異不顯著。

綜上所述，魔芋降脂方具有減輕體質(zhì)量、降血脂的作用，可以用于未來(lái)天然、高效、安全的減肥降血脂的功能食品的開(kāi)發(fā)利用。