□ 馬莉 楊帆 新疆維吾爾自治區(qū)水產(chǎn)科學(xué)研究所 農(nóng)業(yè)部西北地區(qū)漁業(yè)資源環(huán)境科學(xué)觀測實(shí)驗(yàn)站

能力驗(yàn)證是利用實(shí)驗(yàn)室間比對，按照預(yù)先制定的準(zhǔn)則評(píng)價(jià)參加者的能力［1］。其為判斷和監(jiān)控實(shí)驗(yàn)室能力的有效手段，是實(shí)驗(yàn)室通過外部措施補(bǔ)充其內(nèi)部質(zhì)量控制方法的技術(shù)，也是確保實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系持續(xù)改進(jìn)的有效措施之一［2］。

鉛元素廣泛存在于自然界中，人類會(huì)通過食物鏈攝取鉛，也會(huì)從被污染的空氣中吸入鉛。鉛對神經(jīng)系統(tǒng)的損害主要是能夠引發(fā)末梢神經(jīng)炎，使人出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)和感覺障礙。當(dāng)兒童血液中的鉛含量超過60μg/100mL時(shí)，將會(huì)出現(xiàn)智能發(fā)育障礙和行為異常的癥狀，同時(shí)，鉛對兒童的骨骼生長發(fā)育也會(huì)造成損害。無公害食品及綠色食品的認(rèn)證過程中都將鉛設(shè)為必檢項(xiàng)目：GB 2762-2017《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中污染物限量》中和NY 5073-2006《無公害食品 水產(chǎn)品中有毒有害物質(zhì)限量》中均規(guī)定，水產(chǎn)品中鉛的限量指標(biāo)為≤0.5mg/kg［3-4］；NY/T 842-2012《綠色食品 魚》中規(guī)定水產(chǎn)品中鉛的限量指標(biāo)為≤0.2mg/kg［5］。因此，提高對水產(chǎn)品中鉛的檢測準(zhǔn)確度十分必要，參加能力驗(yàn)證也是反映檢測數(shù)據(jù)是否準(zhǔn)確的一種有效手段。

1 材料與方法

1.1 主要儀器與設(shè)備

原子吸收分光光度計(jì)（賽默飛，CE 3500）；微波消解儀（CEM，MARS 6）；超純水儀(Millipore，Q10)；天平（賽多利斯，BS124S）。

1.2 主要試劑

1000μg/mL鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液（中國計(jì)量科學(xué)研究院，GBW 08619-15073）；硝酸（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，優(yōu)級(jí)純）；過氧化氫（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，分析純）；磷酸二氫銨（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，優(yōu)級(jí)純）。

本次能力驗(yàn)證樣品共2份，各10g左右，且均為肉糜狀鮮樣，分別裝于棕色玻璃瓶中。兩份樣品中，一份為考核樣本，另一份為干擾樣本，能力驗(yàn)證工作要求發(fā)放樣品96小時(shí)內(nèi)報(bào)告測試結(jié)果。2份樣品結(jié)果判定時(shí)，僅評(píng)價(jià)考核樣本的檢測結(jié)果，干擾樣本不作判定。本單位樣品編號(hào)分別為Pb48和 Pb57。

1.3 方法

1.3.1 檢測依據(jù)

采用國標(biāo)方法GB 5009.12-2017《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鉛的測定》第一法，石墨爐原子吸收光譜法進(jìn)行鉛的檢測。

表1 樣品微波消解程序

表2 石墨爐升溫程序

1.3.2 檢測前的準(zhǔn)備工作

所有實(shí)驗(yàn)中使用的玻璃器皿均經(jīng)硝酸溶液（1+4）浸泡過夜，超純水沖洗干凈后晾干備用，注意要充分沖洗，以避免污染，從而降低樣品空白值，提高檢測時(shí)的穩(wěn)定性。試驗(yàn)用水按照GB/T 6682-2008《分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法》的規(guī)定使用一級(jí)水。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確吸取2.50mL濃度為1000μg/mL的鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液置于25.00mL容量瓶中，用1%硝酸溶液稀釋至刻度并搖勻，此時(shí)溶液濃度為100.00μg/mL；再經(jīng)多次稀釋至濃度為20.00μg/L的鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。

1.3.4 樣品前處理

準(zhǔn)確稱取肉糜樣品1.000g，同時(shí)做3個(gè)平行樣，放入聚四氟乙烯消解罐中，加8.00mL硝酸過夜（冷消解）。次日，加入2.00mL硝酸和1.00mL過氧化氫（30%），裝罐后放入微波消解儀中進(jìn)行消解（消解程序見表1）。冷卻后開蓋于150℃的電熱板上繼續(xù)趕酸，至罐內(nèi)液體剩余約0.25mL左右，用超純水定容至10.00mL容量瓶中，混勻待測。同時(shí)做樣品空白對照和標(biāo)準(zhǔn)樣品消解。標(biāo)準(zhǔn)樣品（縊蟶：國家海洋局第一海洋研究所，AK0248）稱樣量為0.150g，做7個(gè)平行樣，消解趕酸后定容至25.00mL容量瓶中。

2 測定與結(jié)果

2.1 上機(jī)測定

主標(biāo)液：20.00μg/L鉛標(biāo)準(zhǔn)工作溶液；稀釋劑：1%硝酸溶液；基體改進(jìn)劑：20g/L磷酸二氫銨溶液；標(biāo)準(zhǔn)品及樣品進(jìn)樣體積：20μL；基體改進(jìn)劑進(jìn)樣體積：5μL。波長：283.3nm；通帶：0.5nm；信號(hào)類型：峰高；背景較正：塞曼。標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制為儀器自動(dòng)稀釋配制，石墨爐升溫程序見表2。

干燥階段分兩步進(jìn)行，選用80℃和100℃進(jìn)行兩步干燥。灰化和原子化階段采用儀器自帶的搜索最佳優(yōu)化條件，選用700℃為灰化溫度，1400℃為原子化溫度。

圖1 工作曲線

2.2 檢測結(jié)果

依照上述方法條件，建立工作曲線方程Abs=0.01427C+0.0060，相關(guān)系數(shù)r=0.9996（見圖1）。對樣品進(jìn)行測定，編號(hào)為Pb48的樣品3平行結(jié)果為17μg/kg，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為6.9%；編號(hào)為Pb57的樣品3平行結(jié)果為54μg/kg，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.9%，結(jié)果見表3；國家標(biāo)準(zhǔn)樣品縊蟶（AK0248）6平行樣品檢測結(jié)果為1.36mg/kg，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.8%，檢測結(jié)果在標(biāo)準(zhǔn)樣品的標(biāo)準(zhǔn)值區(qū)間1.29±0.13mg/kg范圍內(nèi)，見表4。結(jié)果表明，該驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的精密度、準(zhǔn)確度都能達(dá)到國家標(biāo)準(zhǔn)的要求，測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

2.3 能力驗(yàn)證結(jié)果

本次能力驗(yàn)證中，重金屬檢測結(jié)果按Z比分?jǐn)?shù)法統(tǒng)計(jì)，∣Z∣≤3判定為滿意結(jié)果，∣Z∣＞3判定為不滿意結(jié)果，3≥∣Z∣＞2需開展自查。

表3 樣品測定結(jié)果（n=3）

表4 標(biāo)準(zhǔn)樣品測定結(jié)果（n=6）

本單位樣品編號(hào)為Pb57的樣品檢測結(jié)果54μg/kg的∣Z∣為1.75，判定結(jié)果為滿意。編號(hào)為Pb48的樣品為干擾樣品，不做判定。

因此得出結(jié)論，本實(shí)驗(yàn)通過了農(nóng)業(yè)部2018年水產(chǎn)品中鉛的檢測能力驗(yàn)證。

3 檢測注意事項(xiàng)

能力驗(yàn)證樣品與其他常規(guī)樣品差異較大，原因?yàn)槟芰︱?yàn)證樣品的某種成分可能含量較高，故檢測的稱樣量和消解后定容體積往往具有不確定性，所以推薦在正式測定前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。在樣品量足夠的情況下，可先做3個(gè)平行樣，上機(jī)確定樣品大概濃度范圍后再進(jìn)行正式檢測，避免一次性將樣品用完，由于稱樣量以及定容體積不合適，造成檢測結(jié)果有偏差。

鉛廣泛存在于環(huán)境中，檢測時(shí)極易受到污染，因此整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中一定要防止污染，例如化妝品中也可能含有鉛，這就要避免其他人員接觸對樣品檢測造成污染。同時(shí)，所用到的試劑溶液可上機(jī)測試鉛含量，若發(fā)現(xiàn)樣品空白值較高（一般來說，鉛的空白測定吸光度在0.02以下）則應(yīng)考慮實(shí)驗(yàn)用水和試劑是否受到污染。用水最好為實(shí)驗(yàn)室一級(jí)水，所用試劑除要考慮試劑級(jí)別外，不同生產(chǎn)廠家的試劑也具有一定差異，同一廠家不同批次的藥品試劑可能也會(huì)存在差異。

檢測樣品若發(fā)現(xiàn)重現(xiàn)性、平行性不好等情況，在排除樣品處理過程受污染的前提下，可考慮是否是進(jìn)樣問題，此時(shí)可檢查進(jìn)樣針注入位置是否合適；進(jìn)樣結(jié)束，針頭是否有溶液掛壁現(xiàn)象，如有掛壁，則表明實(shí)際進(jìn)樣體積不準(zhǔn)，這關(guān)系到樣品檢測結(jié)果準(zhǔn)確性，因此在檢測過程中，要經(jīng)常注意進(jìn)樣情況。

如測定標(biāo)準(zhǔn)樣品的結(jié)果與實(shí)際值不符，則應(yīng)考慮浸泡容器的酸液是否受到污染。最簡單的檢查方式，即取一只燒杯，加入少許硝酸放在電熱板上加熱至近干，用水沖洗燒杯壁合并洗液定容后上機(jī)測定，若此溶液鉛含量高，則推斷浸泡容器的酸液被污染。

檢測過程所用的標(biāo)準(zhǔn)樣品，最好通過改變稱樣量和定容體積的方法，將溶液測定濃度調(diào)節(jié)至與能力驗(yàn)證樣品濃度相近，這樣更能反映樣品檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。實(shí)驗(yàn)中，可考慮購買不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品，從中選取一種與能力驗(yàn)證樣品濃度接近的標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行同步檢測。

檢測時(shí)，通過改變樣品稱樣量以及定容體積的方式，盡量使樣品的檢測濃度位于標(biāo)準(zhǔn)曲線中段，此時(shí)樣品結(jié)果較為可靠。如樣品檢測濃度靠近標(biāo)準(zhǔn)曲線下端，接近檢出限準(zhǔn)確度不高；如樣品濃度靠近標(biāo)準(zhǔn)曲線上端，吸光度過高時(shí)，樣品檢測濃度可能偏低。

設(shè)定石墨爐程序時(shí)，由于消解后的樣品具有一定的酸度且加入了基體改進(jìn)劑，為避免樣品在干燥階段發(fā)生液體暴沸飛濺，可選取進(jìn)樣溶液沸點(diǎn)附近溫度，將干燥溫度分別設(shè)為兩步，采取緩慢階段升溫和延長保溫時(shí)間的方式保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性?；一瘻囟群驮踊瘻囟茸詈眠M(jìn)行優(yōu)化條件搜索，選取在保證吸光度穩(wěn)定且儀器響應(yīng)信號(hào)值高的溫度，在響應(yīng)值接近的溫度區(qū)間選取較低的溫度，因?yàn)榛一瘻囟群驮踊瘻囟葧?huì)直接影響石墨管的使用壽命。

4 小結(jié)

本次能力驗(yàn)證采用國標(biāo)方法GB 5009.12-2017《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鉛的測定》進(jìn)行測定，采用方法包括石墨爐原子吸收光譜法、電感耦合等離子體質(zhì)譜法、火焰原子吸收光譜法和二硫腙比色法4種檢測方法［6］。本單位采用石墨爐原子吸收光譜法進(jìn)行水產(chǎn)品中鉛的檢測，用標(biāo)準(zhǔn)樣品同步實(shí)驗(yàn)作為實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制手段，在能力驗(yàn)證舉辦方發(fā)放樣品的96小時(shí)內(nèi)按時(shí)提交了檢測結(jié)果并獲得滿意評(píng)定結(jié)果。這表明，用此方法進(jìn)行鉛的檢測，數(shù)據(jù)可靠有效。

通過參加能力驗(yàn)證活動(dòng)，有利于實(shí)驗(yàn)室實(shí)現(xiàn)自我評(píng)定，是實(shí)驗(yàn)室檢測質(zhì)量的反映。參加能力驗(yàn)證獲得通過，是增強(qiáng)用戶對實(shí)驗(yàn)室檢測能力信任度的一個(gè)有力證明，同時(shí)增強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)室對所出具數(shù)據(jù)的自信心。