李啟東

佛山市禪城區(qū)中心醫(yī)院設(shè)備科 （廣東佛山 528000）

隨著醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展，Sysmex CA7000全自動(dòng)血凝分析系統(tǒng)的應(yīng)用，使得凝血和血栓項(xiàng)目檢查變得簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確，其在臨床實(shí)驗(yàn)室中主要用于執(zhí)行凝血試驗(yàn)，進(jìn)行體外診斷，能快速并高精度地分析大量樣本[1-2]。Sysmex CA7000主要利用凝固法[3]、顯色法[4]及免疫法[5]來(lái)分析樣本。在日常使用中由各種原因?qū)е碌慕Y(jié)果報(bào)錯(cuò)較為常見(jiàn)，熟悉該設(shè)備的分析流程并以此為故障排除線索，能有效提高故障排除效率?，F(xiàn)介紹Sysmex CA7000全自動(dòng)血凝分析儀檢測(cè)原理及技術(shù)故障維修方法。

1 設(shè)備的檢測(cè)原理和方法

Sysmex CA7000全自動(dòng)血凝分析儀主要由3支樣本針、5支試劑針、3個(gè)抓手、2個(gè)檢測(cè)單元等重要部件組成，見(jiàn)圖1。

圖1 Sysmex CA7000全自動(dòng)血凝分析儀主要部件

Sysmex CA7000全自動(dòng)血凝分析儀有凝固法、發(fā)色底物法、免疫比濁法3種檢測(cè)方法。

1.1 凝固法

用660 nm光電二極管檢測(cè)散射光強(qiáng)度的變化，并使用百分比方式的檢測(cè)原理，測(cè)定項(xiàng)目包括血漿凝血酶原時(shí)間（PT）、活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）、纖維蛋白原（FIB）、凝血酶時(shí)間（TT）、內(nèi)外源凝血因子等。

1.2 發(fā)色底物法

通過(guò)測(cè)定產(chǎn)色物質(zhì)的吸光度變化，推算待測(cè)物的含量，此方法以酶學(xué)方法為基礎(chǔ)。測(cè)定項(xiàng)目包括抗凝血酶Ⅲ（ATⅢ）、纖溶酶原（Plg）、纖溶酶原激活物抑制物（PAI）、肝素（Heparin）、凝血綜合指數(shù)CI（CI-inhibitor）、血漿蛋白C（PC）、凝血因子ⅩⅢ（FⅩⅢ）等。

1.3 免疫比濁法

以被檢物作為抗原，制備相應(yīng)的多克隆抗體，利用抗原抗體的特異結(jié)合反應(yīng)對(duì)被檢物進(jìn)行定性和定量檢測(cè)，測(cè)定其中抗原抗體反應(yīng)形成的免疫復(fù)合物吸光度，在一定范圍內(nèi)，其吸光度與復(fù)合物量正相關(guān)，因此當(dāng)抗體量固定時(shí)，根據(jù)復(fù)合物的吸光度值，即可推算出待測(cè)抗原含量，測(cè)定項(xiàng)目包括D-二聚體（D-dimer）、纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物（FDP）、血管性血友病因子抗原（vWF-Ag）等。

Sysmex CA7000全自動(dòng)血凝分析儀的分析機(jī)制見(jiàn)圖2。

2 故障維修

現(xiàn)將Sysmex CA7000全自動(dòng)血凝分析儀日常使用過(guò)程中在微量模式下出現(xiàn)在結(jié)果方面的故障和檢修過(guò)程介紹如下，以供參考。

2.1 故障一

2.1.1 故障現(xiàn)象

PT和APTT偶爾測(cè)不出結(jié)果。

圖2 Sysmex CA7000全自動(dòng)血凝分析儀分析機(jī)制

2.1.2 故障排查

PT分析流程見(jiàn)圖3，APTT分析流程見(jiàn)圖4。首先檢查結(jié)果有無(wú)報(bào)錯(cuò)信息，發(fā)現(xiàn)無(wú)報(bào)警，再依據(jù)圖3與圖4按照?qǐng)D2的分析機(jī)制跟蹤設(shè)備各個(gè)動(dòng)作。發(fā)現(xiàn)檢測(cè)部有杯子遺留，檢測(cè)抓手和廢杯抓手位置偏差很多。

圖3 PT分析流程

圖4 APTT分析流程

2.1.3 故障處理

對(duì)于試劑加液位置偏離，調(diào)整其機(jī)械位置，依次點(diǎn)擊“Service” →“Mecha. Position” →“Detection Catcher”調(diào)整檢測(cè)抓手加液位置，調(diào)整相關(guān)試劑針B1和B2針位置后加PT和APTT試劑正常；對(duì)于廢杯殘留，依次點(diǎn)擊“Service”→“Mecha. Position”→“Detection Catcher”調(diào)整廢杯抓手抓杯位置，可根據(jù)情況調(diào)整X、Y、Z位置，調(diào)整完位置，跟測(cè)50個(gè)標(biāo)本正常，該故障由檢測(cè)部抓手和廢杯抓手位置異常引起，該部件在日常使用中應(yīng)定時(shí)維護(hù)，如調(diào)整位置和緊固零部件等。

2.2 故障二

2.2.1 故障現(xiàn)象

TT結(jié)果打“*”號(hào)，且有些長(zhǎng)于23 s無(wú)星號(hào)但在其他凝血儀上正常。

2.2.2 故障排查

由于在其他凝血儀上測(cè)TT正常，可排除標(biāo)本狀態(tài)的影響；查看數(shù)據(jù)儲(chǔ)存列表Stored data，檢查打“*”結(jié)果，顯示“ERR008”，即Coagulation Curve Error凝血曲線錯(cuò)誤。詢問(wèn)廠家工程師及查看報(bào)警信息得出原因：（1）區(qū)域坡度下降；（2）區(qū)域坡度太陡；（3）冷緩沖液產(chǎn)生氣泡。根據(jù)維修手冊(cè)提示，影響TT結(jié)果最大的因素是Reagent volume試劑量。若試劑所加量不足或失效，會(huì)造成原因（1）；若試劑量過(guò)多，會(huì)造成原因（2）；若在FIB項(xiàng)目中冷緩沖液引起的氣泡會(huì)使FIB的凝血時(shí)間延長(zhǎng)，所以暫忽略該原因。

2.2.3 故障處理

重新配制凝血活酶含鈣試劑，放置室溫10 min后上機(jī)，做TT質(zhì)控正常，挑出“*”號(hào)標(biāo)本復(fù)查，仍有個(gè)別標(biāo)本會(huì)有“*”號(hào)。懷疑對(duì)應(yīng)試劑針B存在堵塞，拆出試劑針B進(jìn)行通針，重新安裝試劑針B后，再進(jìn)入Rinse&Prepare程序用次氯酸鈉、清潔液Clean I灌沖、浸泡管道多次，最后用大量蒸餾水反復(fù)沖洗管道。復(fù)查標(biāo)本，“*”號(hào)結(jié)果減少；最后檢查檢測(cè)部及光源，清潔檢測(cè)部及進(jìn)行光源校準(zhǔn)后做質(zhì)控正常，復(fù)查標(biāo)本TT未打“*”號(hào)，跟測(cè)50個(gè)標(biāo)本正常，該次故障由試劑、試劑針及檢測(cè)部原因引起。

2.3 故障三

2.3.1 故障現(xiàn)象

FIB重復(fù)性CV=7%，正常FIB重復(fù)性CV≤4%。

2.3.2 故障排查

該重復(fù)性檢測(cè)即為批內(nèi)不精密度檢測(cè)，根據(jù)要求，取混合血漿重復(fù)測(cè)定至少5次，計(jì)算CV值和SD（樣本標(biāo)準(zhǔn)差）值，根據(jù)圖2分析機(jī)制，重復(fù)性差多由不穩(wěn)定因素引起，如試劑的環(huán)境不穩(wěn)定，質(zhì)控液的因素等。首先檢查環(huán)境因素：檢查試劑無(wú)問(wèn)題，設(shè)備各器件溫度正常，質(zhì)控液無(wú)凝塊等，當(dāng)天質(zhì)控正常，現(xiàn)場(chǎng)做質(zhì)控發(fā)現(xiàn)試劑針B3針存在掛珠現(xiàn)象；相關(guān)試劑針部分管路見(jiàn)圖5，相關(guān)閥件單元（正對(duì)設(shè)備右側(cè)）見(jiàn)圖6。

圖5 試劑針B3相關(guān)部分管路

圖6 Sysmex CA7000全自動(dòng)血凝分析儀閥件單元（正對(duì)設(shè)備右側(cè)）

檢查發(fā)現(xiàn)試劑針B3針對(duì)應(yīng)注射器Reagent Syringe B2底部螺釘較松（對(duì)應(yīng)位置如圖6中Syringe for reagent arm B2），上緊后做試驗(yàn)故障依舊，拆開注射器觀察到里面O形圈存在腐蝕現(xiàn)象，更換O形圈后掛珠現(xiàn)象有所好轉(zhuǎn)，但是仍影響結(jié)果，根據(jù)管路清潔11號(hào)電磁閥，發(fā)現(xiàn)電磁閥芯內(nèi)有污垢，清理后無(wú)掛珠現(xiàn)象，做質(zhì)控正常，跟測(cè)標(biāo)本FIB重復(fù)性良好。

2.4 故障四

2.4.1 故障現(xiàn)象

D-dimer超過(guò)上限自動(dòng)稀釋結(jié)果不好，但手工稀釋結(jié)果可以，自動(dòng)稀釋與手工稀釋結(jié)果相差大。

2.4.2 故障排查

有一個(gè)標(biāo)本D-dimer自動(dòng)復(fù)查結(jié)果0.007，手動(dòng)選1/8稀釋結(jié)果65左右?，F(xiàn)場(chǎng)翻看結(jié)果記錄，共有3～4個(gè)標(biāo)本出現(xiàn)第1次測(cè)超范圍不出結(jié)果，第2次自動(dòng)復(fù)查的doD值比較低（0.0001～0.0007）。也有十幾個(gè)第1次結(jié)果報(bào)“ERR416 Range Over”，自動(dòng)復(fù)查結(jié)果零點(diǎn)多。而且有一個(gè)標(biāo)本，自動(dòng)復(fù)查，機(jī)內(nèi)1/8稀釋，手工1/8稀釋，1/2稀釋結(jié)果均相差不大，懷疑該標(biāo)本由干擾導(dǎo)致。此外，因有些自動(dòng)復(fù)查與機(jī)內(nèi)1/8稀釋結(jié)果偏差大的標(biāo)本被收走，無(wú)法做試驗(yàn)。查看故障信息ERR416 Range Over提示存在過(guò)量抗原，建議稀釋標(biāo)本重新復(fù)查。

2.4.3 故障處理

拆濾光輪清潔，清潔檢測(cè)孔，重新校準(zhǔn)燈泡通過(guò)，觀察各加樣針加樣未發(fā)現(xiàn)有漏液或者混勻電動(dòng)機(jī)問(wèn)題，微調(diào)樣本A針位置，分別觀察自動(dòng)稀釋和機(jī)內(nèi)1/8稀釋都是由樣本A針進(jìn)行標(biāo)本預(yù)稀釋，再由樣本B針?lè)峙?。?duì)新出現(xiàn)的DDi標(biāo)本報(bào)錯(cuò)，做試驗(yàn)得出，自動(dòng)稀釋仍超范圍，手動(dòng)機(jī)內(nèi)稀釋正常，廠家建議關(guān)閉自動(dòng)復(fù)查功能并升級(jí)系統(tǒng)，最后升級(jí)系統(tǒng)后跟測(cè)標(biāo)本，自動(dòng)稀釋檢測(cè)，或加大稀釋比例再檢，結(jié)果均在線性內(nèi)，可發(fā)結(jié)果，此故障為系統(tǒng)版本過(guò)低導(dǎo)致，升級(jí)后正常使用。

2.5 故障五

2.5.1 故障現(xiàn)象

在擁有健康體魄的基礎(chǔ)上，應(yīng)對(duì)兒童進(jìn)行各種訓(xùn)練，使其適應(yīng)抗戰(zhàn)建國(guó)的需要。1938年，賴學(xué)文和林仲愷都強(qiáng)調(diào)對(duì)兒童進(jìn)行精神訓(xùn)練、體魄訓(xùn)練、技能訓(xùn)練、生活訓(xùn)練、知識(shí)訓(xùn)練等。其中，精神訓(xùn)練是培養(yǎng)兒童以愛(ài)護(hù)民族國(guó)家為重，培養(yǎng)其愛(ài)國(guó)觀念，啟發(fā)其民族意識(shí)；體魄訓(xùn)練以體育鍛煉為主，培養(yǎng)兒童身強(qiáng)體健，精神煥發(fā)；技能訓(xùn)練主要是讓兒童熟練應(yīng)付抗戰(zhàn)時(shí)期的基本技能，比如防毒、消防、救護(hù)、宣傳、偵查等等；生活訓(xùn)練是培養(yǎng)兒童在生活中形成守紀(jì)律、尚禮貌、吃苦耐勞、互相合作的品德；知識(shí)訓(xùn)練是給兒童灌輸戰(zhàn)時(shí)知識(shí)，明了國(guó)內(nèi)的形勢(shì)、抗戰(zhàn)的局勢(shì)，認(rèn)識(shí)國(guó)際關(guān)系以及國(guó)際現(xiàn)狀等［18］。

有些項(xiàng)目部分結(jié)果打“*”報(bào)Error 032。

2.5.2 故障排查

Error 032主要表示未檢測(cè)出血凝；觀察整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程，發(fā)現(xiàn)打“*”的標(biāo)本廢杯標(biāo)本量比正常少，觀察試劑針加試劑正常，有些標(biāo)本不能加樣。

2.5.3 故障處理

進(jìn)入維修模式，調(diào)節(jié)樣本針A、B、C位置，發(fā)現(xiàn)樣本針B已被撞歪，檢查發(fā)現(xiàn)樣本針B、C下蓋板安裝不良，重新安裝蓋板，然后拆下樣本針B，將其小心掰直，然后再調(diào)整樣本針B、C位置，跟測(cè)標(biāo)本無(wú)發(fā)現(xiàn)異常打“*”結(jié)果。

3 總結(jié)

通過(guò)對(duì)Sysmex CA7000全自動(dòng)血凝分析儀的維修以及結(jié)合設(shè)備的分析機(jī)制可得，對(duì)于凝血設(shè)備出現(xiàn)結(jié)果不好或報(bào)故障，可以從3個(gè)方面考慮。

3.1 標(biāo)本問(wèn)題

檢查標(biāo)本是否有黃疸、溶血、脂血等問(wèn)題，聯(lián)系臨床判斷，如果大批量出現(xiàn)結(jié)果不好，而質(zhì)控良好，可以考慮抗凝管方面的問(wèn)題。

3.2 試劑問(wèn)題

根據(jù)各個(gè)項(xiàng)目不同，考慮到所用到的每個(gè)試劑，特別是一些項(xiàng)目有用到兩種以上的試劑，如FIB的OVB緩沖液、APTT的氯化鈣會(huì)影響結(jié)果，如果質(zhì)控都有問(wèn)題，可以考慮蒸餾水和試劑配制用水的質(zhì)量，通常更換所涉及的試劑即可排查。

3.3 設(shè)備問(wèn)題

3.3.1 加樣問(wèn)題

觀察加樣過(guò)程，判斷是否存在加不到標(biāo)本或者加樣量不夠的情況，檢查各部件，如注射器、加樣針和管路的密封性、通暢性，相連電磁閥的密封性。

3.3.2 加試劑問(wèn)題

觀察加試劑過(guò)程，判斷是否存在加不到試劑或者加樣量不夠的情況，檢查各部件，如注射器、加樣針和管路的密封性、通暢性，相連電磁閥的密封性。檢查混勻電動(dòng)機(jī)，試劑和標(biāo)本未能混勻會(huì)對(duì)結(jié)果造成極大的影響。

3.3.3 檢測(cè)問(wèn)題

在加樣和加試劑方面均無(wú)問(wèn)題時(shí)再考慮檢測(cè)部分，觀察標(biāo)本結(jié)果，反應(yīng)曲線、反應(yīng)溫度、檢測(cè)孔、光本底和光通量；必要時(shí)做光源定標(biāo)；必須保持檢查孔清潔；同時(shí)定時(shí)做光源校準(zhǔn)，必要時(shí)更換光源。