王麗瓊,林少華,陳存坤,張慧杰,羅紅霞,*,許文濤
(1.北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院食品與生物工程系,北京102442;2.國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品保鮮工程技術(shù)研究中心(天津),農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津市農(nóng)產(chǎn)品采后生理與貯藏保鮮重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津300384;3.天津科技大學(xué)食品工程與生物技術(shù)學(xué)院食品營(yíng)養(yǎng)與安全省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津300457;4.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院,食品營(yíng)養(yǎng)與人類健康高精尖創(chuàng)新中心,北京100083)
香椿(Toona sinensis)又名香椿芽,屬楝科,香椿屬,落葉喬木,原產(chǎn)于中國(guó)的中部及南部,現(xiàn)廣泛栽植在華北、華東以及中部、南部等地區(qū)。香椿不但香味濃郁,而且具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,含有豐富的蛋白質(zhì)、維生素和礦物質(zhì)[1],以及多酚類物質(zhì)、黃酮、多糖、皂苷、生物堿等生物活性成分[2],具有防治高血壓、抗炎、鎮(zhèn)痛、降血糖、抗癌、抗氧化等作用保健功能[3]。香椿適合貯藏的溫度是(1±0.5)℃,濕度為(90±5)%,但采摘后的香椿水分含量高,常溫條件下蒸騰作用強(qiáng),短時(shí)間內(nèi)就會(huì)枯萎、掉葉、甚至腐爛。雖然鮑琳等[4]用多菌靈、乙烯吸收劑等不同處理進(jìn)行香椿保鮮試驗(yàn),朱苗等[5]采用聚乙烯、聚氯乙烯、聚偏二氯乙烯3 種保鮮膜對(duì)香椿進(jìn)行保鮮探討,朱永清等[6]用不同密度的聚乙烯和不同厚度的包裝材料對(duì)香椿進(jìn)行自發(fā)氣調(diào)來(lái)研究不同的貯藏保鮮效果。水江波等[7]則探討了適合香椿保鮮的適宜溫度、濕度。但是已有的研究仍難以滿足消費(fèi)者的需求,因此,仍需繼續(xù)尋找更適合香椿貯藏保鮮的方法和技術(shù)。
近年來(lái),紫外照射(ultraviolet irradiation,ZW)、1-甲基環(huán)丙烯(1-methylcyclopropene,1-MCP)和乙烯吸收劑(ethylene absorbent,EA)等保鮮方法可以延緩果蔬采后衰老的研究多見(jiàn)于報(bào)道。如保鮮膜結(jié)合紫外光處理的龍眼、鮮切蘋(píng)果、韭菜與對(duì)照相比可延緩可溶性固形物和VC的降解,抑制丙二醛和多酚氧化酶的增長(zhǎng),保鮮效果明顯[8-10]。保鮮膜結(jié)合1-MCP 處理的獼猴桃、富士蘋(píng)果有效延緩了果實(shí)硬度、果實(shí)營(yíng)養(yǎng)成分的下降,延長(zhǎng)了果實(shí)貯藏期和貨架期[11-12]。保鮮膜結(jié)合乙烯吸收劑處理的麗江雪桃、德國(guó)小香蔥對(duì)降低貯藏中呼吸強(qiáng)度、失重率、褐變指數(shù)、腐爛指數(shù)都有一定的效果,有利于果蔬商品價(jià)值的保持[13-14]。然而,關(guān)于紫外光、1-MCP 和乙烯吸收劑這3 種保鮮處理方法在香椿上的應(yīng)用研究還未見(jiàn)報(bào)道。因此,本試驗(yàn)重點(diǎn)研究和比較了紫外光、1-MCP 和EA3 種保鮮處理方法對(duì)香椿貯藏期間的品質(zhì)變化,尋找出更適合香椿保鮮效果的方法,為香椿的貯藏保鮮提供理論依據(jù)。
香椿:北京市門(mén)頭溝區(qū)雁翅鎮(zhèn)葦子水村采摘,品種為紅香椿;1-甲基環(huán)丙烯(1-methylcyclopropene,1-MCP):陜西咸陽(yáng)西秦生物公司,每袋凈含量0.3 g;乙烯吸收劑(ethylene absorbent,EA):山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院,每袋凈含量8 g,有效成分為高錳酸鉀(質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥10%);聚氯乙烯(polyvinyl chloride,PVC)膜:國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品保鮮工程技術(shù)研究中心,厚度0.01 mm,伸長(zhǎng)率365.525%,抗張強(qiáng)度13.005 MPa,透氣性1 213.27 cm3/(2 h·0.1 MPa),透濕率61.82 g/(m2·1.8)。
TU-1810 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì):北京普析通用儀器有限責(zé)任公司;3-30K 高速冷凍離心機(jī):德國(guó)sigma公司;FA-004 型電子天平:上海精科天平有限公司;DK-S26 型電熱恒溫水浴鍋:上海精宏試驗(yàn)設(shè)備有限公司;CNX-103 便攜式乙烯測(cè)定儀:北京金洋萬(wàn)達(dá)科技有限公司;GC7890F 氣相色譜儀:上海天美科學(xué)儀器有限公司;冷庫(kù):國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品保鮮工程技術(shù)研究中心(天津)。
1.3.1 樣品處理
香椿采摘于2018年4月26日,挑選新鮮、無(wú)霉?fàn)€、無(wú)病蟲(chóng)害、色澤較好,芽長(zhǎng)為15 cm~20 cm 的呈紫紅色的香椿芽。將整理好的香椿芽隨機(jī)分為5 組,每組質(zhì)量為400 g,分別進(jìn)行如下處理:
1)對(duì)照組(CK 組),不做任何保鮮處理;2)聚氯乙烯組(PVC 組),選用 0.01 mm 厚度的 PVC 膜包裹;3)聚氯乙烯+紫外照射組(PVC+ZW 組),在PVC 膜包裹的條件下,每隔10 d 紫外照射1 次,燈管功率為40W,強(qiáng)度為 375 μW/cm2,時(shí)間為 10 min;4)聚氯乙烯+1-甲基環(huán)丙烯組(PVC+1-MCP 組),在PVC 膜包裹的條件下,加入1 包1-MCP;5)聚氯乙烯+乙烯吸收劑組(PVC+EA 組),在PVC 膜包裹的條件下,加入1 包EA。所有處理組均置于溫度為(1±0.5)℃,濕度為(90±5)%的冷庫(kù)中貯藏,設(shè)置3 次重復(fù),取樣時(shí)間分別為0、10、20 d 和 30 d。
1.3.2 指標(biāo)檢測(cè)及方法
1)呼吸強(qiáng)度的測(cè)定:采用靜置法進(jìn)行測(cè)定,隨機(jī)稱取70 g 香椿置于經(jīng)空氣平衡的5 L 密封瓶中,密閉2 h后,用一次性注射器從密封瓶頂部抽取1.0mL氣體,然后用氣相色譜法測(cè)定CO2含量,呼吸強(qiáng)度以CO2釋放量表示,單位為mg CO2/(kg·h)。
氣相色譜檢測(cè)條件:載氣N2,進(jìn)樣溫度120 ℃,柱溫 60 ℃,CO2檢測(cè)溫度 360 ℃,氫氣氣流 80 mL/min。
2)乙烯釋放速率的測(cè)定:使用CNX-103 便攜式乙烯測(cè)定儀測(cè)定,乙烯濃度的單位為μL/(kg·h)。
3)失重率的測(cè)定:采用稱重法進(jìn)行測(cè)定,計(jì)算公式為:失重率/%=(貯前香椿質(zhì)量-貯后香椿質(zhì)量)/貯前香椿質(zhì)量×100。
4)葉綠素的測(cè)定:根據(jù)曹建康的分光光度法進(jìn)行測(cè)定[15]。
5)維生素 C(VC)的測(cè)定:采用 2,6-二氯靛酚滴定法進(jìn)行測(cè)定[16]。
6)丙二醛(malondialdehyde,MDA)的測(cè)定:采用硫代巴比妥酸法進(jìn)行測(cè)定[17]。
7)色差的測(cè)定:采用色差計(jì)測(cè)定不同處理的香椿在不同貯藏時(shí)間的顏色變化。每個(gè)處理取香椿葉的中部進(jìn)行測(cè)定,取平均值,得到色差的L*(亮度)、a*(紅度)、b*(黃度)值,并根據(jù)a*、b*值計(jì)算色調(diào)角(H0),計(jì)算公式為H0=tan-1b*/a*。
8)酶活的測(cè)定:多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)、過(guò)氧化酶(peroxidase,POD)、過(guò)氧化氫酶(fungal catalase,CAT)和超氧化酶(superoxide dismutase,SOD)的測(cè)定根據(jù)Solarbio@ 活性檢測(cè)試劑盒的說(shuō)明進(jìn)行檢測(cè),試劑盒型號(hào)分別為 BC0195、BC205、BC0205和BC0175。
1.3.3 數(shù)據(jù)分析
采用Excel 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和繪圖,取3 次重復(fù)平均值,并用SPSS20.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)顯著性分析。
不同處理對(duì)香椿失重率和色差的影響見(jiàn)圖1。
圖1 不同處理對(duì)香椿失重率和色差的影響Fig.1 Effects of different treatments on weight loss and color difference of Toona sinensis
失重率是評(píng)價(jià)蔬菜質(zhì)量的關(guān)鍵感官指標(biāo)之一。由圖1A 可以看出,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),5 組處理中的香椿失重率均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。對(duì)照處理(control treatment,CK)失重率最高在10 d 時(shí)已超過(guò)20%。其次為PVC 組,在貯藏30 d 后失重率為12.55%,另外兩組均超過(guò)8%,而PVC+ZW 組失重率最低為6.55%,顯著低于其它 4 組(P < 0.05)。PVC 包裝膜可以降低蔬菜的蒸騰作用,從而延緩其水分的流失[18],從本研究結(jié)果可以判斷紫外照射可以進(jìn)一步降低這種作用。此外,Giuggioli 等[19]認(rèn)為新鮮產(chǎn)品失重率超過(guò)8%即會(huì)影響其適銷性,因此PVC+ZW 組處理的香椿仍能滿足市場(chǎng)的要求,但也接近臨界值,而其它4 組則不再符合市場(chǎng)的要求。
色澤是評(píng)價(jià)蔬菜品質(zhì)的另一個(gè)非常重要的因素,顏色的變化都可能被認(rèn)為是蔬菜衰老的表征。隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),5 個(gè)處理中香椿亮度均緩慢下降(圖1B),而且顏色均由紫紅色最終變?yōu)榫G色(圖1C)。通過(guò)對(duì)L*和H0值進(jìn)行差異性分析表明,貯藏30 d 時(shí),PVC+ZW 組處理的香椿與 CK、PVC 和 PVC+EA 組差異顯著(P < 0.05),但與 PVC+1-MCP 處理組差異不顯著。這說(shuō)明紫外照射不但不會(huì)對(duì)香椿的顏色產(chǎn)生負(fù)面影響,而且還可以延緩其顏色的變化。該結(jié)果與Sari等[20]的研究結(jié)果類似,他們發(fā)現(xiàn)紫外照射的菠蘿皮和肉的顏色均不會(huì)發(fā)生顯著的變化。
不同處理對(duì)香椿呼吸強(qiáng)度和乙烯釋放速率的影響見(jiàn)圖2。
圖2 不同處理對(duì)香椿呼吸強(qiáng)度和乙烯釋放速率的影響Fig.2 Effects of different treatments on respiration rate and ethylene release rate of Toona sinensis
果蔬呼吸強(qiáng)度越高,其營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗就越大,果蔬貯藏的時(shí)間就越短。由圖2 A 可以看出,除了CK組,其它4 組的呼吸速率均先下降后上升。到了30 d時(shí),PVC+ ZW 組與 PVC 和 PVC+EA 組差異極顯著(P<0.01),但與PVC+1-MCP 組差異不顯著。說(shuō)明紫外照射可以有效地降低香椿的呼吸速率,具體原因可能是由于紫外照射產(chǎn)生的臭氧延緩了組織代謝,并關(guān)閉了氣孔[21]。
乙烯是一種植物內(nèi)源激素,能促進(jìn)果蔬成熟,加快其衰老。由圖2 B 可看出,乙烯釋放速率與呼吸速率相似,在初期下降后期上升。這可能是由于香椿由常溫經(jīng)過(guò)預(yù)冷后,再進(jìn)行冰溫貯藏,較低的溫度有效地抑制了香椿乙烯的釋放速率,但是隨著其新陳代謝的加速,乙烯的釋放速率進(jìn)一步加速。在貯藏后期,PVC+ ZW 組與 PVC 組差異極顯著(P<0.01)和 PVC+EA 組差異顯著(P<0.05),但與 PVC+1-MCP 組差異不顯著。紫外照射抑制乙烯的機(jī)理仍未可知,需深入研究和分析。
不同處理對(duì)香椿葉綠素、VC和MDA 的影響見(jiàn)圖3。
圖3 不同處理對(duì)香椿葉綠素、VC和MDA 的影響Fig.3 Effects of different treatments on the content of Chlorophyll,VCand MDA of Toona sinensis
香椿嫩芽采摘時(shí)為紫紅色,色彩鮮艷,但仍會(huì)繼續(xù)發(fā)生新陳代謝而逐漸成熟衰老,紫紅色逐漸變淺,綠色逐漸加深。由圖3A 可見(jiàn),隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),5 個(gè)處理組中香椿葉綠素的含量均緩慢提高,金波等的研究也證實(shí)椿芽生長(zhǎng)過(guò)程中的色澤隨花青素、葉綠素含量的交互變化而改變[22]。截止到30 d 時(shí),PVC+ZW組的葉綠素含量與PVC+EA 和PVC+1-MCP 組差異不顯著,但與PVC 組差異顯著(P<0.05)。通過(guò)計(jì)算H0與葉綠素的相關(guān)系數(shù)得知,這4 組的差異較小,表明紫外照射并不主要通過(guò)改變?nèi)~綠素的含量而延緩香椿顏色的變化。另一方面,由于貯藏過(guò)程中香椿水分蒸發(fā),因而測(cè)出的香椿中葉綠素的含量也會(huì)緩慢提高。通過(guò)計(jì)算葉綠素與失重率的相關(guān)系數(shù)得知,PVC(0.997)>PVC+EA(0.996)>PVC+1-MCP(0.984)>PVC+ZW(0.942),說(shuō)明紫外照射處理可以降低葉綠素與失重率的相關(guān)性,即可降低失重率對(duì)葉綠素的影響。
VC是衡量果蔬品質(zhì)的一個(gè)重要指標(biāo)。由圖3B 可看出,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),5 個(gè)處理中的VC含量出現(xiàn)了先升高又緩慢下降的趨勢(shì),可能由于采摘的是頭茬香椿幼苗,尚處在發(fā)育和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)積累中,因而出現(xiàn)了貯藏前期VC升高的現(xiàn)象。在貯藏后期,隨著營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不斷消耗,VC的含量也在不斷地降低。因此,VC含量在貯藏過(guò)程的變化與香椿的成熟和衰老程度有關(guān)。紫外照射處理的香椿的VC含量最低,下降的速度也最快,在30 d 時(shí)的含量與PVC 組差異不顯著,但與PVC+1-MCP 組和 PVC+EA 組差異極顯著(P<0.01)。這可能是由于紫外照射產(chǎn)生的臭氧具有強(qiáng)氧化性,能夠與VC發(fā)生反應(yīng)導(dǎo)致的。Maharaj 等[23]的研究也進(jìn)一步證實(shí)了這種現(xiàn)象,他們對(duì)比了紫外照射番茄后發(fā)現(xiàn)高劑量組的VC含量較對(duì)照及低劑量組的VC含量低。
紫外產(chǎn)生的氧化性也通過(guò)MDA 這個(gè)指標(biāo)反應(yīng)出來(lái)。由圖3 C 可見(jiàn),PVC+ZW 處理的 MDA 含量最高,與PVC 組差異不顯著,但與PVC+1-MCP 組和PVC+EA組差異極顯著(P<0.01)。
不同處理對(duì)香椿酶活的影響見(jiàn)圖4。
圖4 不同處理對(duì)香椿酶活的影響Fig.4 Effects of different treatments on the enzyme activity of Toona sinensis
果蔬的褐變與PPO 酶有著密切的關(guān)系,PPO 可以催化多酚類底物生產(chǎn)醌類物質(zhì),產(chǎn)生棕色聚合物導(dǎo)致組織褐變,從而降低果蔬的品質(zhì)和市場(chǎng)價(jià)值。PPO 酶活力越高,酚類物質(zhì)氧化的速率就越快,褐變的速度就越快。由圖4A 可知,5 個(gè)處理組的香椿中PPO 的酶活性隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)均先上升在第20 天后開(kāi)始下降。這可能一是因?yàn)殡S著香椿中多酚逐漸被氧化,多酚氧化酶催化的反應(yīng)底物減少,而產(chǎn)物醌類物質(zhì)含量增高,從而導(dǎo)致多酚氧化酶的活性下降[24]。到第30天后,PVC+ZW 組的PPO 酶活力最低,并極顯著低于PVC 組和 PVC+EA 組,但與 PVC+1-MCP 組差異不顯著。從 H0 與 PPO 酶的相關(guān)系數(shù):PVC(0.804)> PVC+EA(0.724)> PVC+1-MCP(0.698)> PVC+ZW(0.691)也可得出以上結(jié)論。
果蔬采摘后的新陳代謝會(huì)產(chǎn)生活性氧,如超氧化物自由基、過(guò)氧化氫和羥基自由基,這些活性氧與細(xì)胞膜損傷和衰老有關(guān)[25]。POD、CAT 和SOD 等解毒酶可以催化這些產(chǎn)生毒性的自由基。從圖4B、4C 和4D 可以看出,PVC+ZW 處理的 POD、CAT 和 SOD 酶的活力均高于其它組。POD 酶在貯藏期間一直呈上升狀態(tài),而SOD 酶的趨勢(shì)正好相反。在貯藏到30 d 時(shí),PVC+ZW 處理的 POD 和 SOD 酶均與 PVC 組、PVC+1-MCP組及 PVC+EA 組差異顯著(P<0.05)。CAT 酶的變化趨勢(shì)與PPO 酶的趨勢(shì)相似,在貯藏到最后,PVC+ZW 組與PVC+1-MCP 組差異不顯著,但與PVC 組及PVC+EA 組差異顯著(P<0.05)。目前,關(guān)于紫外照射如何影響香椿酶活的變化機(jī)理仍未見(jiàn)報(bào)道,還需進(jìn)一步研究和分析。
香椿作為一種應(yīng)季蔬菜,具有很強(qiáng)的季節(jié)性,而且不易貯藏,難以滿足市場(chǎng)的需求。本試驗(yàn)通過(guò)比較分析了紫外照射、1-MCP 和乙烯吸附劑結(jié)合PVC 膜3種不同的保鮮處理方法對(duì)香椿貯藏品質(zhì)變化的影響。這種品質(zhì)的變化是多種理化指標(biāo)和酶活指標(biāo)共同作用的結(jié)果。結(jié)果表明,PVC+ZW 處理組的感官指標(biāo)效果最好,在不損傷香椿顏色的情況下,能有效地延緩香椿的失重率的下降,其次為PVC+1-MCP 組。下一步仍需要對(duì)紫外照射的強(qiáng)度和時(shí)間進(jìn)行優(yōu)化,以尋找更優(yōu)的保鮮組合。