張佳，聶繼云，張惠，李靜，李也

（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部果品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室（興城）/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部果品及苗木質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（興城），遼寧興城 125100）

0 引言

【研究意義】越橘（VacciniumL.）營(yíng)養(yǎng)豐富，含有花青苷、黃酮類等多種具有抗氧化生理活性的物質(zhì)，被世界糧農(nóng)組織推薦為五大健康水果之一，有“漿果之王”的美譽(yù)[1]。越橘在中國(guó)自2000年產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)以來(lái)，經(jīng)過(guò)十余年的快速發(fā)展，至2017年，種植面積達(dá)5.59×104hm2，產(chǎn)量1.543×105t[2]。越橘生產(chǎn)以鮮果生產(chǎn)為主。隨著越橘產(chǎn)量的增加和消費(fèi)水平的提高，市場(chǎng)對(duì)越橘品質(zhì)的要求越來(lái)越高。大果、外觀好、好吃、耐儲(chǔ)運(yùn)成為越橘鮮果生產(chǎn)的主要目標(biāo)。品質(zhì)指標(biāo)是越橘品質(zhì)評(píng)價(jià)的依據(jù)，開展越橘品質(zhì)指標(biāo)研究，建立科學(xué)的品質(zhì)指標(biāo)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，確立代表性品質(zhì)指標(biāo)，將為越橘生產(chǎn)和流通中品質(zhì)評(píng)價(jià)、品種和產(chǎn)區(qū)選擇奠定基礎(chǔ)?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】目前越橘品質(zhì)研究主要集中在兩個(gè)方面，一是不同品系[3-6]、不同地區(qū)[7]和不同成熟度[8-9]的品質(zhì)差異性，二是不同主栽品種的加工[10]、貯藏[11]適應(yīng)性。劉丙花等[4]對(duì)22個(gè)不同品種的越橘果實(shí)品質(zhì)進(jìn)行分析與比較，篩選出綜合評(píng)價(jià)藍(lán)莓品質(zhì)的5項(xiàng)核心指標(biāo)，并建立了藍(lán)莓鮮食和加工特性評(píng)價(jià)模型。謝國(guó)芳等[7]對(duì)越橘感官、理化、營(yíng)養(yǎng)等指標(biāo)進(jìn)行差異性分析，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)地對(duì)貴州主栽越橘品種的品質(zhì)有一定影響，但相比品種而言，影響相對(duì)較小。謝躍杰等[8]針對(duì) 4個(gè)代表性越橘品種研究了成熟度對(duì)感官品質(zhì)、功效成分和抗氧化活性的影響，篩選出‘安娜’和‘巴爾德溫’為最佳的加工和提取活性成分用栽培品種。主成分分析[11-12]、聚類分析[13-15]和層次分析法[16]已成為果品品質(zhì)評(píng)價(jià)研究的重要手段。蘋果[15]、棗[17]、榛子[18]、杏[19]等研究表明，對(duì)符合正態(tài)分布的樣本進(jìn)行概率分級(jí)，分級(jí)效果較為理想。【本研究切入點(diǎn)】目前越橘品質(zhì)研究涉及的品種和地區(qū)較少，指標(biāo)間關(guān)系缺乏深入探討，指標(biāo)分級(jí)研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究以92份不同地區(qū)采集的越橘果實(shí)樣品為試材，對(duì)單果重、果形指數(shù)、硬度、可滴定酸含量、可溶性固性物含量、維生素C含量、固酸比7項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行系統(tǒng)研究，運(yùn)用相關(guān)分析、因子分析、層次分析法、正態(tài)分布理論等數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法，建立越橘品質(zhì)評(píng)價(jià)體系，并探索不同地區(qū)越橘品質(zhì)的差異?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】明確越橘主要品質(zhì)指標(biāo)，建立分級(jí)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，為越橘品質(zhì)評(píng)價(jià)提供理論參考。

1 材料與方法

試驗(yàn)于 2018年在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所進(jìn)行。

1.1 試驗(yàn)材料

從不同越橘產(chǎn)區(qū)共采集 92份越橘果實(shí)樣品作為試材（山東地區(qū)30份、江蘇地區(qū)8份、遼寧地區(qū)37份、吉林地區(qū)17份），品種名稱和編號(hào)見(jiàn)表1。果實(shí)在商品成熟期采摘，同一果園同一品種為1個(gè)樣品，隨機(jī)選取10株樹，摘取約500 g果實(shí)。越橘果實(shí)品質(zhì)測(cè)定于采樣當(dāng)日或次日在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所進(jìn)行，每個(gè)樣品設(shè)2次重復(fù)。

1.2 主要儀器

PL602-L型電子天平（METTLER TOLEDO公司，Switzerland）、PR-101α型數(shù)顯式全糖儀（ATAGO公司，Japan）、808 Titrando全自動(dòng)電位滴定儀（Metrohm公司，Switzerland）、FT-7型水果硬度無(wú)損傷檢測(cè)儀（北京陽(yáng)光億事達(dá)科技有限公司，China）、Milli-Q Direct 8實(shí)驗(yàn)室純水系統(tǒng)（Millipore公司，USA）、IP67型數(shù)顯卡尺（Sylvac公司，Switzerland）。

1.3 試驗(yàn)方法

單果重用PL602-L型電子天平測(cè)定。果形指數(shù)用IP67型數(shù)顯卡尺測(cè)量，果形指數(shù)用果實(shí)縱徑與果實(shí)橫徑的比值表示。果實(shí)硬度用FT-7型水果硬度無(wú)損傷檢測(cè)儀測(cè)定?？扇苄怨绦挝锖坑肞R-101α型數(shù)顯式全糖儀測(cè)定?？傻味ㄋ岷坑弥甘緞┑味ǚy(cè)定[20]。維生素C含量用2, 6-二氯靛酚滴定法測(cè)定[20]。固酸比用可溶性固形物與可滴定酸含量的比值表示。

表1 樣品一覽表Table 1 The list of samples

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)的基本統(tǒng)計(jì)量、相關(guān)分析、正態(tài)分布檢驗(yàn)、因子分析等用SAS 9.4軟件完成。正態(tài)分布檢驗(yàn)采用K-S（Kolmogorov-Smirnov）檢驗(yàn)，P≥0.05即判定符合正態(tài)分布。采用Origin 9.0 軟件對(duì)正態(tài)分布檢驗(yàn)和聚類結(jié)果作圖。

2 結(jié)果

2.1 越橘品質(zhì)指標(biāo)特征分析

2.1.1 越橘品質(zhì)指標(biāo)水平分析 單果重、果形指數(shù)、硬度、可滴定酸含量、可溶性固性物含量、維生素C含量、固酸比7項(xiàng)越橘品質(zhì)指標(biāo)的變幅、平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差及變異系數(shù)見(jiàn)表2。從表2可知，以上7項(xiàng)指標(biāo)中，固酸比變化范圍最大，在 6.7—89.5，變異系數(shù)高達(dá) 67.12%；其次是可滴定酸含量和單果重，變異系數(shù)分別為45.46%和35.28%；果實(shí)硬度、維生素C含量和可溶性固形物含量變異系數(shù)均在18%以上，說(shuō)明樣品的這些指標(biāo)間差異均很大。果形指數(shù)的變化范圍最小，在 0.65—0.88，變異系數(shù)僅為 6.05%，說(shuō)明越橘間果形指數(shù)差異較小。

表2 7 項(xiàng)品質(zhì)指標(biāo)的變異情況Table 2 Variation of seven quality indexes

2.1.2 主要品質(zhì)指標(biāo)分布規(guī)律 對(duì)各指標(biāo)進(jìn)行 K-S正態(tài)分布檢驗(yàn)，P≥0.05即判定符合正態(tài)分布[14]，結(jié)果見(jiàn)圖1。7項(xiàng)指標(biāo)中可滴定酸含量和維生素C含量的P值分別為0.1225和大于0.15，符合正態(tài)分布?？扇苄怨绦挝锖咳サ?個(gè)極端值和果形指數(shù)去掉3個(gè)極端值后P值均大于0.15，符合正態(tài)分布。硬度去掉4個(gè)極端值后，P值為0.0667，符合正態(tài)分布。單果重去掉4個(gè)極端值后，P值為0.0494，與0.05極為接近，視為符合正態(tài)分布；固酸比P值小于0.01，不符合正態(tài)分布。

2.1.3 越橘品質(zhì)指標(biāo)相關(guān)性分析 如表3所示，單果重與果形指數(shù)、維生素C含量、可溶性固形物含量間均呈極顯著（α=0.01）的負(fù)相關(guān)，即越橘維生素C含量、可溶性固形物含量和果形指數(shù)隨單果重的升高而降低。維生素C含量與可溶性固形物和固酸比均呈極顯著的正相關(guān)，即越橘可溶性固形物和固酸比隨維生素C含量的升高而升高?？傻味ㄋ岷颗c固酸比呈極顯著的負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)達(dá)-0.8174，表明越橘固酸比隨可滴定酸含量的升高而降低?；貧w分析顯示可滴定酸含量與固酸比之間有極顯著的冪函數(shù)關(guān)系，決定系數(shù)（R2）達(dá)0.9005（圖2）。

2.2 越橘品質(zhì)指標(biāo)的篩選

7項(xiàng)越橘品質(zhì)指標(biāo)數(shù)據(jù)經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)化處理，采用Quartimax旋轉(zhuǎn)法進(jìn)行因子分析。結(jié)果顯示，前4個(gè)因子貢獻(xiàn)率均大于15%，累積貢獻(xiàn)率達(dá)85.4%，能夠代表7項(xiàng)指標(biāo)的大部分信息。因子1貢獻(xiàn)率為28.4%，代表性指標(biāo)包括可滴定酸含量和固酸比，反映越橘的酸味特征；因子2貢獻(xiàn)率為25.3%，代表性指標(biāo)為可溶性固形物，反映越橘的甜味特征；因子3貢獻(xiàn)率為16.5%，代表性指標(biāo)為維生素C含量，反映越橘維生素C含量水平；因子4貢獻(xiàn)率為15.2%，代表性指標(biāo)為果實(shí)硬度，反映越橘的質(zhì)地特征。

固酸比為可滴定酸與可溶性固形物含量的推導(dǎo)指標(biāo)，測(cè)定不夠簡(jiǎn)便；可滴定酸含量易于測(cè)定，而且不是導(dǎo)出指標(biāo)，具有準(zhǔn)確和簡(jiǎn)便的特點(diǎn)[15]?？傻味ㄋ岷颗c固酸比高度相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為-0.81742（表3），且二者在因子分析中歸為一類性狀（表 5和圖 3）。因此，對(duì)其進(jìn)行簡(jiǎn)化，即可滴定酸含量和固酸比留一個(gè)。在因子分析中可滴定酸含量權(quán)重略大于固酸比，故選擇可滴定酸含量定義為酸味指標(biāo)。因此，越橘的代表性品質(zhì)指標(biāo)由可滴定酸含量（酸味指標(biāo)）、可溶性固形物含量（甜味指標(biāo)）、維生素C含量（營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)）、果實(shí)硬度（質(zhì)地指標(biāo)）4項(xiàng)構(gòu)成。

圖1 7項(xiàng)品質(zhì)指標(biāo)頻次分布圖Fig. 1 Distribution of seven quality indexes

表3 7 項(xiàng)品質(zhì)指標(biāo)的相關(guān)系數(shù)Table 3 Correlation coefficients of seven quality indexes

2.3 越橘品質(zhì)指標(biāo)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

符合正態(tài)分布的指標(biāo)可進(jìn)行概率分級(jí)[15,17]。篩選出的4項(xiàng)品質(zhì)指標(biāo)均符合正態(tài)分布，分為極低、低、中、高和極高5級(jí)（表4）。從分布比例來(lái)看，處于中級(jí)的越橘樣本數(shù)量最多，平均達(dá)35.25%。可溶性固形物含量處于中級(jí)的樣品數(shù)最多，其次是果實(shí)硬度，可滴定酸含量處于中級(jí)的樣品最少。低級(jí)和高級(jí)的樣品分別占總數(shù)的23.5%和21%，其中維生素C含量處于低級(jí)的樣品數(shù)最高（26份），可滴定酸含量處于高級(jí)的樣品數(shù)最高（24份），其余指標(biāo)處于這兩級(jí)的樣品均少于21份。屬于極低和極高的樣本數(shù)均較少，僅分別為9.75%和10.75%，其中可溶性固形物處于極低的樣品數(shù)最高（11份），果實(shí)硬度處于極高的樣品數(shù)最高（12份）。

圖2 固酸比與可滴定酸含量之間的冪函數(shù)回歸曲線Fig. 2 Power functions between total soluble solid/titratable acidity with titratable acidity

2.4 越橘品質(zhì)指標(biāo)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)的建立

根據(jù)因子分析中各指標(biāo)的貢獻(xiàn)程度并結(jié)合生產(chǎn)實(shí)踐，構(gòu)建越橘主要品質(zhì)指標(biāo)的判別矩陣（表6）。判斷矩陣的CR值為0.0039，小于0.1，說(shuō)明判別矩陣中各成分相互關(guān)系比較一致，可接受層次分析最終排序結(jié)果[21]，可溶性固形物含量、可滴定酸含量、維生素 C含量和果實(shí)硬度的權(quán)重分別為 31.23%、31.23%、29.13%和 8.41%，即可滴定酸含量和可溶性固形物含量對(duì)越橘綜合品質(zhì)貢獻(xiàn)最大，其次是維生素C含量，果實(shí)硬度對(duì)越橘品質(zhì)影響相對(duì)較小。將層次分析確定的指標(biāo)權(quán)重乘以 100作為該指標(biāo)的分值，各品質(zhì)指標(biāo)滿分值的 1/5作為級(jí)差[21]，結(jié)合指標(biāo)分級(jí)結(jié)果，以確定各級(jí)得分，4項(xiàng)指標(biāo)滿分總和為100分?？扇苄怨绦挝锖俊⒕S生素C含量和果實(shí)硬度為正向指標(biāo)，以最高等級(jí)的得分為滿分，即31.23、29.13和8.41，其前各等級(jí)得分依次遞減?？傻味ㄋ岷繛樨?fù)向指標(biāo)，以最低等級(jí)得分為滿分，即31.23，其后各等級(jí)得分依次遞減。各等級(jí)得分見(jiàn)表7。

表4 7項(xiàng)品質(zhì)指標(biāo)因子分析結(jié)果Table 4 Principal component analysis of seven quality indexes

表5 4項(xiàng)品質(zhì)指標(biāo)的分級(jí)結(jié)果Table 5 Grading of four quality indexes

表6 越橘品質(zhì)指標(biāo)判別矩陣Table 6 Discriminant matrix of quality index

表7 4項(xiàng)品質(zhì)指標(biāo)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)Table 7 Scores of five quality indexes

2.5 越橘品質(zhì)綜合評(píng)價(jià)

利用品質(zhì)指標(biāo)得分對(duì)越橘樣品進(jìn)行 K-均值聚類分析，將92份參試越橘樣品分為3大類。其品質(zhì)依次分為優(yōu)、中、差，各類樣品的指標(biāo)分布情況見(jiàn)表8和表9。根據(jù)分類結(jié)果，以可溶性固形物含量為x軸，可滴定酸含量為y軸繪制成平面圖（圖3），除個(gè)別樣品外，本研究建立的評(píng)價(jià)方法可將3種品質(zhì)的越橘區(qū)分開，效果較為明顯。從結(jié)果可知，優(yōu)等越橘果實(shí)硬度較大，維生素C含量和可溶性固形物含量高，可滴定酸含量中等，口味大多偏甜，品質(zhì)上乘。中等越橘果實(shí)偏軟，維生素C含量和可溶性固形物含量中等，可滴定酸含量相對(duì)較低，口味大多酸甜。差等越橘果實(shí)硬度中等，維生素C含量和可溶性固形物含量低，可滴定酸含量高，口感大多偏酸。92份越橘樣品評(píng)價(jià)等級(jí)見(jiàn)表 9?！缢{(lán)’‘日升’‘斯巴坦’‘北衛(wèi)’等品種表現(xiàn)較為突出，均為優(yōu)等；‘都克’‘密斯蒂’‘北陸’‘奧尼爾’‘達(dá)柔’‘北藍(lán)’等品種則多為中等；‘瑞卡’‘普魯’‘藍(lán)金’‘布里吉塔’等品種表現(xiàn)一般，多為差等。

圖3 92份越橘樣品聚類結(jié)果Fig. 3 Cluster results of 92 samples

表8 越橘樣品指標(biāo)聚類分布情況Table 8 Distribution of blueberry samples

表9 92份越橘樣品的評(píng)價(jià)等級(jí)Table 9 Evaluation grades of 92 samples

3 討論

生物現(xiàn)象的連續(xù)性變量或間斷性變量大多遵從正態(tài)分布，在果樹科學(xué)試驗(yàn)中正態(tài)分布是最常見(jiàn)的分布形式[22]，這一特點(diǎn)在蘋果[23]、桃[24]、棗[25]、山核桃[26]等果樹上均有體現(xiàn)。本研究顯示，單果重、果形指數(shù)、果實(shí)硬度、維生素 C含量、可溶性固形物含量和可滴定酸含量 6項(xiàng)越橘品質(zhì)指標(biāo)均表現(xiàn)為明顯的正態(tài)分布，而固酸比表現(xiàn)為偏態(tài)分布，這可能與長(zhǎng)期的人工選擇有關(guān)，使樹種向人們期望的方向進(jìn)化，處于相應(yīng)性狀的個(gè)體或品種增加，導(dǎo)致性狀的分布發(fā)生變化[13,27-28]。果實(shí)數(shù)量性狀的分級(jí)是果實(shí)品質(zhì)評(píng)價(jià)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。概率分級(jí)是建立在主要性狀分布特征基礎(chǔ)上的分級(jí)方法，與傳統(tǒng)的經(jīng)驗(yàn)分級(jí)相比，概率分級(jí)客觀、標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)一，更有指導(dǎo)價(jià)值[14]。概率分級(jí)已經(jīng)在蘋果[15]、葡萄[28]、核桃[29]、杏[30]等果樹上取得了比較理想的結(jié)果，本研究以92份越橘樣品為試材，涉及8個(gè)地區(qū)的41個(gè)品種，有足夠的代表性，分級(jí)結(jié)果科學(xué)、準(zhǔn)確，可為越橘品質(zhì)指標(biāo)分級(jí)研究提供理論支持。

因子分析法[31]、聚類分析法[32]和主成分分析法[13]是果品評(píng)價(jià)常用的方法，主要用于解決指標(biāo)間信息重疊問(wèn)題[33]。層次分析方法可以較好的解決指標(biāo)相互關(guān)聯(lián)的問(wèn)題，在蘋果[34]、葡萄[35]、黑莓[36]、越橘[4]等果品評(píng)價(jià)上有廣泛的應(yīng)用。但層次分析往往依賴于人們的經(jīng)驗(yàn)，構(gòu)建的判別矩陣不應(yīng)帶有主觀臆斷性，否則會(huì)使結(jié)果可信度下降[37]。本研究利用主成分分析和聚類分析篩選出4個(gè)越橘品質(zhì)的代表性指標(biāo)，根據(jù)指標(biāo)貢獻(xiàn)程度構(gòu)建層次分析的判別矩陣，判別矩陣的一致性滿足要求，確定各指標(biāo)的權(quán)重值更合理、準(zhǔn)確。聚類分析將92份越橘得分分為3類，營(yíng)口地區(qū)大部分樣品為優(yōu)等，部分樣品為中等；連云港地區(qū)絕大部分樣品處于中等，少部分為優(yōu)等和差等；青島地區(qū)樣品均處于中等；長(zhǎng)春地區(qū)、丹東地區(qū)和通化地區(qū)樣品均集中在中等和差等；威海地區(qū)和大連地區(qū)樣品較為分散，3個(gè)等級(jí)均有存在。從品種來(lái)看，南高叢越橘除威海地區(qū)的‘密斯蒂’、半高叢越橘除大連地區(qū)的‘北陸’及矮叢越橘長(zhǎng)春地區(qū)的‘普特’均處于中等。北高叢越橘主要集中在優(yōu)等和差等，處于中等的樣品較少，其中各地區(qū)的‘早藍(lán)’‘北衛(wèi)’‘日升’等品種品質(zhì)較為突出，均處于優(yōu)等。由此可見(jiàn)，不同地區(qū)越橘品質(zhì)有所差異，究其原因，與生態(tài)條件、果園管理水平等因素有關(guān)[7,38]。

越橘品質(zhì)已有較多的研究，但是少有對(duì)越橘品質(zhì)指標(biāo)相關(guān)性研究的報(bào)道。本研究中，維生素C含量和可溶性固形物含量隨單果重的升高而降低，呈極顯著的負(fù)相關(guān)；可滴定酸含量與固酸比均隨果形指數(shù)的變化而變化，相關(guān)性均為極顯著，這種相關(guān)性在草莓[39]、無(wú)花果[40]、梨[41]上均有一定的體現(xiàn)。維生素C是評(píng)價(jià)果品營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)非常重要的指標(biāo)之一。越橘中維生素C含量隨可溶性固形物含量的升高而升高，二者呈極顯著的正相關(guān)，這與前人在桃[42]、梨[41]、獼猴桃[43]等水果中的研究結(jié)果相同，說(shuō)明果實(shí)中糖的含量多少與維生素C合成是密切關(guān)聯(lián)的。

果實(shí)的糖酸含量是反應(yīng)果實(shí)風(fēng)味的重要指標(biāo)，水果中的可溶性固形物主要由糖構(gòu)成[44]。從參試的 92份越橘樣品來(lái)看，可滴定酸含量和固酸比變化范圍廣、變異系數(shù)大（表 2），與之相比，可溶性固形物含量變異程度相對(duì)較小，這一結(jié)果與LOBOS等[45]的研究一致，表明越橘品種間糖、酸含量有所差異。不同的糖其甜度和口感不同，果糖最甜，蔗糖次之，葡萄糖再次之，但葡萄糖口感最佳[46-48]。不同有機(jī)酸的酸味強(qiáng)度也不盡相同，味覺(jué)對(duì)檸檬酸的感知先于蘋果酸，且檸檬酸比蘋果酸能達(dá)到更高的酸度，但其酸味持續(xù)的時(shí)間短[49]。因此，越橘的風(fēng)味并不能單純的用甜味和酸味來(lái)衡量，今后可從越橘糖、酸組分及含量入手，進(jìn)一步開展越橘風(fēng)味的研究。

4 結(jié)論

越橘品種間單果重、果實(shí)硬度、維生素C含量、可溶性固形物含量、可滴定酸含量和固酸比差異較大，果形指數(shù)差異較小，除固酸比外，其余指標(biāo)均服從正態(tài)分布。可滴定酸含量與固酸比呈極顯著的負(fù)相關(guān)，且二者之間存在極顯著的冪函數(shù)變化趨勢(shì)。可溶性固形物含量（甜味指標(biāo)）、可滴定酸含量（酸味指標(biāo)）、維生素C含量（營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)）和果實(shí)硬度（質(zhì)地指標(biāo)）是越橘的代表性品質(zhì)指標(biāo)，4項(xiàng)指標(biāo)均可劃分為服從正態(tài)分布的5級(jí)，即極低、低、中、高和極高。

致謝：本文部分樣品由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)小漿果種質(zhì)資源圃和遼寧省果樹科學(xué)研究所提供，特致謝忱！