姜美云，唐 碩，王 婷，賴晨歡，范一民，勇 強(qiáng),*

（1.南京林業(yè)大學(xué) 林業(yè)資源高效加工利用協(xié)同創(chuàng)新中心，江蘇 南京 210037；2.南京林業(yè)大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院，江蘇 南京 210037）

果膠是一種天然大分子酸性多糖，分子質(zhì)量介于10～400 kDa之間，主要由半乳糖醛酸聚糖（homogalacturonan，HG）、鼠李半乳糖醛酸聚糖-I（rhamnogalacturonans I，RG-I）和鼠李半乳糖醛酸聚糖-II（rhamnogalacturonans II，RG-II）組成[1]。其中，HG主要是由D-半乳糖醛酸通過α-1,4糖苷鍵連接而成，且半乳糖醛酸殘基易被乙?；图柞セG-I主鏈?zhǔn)怯墒罄钐呛桶肴樘侨┧峤惶娼M成的重復(fù)單位，并帶有中性糖基側(cè)鏈。RG-II主鏈為聚半乳糖醛酸，側(cè)鏈含有4 種結(jié)構(gòu)復(fù)雜的寡糖[2]。由于果膠結(jié)構(gòu)復(fù)雜，分子質(zhì)量大，溶解性差，導(dǎo)致其生物利用率低，限制了其生物活性的發(fā)揮。為提高果膠多糖的生物活性，降低果膠多糖分子質(zhì)量可顯著改善其生物活性和生物利用率[3]。目前，果膠多糖降解產(chǎn)物作為穩(wěn)定劑、增稠劑、凝膠劑和抗氧化劑廣泛應(yīng)用于食品、化妝品、醫(yī)藥等行業(yè)[4-6]。因此，近年來果膠多糖限制性水解技術(shù)成為果膠多糖高值化利用的研究熱點(diǎn)之一。

目前果膠多糖限制性水解的方法主要包括酶水解[7-8]、酸水解[9-11]和水熱法[12-13]。酶水解法雖然條件溫和，反應(yīng)專一性高，但由于果膠結(jié)構(gòu)復(fù)雜，導(dǎo)致酶法限制性水解果膠所需的果膠酶種類繁多，且成本高，不利于工業(yè)化生產(chǎn)。酸水解法條件劇烈，水解程度不易控制，水解產(chǎn)物中單糖含量較高，且半乳糖醛酸容易形成內(nèi)酯[14]，降低了果膠多糖的限制性水解效率。水熱法是一種環(huán)保清潔的限制性水解方法，由于在水解過程中不添加外源酸，避免了設(shè)備腐蝕和環(huán)境污染等問題，利于工業(yè)化放大生產(chǎn)。在果膠多糖的水熱法限制性水解過程中，果膠多糖中的部分酸性糖基以及乙?；撀洌尫潘嵝蕴呛鸵宜?，從而作為水熱過程中的弱酸催化劑，催化果膠多糖的限制性水解[15]。目前，水熱法已經(jīng)成功應(yīng)用于多種多糖的限制性水解[16-18]。Miyazawa等[17]報道了以聚半乳糖醛酸為原料，通過水熱法降解得到聚合度為2～10的低聚物；Saravana等[18]采用水熱法降解制備低分子質(zhì)量的褐藻糖膠，并發(fā)現(xiàn)水熱降解后的褐藻糖膠抗氧化性、抗菌性、抗凝活性等生物活性提高。但果膠多糖的水熱法可控降解報道較少。

本實(shí)驗(yàn)以商品果膠多糖為原料，采用水熱法降解果膠多糖。通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)考察水熱處理溫度、水熱處理時間、pH值等因素對果膠多糖降解產(chǎn)物得率的影響；采用乙醇分級沉淀的方法分離制備出不同分子質(zhì)量的果膠多糖降解產(chǎn)物，并通過化學(xué)抗氧化法評價其體外抗氧化性。研究結(jié)果可為制備不同分子質(zhì)量的果膠多糖降解產(chǎn)物和開拓活性果膠多糖降解產(chǎn)物的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

商品果膠 上海麥克林生化科技有限公司；半乳糖醛酸等單糖標(biāo)準(zhǔn)樣品 美國Sigma-Aldrich公司；其他試劑均為分析純 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

ICS-3000型高效液相離子交換色譜儀（配有脈沖安培檢測器） 美國戴安公司；1200型高效液相色譜儀（配有示差檢測器） 美國Agilent公司；油浴蒸煮罐35 mL。

1.3 方法

1.3.1 商品果膠的成分分析

1.3.1.1 糖基組成的測定

采用高效液相離子交換色譜法測定果膠多糖及其降解產(chǎn)物的糖基組成[19]。操作如下：稱取10 mg絕干質(zhì)量商品果膠或經(jīng)冷凍干燥處理的果膠多糖降解產(chǎn)物于5 mL水解瓶中，加入2 mL去離子水，每10 min搖勻一次。待果膠充分溶解后，加入2 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)8%的硫酸溶液并置于高溫滅菌鍋中于121 ℃反應(yīng)60 min。反應(yīng)結(jié)束后，加入0.16 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)50%的NaOH溶液進(jìn)行中和，并梯度稀釋到100 倍，采用DINOXICS-3000型高效液相離子交換色譜儀進(jìn)行定量分析（CarboPac PA10色譜柱和脈沖安培檢測器）。其中，葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和木糖的分析條件為：柱溫30 ℃，流動相200 mmol/L NaOH，流速0.2 mL/min，進(jìn)樣量10 μL；鼠李糖和半乳糖醛酸的分析條件為：柱溫30 ℃，流動相200 mmol/L NaOH和500 mmol/L CH3COONa，流速0.3 mL/min，進(jìn)樣量10 μL。

1.3.1.2 酯化度的測定

采用化學(xué)滴定法對果膠酯化度進(jìn)行測定[20]。操作如下：稱取0.5 g絕干質(zhì)量果膠于燒杯中，分別加入95%乙醇溶液5.0 mL、氯化鈉1.0 g、去離子水100 mL和酚酞試劑3 滴，充分搖勻至果膠溶解。采用0.1 mol/L NaOH溶液進(jìn)行滴定直至體系變色，并記錄消耗量（記為VA）；然后，加入0.3 mol/L NaOH溶液25 mL，充分混合并靜置30 min，隨后加入0.3 mol/L鹽酸溶液25 mL并充分搖勻，最后用0.1 mol/L NaOH溶液滴定直至體系顏色變?yōu)榧t色，并記錄消耗量（記為VB）。果膠酯化度按公式（1）計算：

1.3.1.3 果膠多糖相對分子質(zhì)量的測定

采用凝膠滲透色譜測定商品果膠及其水熱降解產(chǎn)物的分子質(zhì)量[21-22]。操作條件如下：Agilent 1200型高效液相色譜儀，Ultrahydrogel 120和Ultrahydrogel 250串聯(lián)，柱溫55 ℃，流動相0.6 mol/L KH2PO4溶液，流速0.6 mL/min，進(jìn)樣量10 μL，檢測器為示差折光檢測器。

1.3.2 水熱法降解果膠多糖條件優(yōu)化試驗(yàn)設(shè)計

1.3.2.1 單因素試驗(yàn)

于35 mL的油浴蒸煮罐中，加入25 mL料液比為1∶25（g/mL）的初始商品果膠，分別于不同水熱處理條件下（水熱處理溫度分別為100、120、140、160 ℃和180 ℃，水熱處理時間分別為5、20、35、50 min和65 min，pH值分別為2、4、6、8、10和12）進(jìn)行果膠限制性水解反應(yīng)，以研究水熱處理溫度、水熱處理時間、pH值對果膠多糖降解產(chǎn)物得率的影響。

1.3.2.2 正交試驗(yàn)

在單因素試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上，以商品果膠多糖降解產(chǎn)物得率為考察指標(biāo)，選取水熱處理溫度、水熱處理時間、pH值進(jìn)行3因素3水平L9（33）正交試驗(yàn)，以確定水熱法降解果膠多糖的最佳工藝條件，見表1。

表1 正交試驗(yàn)因素與水平Table 1 Code and level of independent variables used for orthogonal array design

1.3.3 果膠多糖降解產(chǎn)物得率的計算

為避免未水解果膠多糖對果膠多糖降解產(chǎn)物得率計算的影響，采用乙醇沉淀法[23]對果膠水熱處理液進(jìn)行預(yù)處理，操作如下：于商品果膠水熱處理液中添加乙醇至乙醇終體積分?jǐn)?shù)為20%，充分混勻后靜置離心，以去除未水解的果膠多糖沉淀。果膠多糖降解產(chǎn)物仍溶解于上清液中，為計算果膠多糖降解產(chǎn)物得率，取10 mL的上清液，蒸發(fā)除去乙醇后加水定容至原體積。取5 mL上述樣品溶液，加入5 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)8%硫酸于121 ℃反應(yīng)1 h后，利用高效液相離子色譜測定酸解前后半乳糖醛酸的含量。果膠多糖降解產(chǎn)物得率和單糖得率（游離的半乳糖醛酸）按公式（2）、（3）計算：

式中：Ca為上清液酸解后半乳糖醛酸質(zhì)量濃度/（g/L）；Cb為上清液酸解前半乳糖醛酸質(zhì)量濃度/（g/L）；Cg為商品果膠酸解后半乳糖醛酸質(zhì)量濃度/（g/L）。

1.3.4 不同分子質(zhì)量果膠多糖降解產(chǎn)物的乙醇分級分離

將商品果膠于140 ℃和pH 6的條件下進(jìn)行水熱降解30 min，所得水熱處理液用于不同分子質(zhì)量果膠多糖降解產(chǎn)物的乙醇分級分離。當(dāng)體系中乙醇溶液體積分?jǐn)?shù)分別為50%、60%和70%時，離心分離所得沉淀經(jīng)冷凍干燥、稱質(zhì)量計量后，分別標(biāo)記為組分S1、S2、S3，并對各組分的分子質(zhì)量和糖基組成進(jìn)行測定。具體操作過程如圖1所示。

圖1 水熱處理液經(jīng)乙醇分級沉淀獲得S1、S2和S3組分的操作步驟示意圖Fig. 1 Flow chart of the ethanol fractionation of the hydrothermal hydrolsate

1.3.5 果膠多糖降解產(chǎn)物體外抗氧化性的測定

1.3.5.1 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-dipheny1-2-picryl-hydrazyl，DPPH）自由基清除能力的測定

于15 mL試管中依次加入2 mL不同質(zhì)量濃度（0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 g/L）的多糖溶液，加入2 mL DPPH溶液（0.2 mmol/L，溶于80%乙醇溶液中），混勻后在室溫下避光反應(yīng)30 min，于517 nm波長處測定吸光度，記為A0[24]。對照組為不同質(zhì)量濃度多糖樣品2 mL，分別加入2 mL無水乙醇，在517 nm波長處測定吸光度，記為A1?？瞻捉M為2 mL無水乙醇，加入2 mL DPPH溶液，在517 nm波長處測定吸光度，記為A2。以相同質(zhì)量濃度的VC做陽性對照，每個樣品重復(fù)實(shí)驗(yàn)2 次。DPPH自由基清除率按公式（4）計算：

1.3.5.2 超氧陰離子自由基清除能力的測定

利用鄰苯三酚的自氧化方法檢測多糖對超氧陰離子自由基的清除作用。于15 mL試管中依次加入1 mL不同質(zhì)量濃度（0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 g/L）的多糖溶液，加入4.5 mL 0.05 mol/L（pH 8.2）的Tris-HCl緩沖液，然后在25 ℃水浴中預(yù)熱20 min。取0.5 mL預(yù)熱好的45 mmol/L鄰苯三酚，加入到樣品中，迅速混勻，5 min內(nèi)于325 nm波長處測定吸光度，記為A0[25]。用蒸餾水代替鄰苯三酚時測得的吸光度記為A1?？瞻捉M以蒸餾水代替多糖樣品，吸光度記為A2。以相同質(zhì)量濃度的VC做陽性對照，每個樣品重復(fù)實(shí)驗(yàn)2 次。超氧陰離子自由基清除率按公式（5）計算：

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次，結(jié)果以 ±s表示，采用Excel軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行整理、Origin Pro 2017軟件作圖。采用SPSS 20.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性分析和方差分析，P＜0.05，差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 商品果膠糖基成分分析

為分析果膠多糖中的糖基組成，本實(shí)驗(yàn)中采用高效液相離子交換色譜法分析商品果膠多糖完全水解產(chǎn)物，結(jié)果如表2所示。

表2 商品果膠的糖基組成分析Table 2 Glycosyl composition analysis of commercial pectin

由表2可知，商品果膠的主要成分是酸性糖半乳糖醛酸基，占果膠多糖干基的62.10%；中性糖基總質(zhì)量分?jǐn)?shù)為22.29%，包括葡萄糖基、半乳糖基、木糖基、鼠李糖基和阿拉伯糖基。Wang Xin等[26]報道了商品蘋果果膠糖基組成，其中半乳糖醛酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為66.00%，中性糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為11.50%，與本實(shí)驗(yàn)中商品果膠的糖基組成基本一致。

2.2 水熱法降解果膠多糖單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 水熱處理溫度對果膠多糖降解產(chǎn)物得率的影響

在商品果膠料液比1∶25（g/mL）、pH 2.6（果膠溶液自然pH值）、水熱處理35 min條件下，分別考察水熱處理溫度（100、120、140、160 ℃和180 ℃）對果膠多糖降解產(chǎn)物得率的影響，結(jié)果如圖2所示。

圖2 水熱處理溫度對果膠多糖降解產(chǎn)物得率的影響Fig. 2 Effect of hydrothermal treatment temperature on the degradation efficiency of pectic polysaccharide

由圖2可知，當(dāng)水熱預(yù)處理溫度在100～140 ℃范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，果膠多糖降解產(chǎn)物得率呈現(xiàn)不斷上升的趨勢，由16.7%提高至42.0%，單糖得率從0.4%提高到5.5%。而當(dāng)溫度從140 ℃升高至180 ℃時，果膠多糖降解產(chǎn)物得率急劇下降，從42.0%下降至0.4%；而單糖得率呈現(xiàn)先上升后降低的趨勢，并在160 ℃時，單糖得率達(dá)到最高（6.5%）。這可能是由于在較高的水熱處理強(qiáng)度（140～160 ℃）下，部分果膠多糖徹底降解為單糖，使得單糖得率提高；而當(dāng)水熱處理溫度進(jìn)一步升高至180 ℃時，單糖得率急劇下降至0.1%，這是由于過高的預(yù)處理溫度使得單糖進(jìn)一步降解產(chǎn)生糠醛等衍生物[27]；此外，半乳糖醛酸易形成內(nèi)酯結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致糖得率顯著下降[14]。Martínez等[28]報道了以橘皮廢液為原料的水熱法制備果膠多糖，其水熱條件優(yōu)化結(jié)果表明，水熱處理最適溫度同樣為140 ℃。因此果膠多糖水熱法降解的適宜溫度為140 ℃左右。

2.2.2 水熱處理時間對果膠多糖降解產(chǎn)物得率的影響

在商品果膠料液比1∶25（g/mL）、pH 2.6（果膠溶液自然pH值）、水熱處理溫度140 ℃條件下，分別考察水熱處理時間（5、20、35、50、65 min）對果膠多糖降解產(chǎn)物得率的影響，結(jié)果如圖3所示。

圖3 水熱處理時間對果膠多糖降解產(chǎn)物得率的影響Fig. 3 Effect of hydrothermal treatment time on the degradation efficiency of pectic polysaccharide

由圖3可知，當(dāng)水熱處理時間由5 min延長至20 min時，果膠多糖降解產(chǎn)物得率由21.5%提高至43.3%；與此同時，單糖得率由0.3%增加至3.0%。然而，進(jìn)一步延長水熱處理時間至65 min時，果膠多糖降解產(chǎn)物得率呈現(xiàn)不斷下降的趨勢，由43.3%下降至21.7%；單糖得率卻呈現(xiàn)不斷上升的趨勢，由3.0%提高至13.8%，說明水熱處理時間過長易導(dǎo)致果膠多糖限制性降解產(chǎn)物進(jìn)一步水解為單糖，從而降低果膠多糖降解產(chǎn)物得率。因此選擇果膠多糖水熱法降解的適宜時間為20 min左右。

2.2.3 pH值對果膠多糖降解產(chǎn)物得率的影響

在商品果膠料液比1∶25（g/mL）、水熱處理溫度140 ℃、水熱處理20 min條件下，考察pH值（2、4、6、8、10、12）對果膠多糖降解產(chǎn)物得率的影響，結(jié)果如圖4所示。

由圖4所示，若控制pH值在2～12時，果膠多糖降解產(chǎn)物得率和單糖得率無明顯變化，果膠多糖降解產(chǎn)物得率維持在41.1%～42.5%范圍內(nèi)，單糖得率維持在5.9%～7.5%范圍內(nèi)。說明水熱處理的pH值對果膠多糖降解產(chǎn)物得率和單糖得率無顯著影響。此外，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)水熱處理pH值為2～12時，水熱處理30 min后，體系的pH值均處于2.1～2.8。這說明在140 ℃水熱處理過程中，果膠多糖的乙?；桶肴樘侨┧峄罅棵撀鋄15]，使整個處理體系的pH值急劇降低，從而削弱了pH值對果膠多糖降解得率的影響。

圖4 pH值對果膠多糖降解產(chǎn)物得率的影響Fig. 4 Effect of pH on the degradation efficiency of pectic polysaccharide

2.3 水熱降解法正交試驗(yàn)結(jié)果

表3 果膠多糖降解L9（33）的正交試驗(yàn)結(jié)果Table 3 Orthogonal array design L9 (33) with experimental results

按照正交試驗(yàn)優(yōu)化得到的最佳工藝條件（表3），即水熱處理溫度140 ℃、水熱處理時間30 min、pH 6，重復(fù)3 次平行實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證，果膠多糖得率分別為45.8%、46.3%、46.5%，平均得率為46.2%，表明該方法穩(wěn)定可靠。由表4可知，對果膠多糖降解得率的影響：水熱處理溫度＞水熱處理時間＞pH值。

表4 方差分析與顯著性分析結(jié)果Table 4 Analysis of variance of regression equation and significance test

2.4 不同分子質(zhì)量范圍果膠多糖降解產(chǎn)物的分離

采用乙醇分級沉淀法，將商品果膠多糖水熱降解產(chǎn)物進(jìn)行分離，分別于乙醇體積分?jǐn)?shù)為50%、60%和70%下獲得果膠多糖降解產(chǎn)物S1、S2和S3三個組分。采用凝膠排阻色譜分析商品果膠多糖和3 種果膠多糖降解產(chǎn)物的分子質(zhì)量分布，結(jié)果如圖5所示。

圖5 果膠多糖活性降解產(chǎn)物中S1、S2和S3組分的分子質(zhì)量分布Fig. 5 Molecular mass distribution of S1, S2 and S3

由圖5可知，3 種果膠多糖降解產(chǎn)物的信號峰呈現(xiàn)典型的正態(tài)分布，表明此3 種組分經(jīng)乙醇分級分離后分子質(zhì)量相對均一。此外，經(jīng)GPC Addon軟件分析結(jié)果表明，隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)逐漸增加，其沉淀分離所得的果膠多糖降解產(chǎn)物分子質(zhì)量逐漸降低（表5）。與商品果膠相比，果膠多糖經(jīng)過水熱法降解后，分子質(zhì)量大大降低。

表5 不同分子質(zhì)量果膠多糖的性質(zhì)分析Table 5 Properties of degradation products of pectic polysaccharide with different molecular masses

在此基礎(chǔ)上，采用高效液相離子交換色譜法分析3 種果膠多糖降解產(chǎn)物的糖基組成，結(jié)果如表5所示。經(jīng)乙醇分級沉淀技術(shù)分離制備的3 種組分S1、S2、S3糖基組成與商品果膠的糖基組成基本相似。并且這3 種降解產(chǎn)物占水熱總糖的質(zhì)量百分比分別為37.8%、19.2%和41.3%。綜上所述，采用乙醇分級沉淀技術(shù)可實(shí)現(xiàn)果膠多糖降解產(chǎn)物的有效分離與制備，并通過高效液相離子交換色譜法分析還可實(shí)現(xiàn)不同分子質(zhì)量果膠多糖降解產(chǎn)物的定量分析，為不同分子質(zhì)量范圍果膠多糖降解產(chǎn)物的抗氧化性研究提供技術(shù)支持。

2.5 不同分子質(zhì)量果膠多糖降解產(chǎn)物的抗氧化活性

2.5.1 DPPH自由基清除能力

如圖6所示，果膠多糖對DPPH自由基的清除能力與其聚合度和質(zhì)量濃度的大小有關(guān)。當(dāng)質(zhì)量濃度為0.5～3.0 g/L時，商品果膠對DPPH自由基的清除率均低于15.0%；而果膠多糖降解產(chǎn)物S1、S2和S3組分對DPPH自由基的清除能力隨質(zhì)量濃度的增大而顯著增強(qiáng)。當(dāng)果膠多糖降解產(chǎn)物質(zhì)量濃度為3.0 g/L時，S1、S2和S3組分的DPPH自由基清除率分別達(dá)49.8%、45.1%和39.8%，分別是商品果膠清除率的4.0、3.6 倍和3.2 倍。這一研究結(jié)果與李健軍[29]的研究結(jié)果一致。綜上所述，采用水熱法降解果膠多糖可顯著提高其清除DPPH自由基的能力。

圖6 不同分子質(zhì)量的果膠多糖降解產(chǎn)物對DPPH自由基的清除作用Fig. 6 DPPH radical scavenging effects of peptic oligosaccharides with different molecular masses on

2.5.2 超氧陰離子自由基清除能力

圖7 不同分子質(zhì)量的果膠多糖降解產(chǎn)物對超氧陰離子自由基的清除作用Fig. 7 Superoxide anion scavenging effects of pectic oligosaccharides with different molecular masses

如圖7所示，商品果膠與其水熱降解產(chǎn)物均具有清除超氧陰離子自由基的能力。在質(zhì)量濃度0.5～3.0 g/L范圍內(nèi)，隨著質(zhì)量濃度的不斷增大，商品果膠超氧陰離子自由基清除率從69.2%下降到5.5%。S1、S2、S3組分對超氧陰離子自由基的清除能力隨分子質(zhì)量的增大而減小，可能是因?yàn)樯唐饭z和各組分隨著質(zhì)量濃度的提高，增加了鄰苯三酚的氧化速率，從而提供了更多的超氧陰離子，但S1、S2、S3組分下降速率緩慢，因此清除能力均高于商品果膠。當(dāng)質(zhì)量濃度為3.0 g/L時，S3組分清除率可達(dá)到58.7%，是商品果膠超氧陰離子自由基清除能力的10 倍，這一研究結(jié)果與郝杰等[30]的研究結(jié)果一致。綜上所述，水熱法降解果膠多糖顯著提高了其對超氧陰離子自由基的清除能力。

3 結(jié) 論

采用水熱法對果膠多糖進(jìn)行限制性水解，通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)，確定水熱法降解果膠多糖的最佳工藝條件為：水熱處理溫度140 ℃、水熱處理時間30 min、pH 6；在此條件下，果膠多糖降解產(chǎn)物得率最高為46.2%。

通過乙醇分級沉淀可實(shí)現(xiàn)果膠多糖降解產(chǎn)物的有效分離，分別獲得重均分子質(zhì)量為13.4、7.5 kDa和5.7 kDa的3 個果膠多糖降解產(chǎn)物組分。在此基礎(chǔ)上，通過高效液相離子交換色譜法分析可實(shí)現(xiàn)不同分子質(zhì)量果膠多糖降解產(chǎn)物的定量分析。

抗氧化活性研究表明，果膠多糖降解產(chǎn)物對DPPH自由基和超氧陰離子自由基的清除能力顯著高于商品果膠。其中，S1組分對DPPH自由基的清除能力最強(qiáng)，清除率可達(dá)到49.8%，是商品果膠多糖清除率的4 倍；在質(zhì)量濃度0.5～3 g/L范圍內(nèi)，與商品果膠和S1、S2組分相比，S3組分對超氧陰離子自由基的清除能力最強(qiáng)。由此可見，水熱降解有效提高了果膠多糖對DPPH自由基和超氧陰離子自由基的清除能力。