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        應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)孕婦乙型肝炎表面抗原的意義

        2019-06-27 00:10:43藍(lán)唯
        健康必讀·下旬刊 2019年6期
        關(guān)鍵詞:檢測(cè)

        藍(lán)唯

        【摘 要】目的:分析酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和磁微?;瘜W(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)孕婦乙型肝炎表面抗原的意義。方法:選取2018年1月至12月期間我院收治的80例乙型肝炎孕婦,均采取酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)乙肝表面抗原,分析兩種檢測(cè)方法結(jié)果。結(jié)果:80份樣本中酶聯(lián)免疫吸附法檢出陽(yáng)性64份,陽(yáng)性率為80.0%,電化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)出陽(yáng)性77份,陽(yáng)性率為96.25%,兩種檢出陽(yáng)性率差異顯著(P<0.05)。結(jié)論:對(duì)于孕婦乙型肝炎表面抗原檢測(cè)中磁微?;瘜W(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)法準(zhǔn)確性高于酶聯(lián)免疫吸附法,臨床可優(yōu)選使用。

        【關(guān)鍵詞】酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn);磁微?;瘜W(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè);乙型肝炎表面抗原

        【中圖分類號(hào)】R512.6【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1672-3783(2019)06-03--02

        慢性乙型肝炎(HBV)為一種常見(jiàn)的傳染性疾病,相關(guān)部分統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示我國(guó)目前具有約1億人受乙肝病毒影響[1],使得慢性乙肝成為威脅人民生命健康的殺手。目前慢性乙肝的檢測(cè)方法主要為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、磁微?;瘜W(xué)發(fā)光免疫法(CLIA)等技術(shù),ELISA用于HBsAg定性檢測(cè),CLIA用于定量檢測(cè),因此兩種檢測(cè)方法陽(yáng)性率如何為本次研究重點(diǎn)。

        1 資料與方法

        1.1 基礎(chǔ)資料來(lái)源

        2018年1月至12月期間在我院接受治療的80例乙型肝炎病人,患者相關(guān)診斷均符合2015版中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)制定的《慢性乙型肝炎防治指南》的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[2]。80例孕婦年齡20-41歲,平均(32.0±2.6)歲,孕周16-33周,平均(22.3±5.2)周,本次患者均同意相應(yīng)的檢測(cè)方法并與我方簽訂相應(yīng)協(xié)議。

        1.2 方法

        抽取清晨空腹肘靜脈外周血5ml于具有抗凝劑的試管中,室溫下靜止約1h后離心,離心設(shè)置為4000r/min,離心5min,離心后吸取上清液,分為A、B試管中,-70℃保存。A試管使用ELISA檢測(cè),所用試劑為上海榮盛生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn),酶標(biāo)儀及洗板機(jī)為瑞士帝肯,嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作。B試管使用CLIA方法檢測(cè),儀器為鄭州安圖公司生產(chǎn)的A2000化學(xué)發(fā)光儀,試劑為鄭州安圖生物工程有限公司生產(chǎn)的磁微?;瘜W(xué)發(fā)光法乙肝表面抗原定量檢測(cè)試劑盒,檢測(cè)按照試劑盒方法及步驟。

        1.3 陽(yáng)性結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)

        ELISA檢測(cè)法:標(biāo)本的OD值≥COV為陽(yáng)性,CLIA法檢測(cè)后數(shù)值>0.05IU/ml為陽(yáng)性,確認(rèn)試驗(yàn)以抑制率>50%為陽(yáng)性。

        1.4 數(shù)據(jù)分析

        組間數(shù)據(jù)納入統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件SPSS20.0中分析,X2檢驗(yàn)分析計(jì)數(shù)資料,組間數(shù)據(jù)比價(jià)后P<0.05為差異明顯。

        2 結(jié)果

        80份樣本中酶聯(lián)免疫吸附法檢出陽(yáng)性64份,陽(yáng)性率為80.0%,磁微?;瘜W(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)出陽(yáng)性77份,陽(yáng)性率為96.25%,兩種檢出陽(yáng)性率差異顯著(X2=1.16,P=0.026)。

        3 討論

        乙型肝炎病毒是一種具有強(qiáng)傳染性的病毒,一般母嬰為該種病毒傳染的主要途徑,嬰兒感染該種病毒后可能出現(xiàn)流產(chǎn)、早產(chǎn)以及胎兒畸形等嚴(yán)重結(jié)果,因此對(duì)于孕婦人人員進(jìn)行乙型肝炎病毒檢測(cè)尤其重要,其直接影響新生兒接受乙型肝炎疫苗免疫策略。

        目前監(jiān)測(cè)乙肝的方法較多,使用頻率較高的方法為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)、膠體金免疫層析發(fā)等。在我國(guó)大部分醫(yī)院監(jiān)測(cè)乙型肝炎表面抗原一般采取酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),但該種檢測(cè)方式要求樣品濃度較高,而臨床樣本濃度較低使得檢測(cè)敏感性低從而出現(xiàn)漏診對(duì)于患者治療帶來(lái)不良影響。膠體金免疫層析分析方法是檢測(cè)在酶聯(lián)免疫吸附基礎(chǔ)之上的一種檢測(cè)方式,該種檢測(cè)方式操作簡(jiǎn)單,無(wú)需特殊設(shè)備支持均可獲得該項(xiàng)效果,因此在乙型肝炎表面抗原的檢測(cè)中較多使用,但該種檢測(cè)方式也存在一定短板,容易出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性,導(dǎo)致臨床檢測(cè)結(jié)果不穩(wěn)定。磁微?;瘜W(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)一般為儀器自動(dòng)完成檢測(cè),具有較高靈敏度、準(zhǔn)確性且無(wú)輻射,對(duì)于檢測(cè)人員安全性高。該技術(shù)采用雙抗體夾心法原理進(jìn)行檢測(cè),用抗-HBs抗體包被磁微粒,用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗-HBs抗體制備酶結(jié)合物,通過(guò)免疫反應(yīng)形成抗體-抗原-抗體-酶復(fù)合物,該復(fù)合物催化發(fā)光底物發(fā)出光子,發(fā)光強(qiáng)度與HBsAg含量成正比。檢測(cè)過(guò)程中樣品在儀器中具有緩沖液處理,利用表面活性劑能夠增加脂類和蛋白質(zhì)的溶解度的特點(diǎn),減少非特異性物質(zhì)的結(jié)合,并清除未結(jié)合的物質(zhì),利用緩沖液增強(qiáng)離子強(qiáng)度,并提供弱堿性環(huán)境,使吸附在載體上的非特異性抗體、抗原或其他蛋白質(zhì)成分遠(yuǎn)離它們的等電點(diǎn),轉(zhuǎn)變?yōu)閹Ц嘭?fù)電荷的離子,有利于其溶解而被徹底沖洗干凈,使得檢測(cè)的陽(yáng)性率獲得保證。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)不及發(fā)光檢測(cè)法具有高靈敏度和可重復(fù)性,因此具有較高漏檢率及假陽(yáng)性,加上酶的純度和反應(yīng)過(guò)程容易受到環(huán)境因素影響,使得結(jié)果準(zhǔn)確度不高。

        在本次檢測(cè)分析中80例乙型肝炎孕婦分別采取酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè),結(jié)果酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)陽(yáng)性率為80.0%,磁微粒化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)陽(yáng)性率為96.25%,提示磁微?;瘜W(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)更加理想,結(jié)果與前人報(bào)道基本一致[3]??傊?jīng)本次對(duì)比分析我們認(rèn)為對(duì)于孕婦乙型肝炎表面抗原的檢測(cè)中使用磁微?;瘜W(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)陽(yáng)性率明顯高于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),臨床可根據(jù)具體情況優(yōu)先選擇。

        參考文獻(xiàn)

        Yao QQ,Dong XL,Wang XC,et al. Hepatitis B virus surface antigen(HBsAg)-positive and HBsAg-negative hepatitis B virus infection among mother-teenager pairs 13 years after neonatal hepatitis B virus vaccination[J]. Clin Vaccine Immunol,2013,20(2):269-275.

        中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì),中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì). 慢性乙型肝炎防治指南(2015 年更新版)[J]. 臨床肝膽病雜志,2015,31(12):1941-1960.

        邱文杰. 酶聯(lián)免疫吸附與磁微?;瘜W(xué)發(fā)光法檢測(cè)乙型肝炎病毒的對(duì)比研究[J].世界臨床醫(yī)學(xué),2016,,10(17):241-242.

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