胡長(zhǎng)玉 ，葉玉娟 ，馬寅集 ，馬雪瀧 ，房江育

（1.黃山學(xué)院生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，安徽黃山 245041；2.安徽省祁門(mén)紅茶發(fā)展有限公司，安徽祁門(mén)245600）

茶樹(shù)為雙子葉植物，其種子中肥厚的兩片子葉里面積累有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，供給茶籽萌發(fā)時(shí)期和幼苗早期生長(zhǎng)階段對(duì)養(yǎng)分的需要[1]。在生產(chǎn)實(shí)踐中茶樹(shù)實(shí)生苗在苗期是不需要人為補(bǔ)充肥料的。隨著科學(xué)界揭示茶樹(shù)根系為體內(nèi)茶氨酸等氨基酸的合成部位[2]，因而人們可以通過(guò)氣霧栽培等措施不斷獲取茶苗根系，使其成為獲取茶氨酸等天然產(chǎn)物的重要原料[3]。為了使得茶籽苗在氣霧栽培前的剪根環(huán)節(jié)獲得更多的氨基酸，對(duì)茶籽苗噴施N、PK、NPK三種葉面肥，比較茶苗生長(zhǎng)以及根系中的氨基酸含量差異。本結(jié)果也將為氣霧栽培葉面肥的噴施具有指導(dǎo)意義。

1 材料與方法

1.1 茶籽萌發(fā)與栽培

將成熟的鳩坑品種茶樹(shù)種子保存于實(shí)驗(yàn)室7～13oC，相對(duì)濕度40～50%環(huán)境條件下，次年3月20～23日后在室內(nèi)用自來(lái)水浸泡，每天清洗種子2次，大約15d后將沉入水底、種皮開(kāi)裂的茶樹(shù)種子取出，按照行距10cm/株，播種于大棚里面的珍珠巖中（圖1）。每天觀察珍珠巖的濕度，必要時(shí)噴水：以珍珠巖抓在手中捏成團(tuán)，伸手即散開(kāi)為噴水標(biāo)準(zhǔn)。5月5～8日后茶苗陸續(xù)破土。從6月5日～7月24日前期的40d中，每周?chē)娛┮淮稳~面肥共噴 5次，以噴自來(lái)水為對(duì)照。葉面肥有3種：N肥為0.1%尿素，PK肥為0.2%KH2PO3，NPK肥為單周?chē)?.1%尿素和雙周?chē)?.2%KH2PO3。

1.2 茶苗生長(zhǎng)測(cè)量與生化指標(biāo)測(cè)定

將茶苗從珍珠巖中挖出，每個(gè)處理隨機(jī)取40株，用自來(lái)水洗凈根上的珍珠巖，用吸水紙快速吸下表面水分，稱(chēng)苗重和根重（根重以10株為一個(gè)試驗(yàn)單位稱(chēng)量），計(jì)數(shù)葉片數(shù)，測(cè)量地上高、最大葉片的長(zhǎng)和寬、主根長(zhǎng)；用Dualex便攜式植物多酚-葉綠素儀（法國(guó)Force-A公司）測(cè)定第三片葉片中葉綠素含量、茶多酚含量以及N平衡指數(shù)。用多功能酶標(biāo)儀（奧地利Spectra Max i3x）測(cè)定茶苗根系中的游離氨基酸總量[4]。根系中茶氨酸含量參照國(guó)標(biāo)用HPLC（大連依利特分析儀器有限公司3100高效液相色譜儀）法測(cè)定[5]，色譜柱為依利特 AAK氨基酸專(zhuān)用柱。用SPSS20.0對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

觀察各處理下茶苗的形態(tài)（圖1），可以看出葉面肥對(duì)茶苗早期的生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用，表現(xiàn)在茶苗普遍增高，葉片增多，變大，根系更加發(fā)達(dá)。除了N肥處理下根系色澤有褐化外，其余處理和對(duì)照的根系皆為純白色。

圖1 噴施葉面肥后的茶苗（從左往右：左1，對(duì)照；左2，N肥；左3，PK肥；左4：NPK肥）

除根重在各個(gè)處理中沒(méi)有差異外（根重顯著性水平p=0.58），茶籽苗其余8個(gè)指標(biāo)在不同處理之間的差異均達(dá)到顯著或極顯著水平（p＜0.5或0.1）。由此，必須通過(guò)多重比較進(jìn)一步了解究竟哪些處理之間有差異。

對(duì)需要進(jìn)一步分析的8個(gè)指標(biāo)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)后，有4個(gè)指標(biāo)包括苗重、地上高、最大葉片和多酚含量等在各處理中的顯著性p＜0.1，表明不同處理之間的方差不齊，因此選擇“Tamhane's T2(M)”方法進(jìn)行兩兩比較[6]；而另外4個(gè)指標(biāo)包括葉片數(shù)、根長(zhǎng)、葉綠素含量和N平衡指數(shù)的方差檢驗(yàn)結(jié)果是齊性（p＞0.1），所以選擇”S-N-K”方法比較各處理均值[6]。

與不施肥的茶籽苗相比，噴施N肥和NPK葉面肥能夠顯著或極顯著地增加苗重（見(jiàn)表1）：N肥苗重提高28.91%，NPK肥苗重則提高64.84%，而噴PK肥后苗重雖然略有提高，卻未達(dá)到顯著水平；由于葉面肥噴施后茶苗根重方差分析不顯著，所以不同處理之間根重的不同源于個(gè)體間的誤差。噴施葉面肥后主根長(zhǎng)度受到抑制，比對(duì)照縮短7.96%～12.47%。噴施PK肥后茶苗地上高度保持不變，而N肥和NPK處理均極顯著地促進(jìn)了茶苗地上部的生長(zhǎng)，苗高分別是對(duì)照的1.27倍和1.42倍；與此類(lèi)似的趨勢(shì)還有葉片數(shù)，N肥處理展葉數(shù)是對(duì)照的1.13倍，NPK處理是對(duì)照的1.19倍，而PK肥的影響不顯著。此外，噴施3種葉面肥后茶苗最大葉片的面積都有增加，均達(dá)到極顯著水平，其中PK肥增加41.03%，N肥增加51.17%，而NPK增加達(dá)到95.81%。

表1還表明，3種葉面肥不同程度地提高了茶苗葉片中葉綠素的含量，顯著降低葉片中的茶多酚含量，從而有效地提高植株的N平衡指標(biāo)，它是葉綠素含量與茶多酚含量的比值。對(duì)N平衡指標(biāo)按照從小到大的排序分別為PK肥處理，其葉綠素含量是對(duì)照的0.64倍，茶多酚含量?jī)H為對(duì)照的82.22%，N平衡指數(shù)是對(duì)照的1.39倍；其次為NPK處理，其葉片中葉綠素含量是對(duì)照的1.32倍，茶多酚含量是對(duì)照的82.31%，NN平衡指標(biāo)是對(duì)照的2.17倍；效果最明顯的是N肥處理，其葉綠素含量是對(duì)照的1.82倍，茶多酚含量?jī)H僅是對(duì)照的70.08%，N平衡指數(shù)是對(duì)照的2.17倍。

與對(duì)照相比，3種葉面肥中PK肥有降低根系氨基酸含量的趨勢(shì)，而N肥和NPK綜合處理能夠有效提高茶苗根系中游離氨基酸含量和茶氨酸含量（見(jiàn)表2）。在游離氨基酸總量的增加中可以發(fā)現(xiàn)，N肥對(duì)主根的作用大于NPK肥，而NPK肥料對(duì)側(cè)根的作用大于主根，前者使主根中的游離氨基酸總量提高87.04%，后者使側(cè)根中的游離氨基酸總量提高1.04倍。從茶苗整個(gè)根系中游離氨基酸總量來(lái)看，NPK綜合施肥的效果顯著，提高了88.99%，N肥次之，提高了42.73%。從茶氨酸含量來(lái)看，無(wú)論是主根還是側(cè)根，NPK綜合肥料的促進(jìn)作用均大于N肥單獨(dú)處理：前者使得根系中茶氨酸增加1.01倍，后者僅僅增加9.38%。由此可見(jiàn)，N肥對(duì)游離氨基酸含量的貢獻(xiàn)是促進(jìn)多種氨基酸的合成，而NPK綜合噴施主要是促進(jìn)了根系中茶氨酸的合成。

表1 三種葉面肥處理后茶苗生長(zhǎng)及其相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定

表2 三種葉面肥處理后茶苗根系中氨基酸含量

3 討論與結(jié)論

盡管茶籽苗能夠依靠?jī)善屎竦淖尤~完成早期幼苗的生長(zhǎng)，但是外源噴施葉面肥，能夠在一定程度上促進(jìn)它們更快地生長(zhǎng)。三種葉面肥均能促進(jìn)茶苗的生長(zhǎng)，只是在程度上有差異，綜合各指標(biāo)的情況，NPK綜合噴施肥效最明顯，其次為N肥，PK肥的作用相對(duì)較弱，說(shuō)明N、P、K三種元素在茶苗早期生長(zhǎng)中均具有正向調(diào)節(jié)，N元素噴施后，與生長(zhǎng)速度有明顯正相關(guān)，P和K與生長(zhǎng)速度正相關(guān)性相對(duì)較弱。而N、P、K三種元素組合后具有顯著的協(xié)同效應(yīng)，這與這三種元素對(duì)植物的一般生理作用是一致的[7]。葉面肥對(duì)茶苗地上部生長(zhǎng)的促進(jìn)作用比對(duì)根系更加明顯。葉面肥對(duì)茶苗根系生長(zhǎng)的調(diào)節(jié)表現(xiàn)為不影響根重，但限制主根的伸長(zhǎng)，由此推斷NPK葉面肥可能增加生根量或者促進(jìn)根系變粗，具體是哪種方式有待進(jìn)一步確認(rèn)。由于噴施NPK后茶苗鮮重增加，但根系鮮重不變，所以該生物量源自于肥料對(duì)地上部的生長(zhǎng)有促進(jìn)。通過(guò)實(shí)地測(cè)量發(fā)現(xiàn)，苗重與地上部高度、葉片數(shù)量以及最大葉片面積均呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)分別為0.774、0.847和0.983。因此，葉面肥對(duì)苗期葉片的生長(zhǎng)具有顯著的促進(jìn)作用，其中最大葉片葉面積能夠靈敏地反映茶苗生長(zhǎng)狀況。此外，葉面肥極大地促進(jìn)葉片中葉綠素合成，顯著降低多酚的含量，從而有效提高 N平衡指數(shù)。

葉面肥對(duì)根系的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)沒(méi)有地上部那么明顯和全面。從根量和色澤來(lái)看，葉面僅僅噴施N肥將不利于茶苗根系的生長(zhǎng)。而NPK綜合噴施后能夠使茶苗根系保持潔白的色澤，表現(xiàn)出健康的狀態(tài)。然而，葉面肥深刻地影響著茶苗地下部根系中氨基酸的含量。N肥表現(xiàn)出對(duì)根系尤其是主根中各類(lèi)氨基酸的全面增加，PK肥對(duì)根系氨基酸有負(fù)向調(diào)節(jié)，但在與N肥共同作用下，NPK三種元素對(duì)根系中茶氨酸等氨基酸的合成顯著提高，顯示出這三種元素對(duì)茶苗根系茶氨酸等氨基酸的協(xié)同作用。

此外，本試驗(yàn)中茶苗主根和側(cè)根中無(wú)論是游離氨基酸總量還是茶氨酸含量，皆為主根要高于側(cè)根。這與一些研究不完全一致[8]。究其原因，可能與不同試驗(yàn)采取的樣品的生長(zhǎng)階段有關(guān)系。大部分研究者都以三年生以上的茶苗或者茶樹(shù)為研究對(duì)象，而本試驗(yàn)采集的樣品處于種子剛剛萌發(fā)后的幼苗，還帶著子葉，作為幼苗的重要器官，主根尚處于生長(zhǎng)旺盛階段，其吸收與合成作用尚不能完全由側(cè)根取代而擔(dān)任，因此有較高的氨基酸含量。