吳　妍　陳家豪　鐘楚欣　李玉君　張宏濤

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高效液相色譜法測(cè)定培養(yǎng)基中的苯磺隆

吳妍陳家豪鐘楚欣李玉君張宏濤

（廣東中科英?？萍加邢薰?廣東佛山 528000）

采用高效液相色譜法，使用C18柱和紫外檢測(cè)器，采用液液萃取法對(duì)藻類培養(yǎng)基中的苯磺隆進(jìn)行分析，線性范圍為0.100~20.0mga.i./L，相關(guān)系數(shù)為0.9994、0.9993。LOD為0.00581mga.i./L，LOQ為0.0194mga.i./L。樣品回收率均在80%～120%，RSD小于5%。

苯磺隆；液液萃取；高效液相色譜

苯磺隆由D.T.Ferguson報(bào)道，是美國(guó)杜邦公司開發(fā)的一種新型、高效、低毒的磺酰脲類麥田除草劑，對(duì)一年生和多年生闊葉雜草有防除特效，用藥量極少，毒性低，殘留期短，對(duì)麥類和下茬作物安全[1]。目前的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)多采用高效液相色譜法[2]，針對(duì)不同分析樣品，樣品前處理方法也有所不同。本文采用高效液相色譜法，通過(guò)試驗(yàn)研究采用乙酸乙酯萃取后旋蒸，用甲醇氨水溶液溶解上樣。

1 試驗(yàn)部分

1.1 試驗(yàn)用水、試劑與儀器

試驗(yàn)用水：藻類培養(yǎng)基；試劑：甲醇（色譜純）、乙腈（色譜純）、磷酸（色譜純）、氨水（分析純）、乙酸乙酯（色譜純）、氯化鈉（分析純）、無(wú)水硫酸鈉（分析純）、苯磺隆標(biāo)準(zhǔn)品（純度為97.5 %）；儀器：Alliancee2695 液相色譜儀、平行蒸發(fā)儀。

1.2 分析條件

儀器：Alliancee2695 液相色譜儀；色譜柱：XBridgeC18 (4.6×150 mm)，粒徑5μm；柱箱溫：35.0℃；流動(dòng)相：甲醇：0.1%磷酸溶液：乙腈=5.0%:60.0%:35.0%；流速：1.000 mL/min；進(jìn)樣體積：20 μL；檢測(cè)器：UV（紫外檢測(cè)器）；檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱取0.00301 g受試物標(biāo)準(zhǔn)品（純度為97.5 %）于10 mL容量瓶中，加入少量甲醇溶解后，用甲醇將容量瓶定容至刻度，配制成濃度為293 mga.i./L標(biāo)準(zhǔn)溶液，作為貯備液。取293 mga.i./L標(biāo)準(zhǔn)溶液，用甲醇氨水溶液（V甲醇∶V氨水溶液=1∶1；氨水溶液：V氨水∶V水=1∶500 ）稀釋，配制下表8個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度。

表1 　分析方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)——系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液配制表

1.3.2 前處理方法

取已用磷酸調(diào)pH至3.00 ~4.00 的試驗(yàn)溶液100 mL于分液漏斗中，加入適量氯化鈉搖勻溶解后，分別加入30.0 mL乙酸乙酯，液液萃取2次，收集有機(jī)層溶液通過(guò)無(wú)水硫酸鈉過(guò)濾至裝有20 μL濃氨水的旋蒸瓶中，減壓蒸干液體（50 °C），加入1.00 mL甲醇氨水溶液（V甲醇∶V氨水=1∶1），超聲混合均勻后，通過(guò)0.22 μm濾膜過(guò)濾后上機(jī)待測(cè)。

1.3.3 添加回收率試驗(yàn)

添加回收試驗(yàn)設(shè)計(jì)藻類培養(yǎng)基中的回收試驗(yàn)，共有2個(gè)濃度組，每個(gè)濃度組均設(shè)5個(gè)平行，同時(shí)設(shè)不加苯磺隆標(biāo)準(zhǔn)品的空白對(duì)照，空白對(duì)照組不設(shè)平行。見表2。

表2 　分析方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)——添加回收試驗(yàn)分組及濃度

按上述前處理方法和分析條件進(jìn)行測(cè)定。

1.3.4 定量方法

建立外標(biāo)曲線，通過(guò)比較標(biāo)準(zhǔn)溶液和試驗(yàn)溶液中苯磺隆的峰面積，外標(biāo)法計(jì)算出試驗(yàn)溶液中受試物的濃度。

2 結(jié)果

2.1 專屬性檢查

取空白溶液和苯磺隆標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣測(cè)試（色譜圖見圖1、圖2）。結(jié)果表明，在苯磺隆保留時(shí)間處，空白溶液沒有色譜峰出現(xiàn)，苯磺隆標(biāo)準(zhǔn)溶液有色譜峰出現(xiàn)，符合要求。

圖1 　空白溶液的色譜圖

圖2 　苯磺隆標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖

2.2 檢測(cè)限（LOD）、定量限（LOQ）與精密度

用0.100 mga.i./L的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣分析，得到信噪比（S/N）為51.6，以S/N≥3計(jì)算LOD為0.00581 mga.i./L，以S/N≥10 計(jì)算LOQ為0.0194 mga.i./L。以0.100 mga.i./L的標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)進(jìn)樣6次所得峰面積的RSD為2.00 %，符合要求。

2.3 線性范圍

以系列標(biāo)準(zhǔn)溶液分別進(jìn)樣，測(cè)定其峰面積（見下表），線性方程1為Y=2.774 ×104X-3.769 ×103，R2=0.9988 ，r=0.9994 ；線性方程2為Y=2.820 ×104X-1.686 ×102，R2=0.9986 ，r=0.9993 ，均符合要求。

表3 　分析方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)——線性范圍試驗(yàn)結(jié)果表1

表4　 分析方法學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn)——線性范圍試驗(yàn)結(jié)果表2

2.4 添加回收率試驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果表明，低濃度樣品平均回收率為85.2 %，RSD為3.66 %；高濃度樣品平均回收率為93.6 %，RSD為0.239 %，樣品回收率均在80 ～120 %，RSD小于5 %，符合要求。由此上述試驗(yàn)結(jié)果可得出，該方法的精密度與準(zhǔn)確度均較好。

3 討論

苯磺隆在堿性環(huán)境穩(wěn)定，如用0.1 %氨水做流動(dòng)相，則出峰快而尖；雖然用0.1 %磷酸做流動(dòng)相時(shí)出峰慢，但其分離度更好，為更好分離雜質(zhì)，減少對(duì)主峰及定量的影響，故本方法選擇用甲醇∶0.1 %磷酸溶液∶乙腈=5.0 %∶60.0 %∶35.0 %作為流動(dòng)相。

選用甲醇氨水溶液（V甲醇∶V氨水=1∶1）作為溶樣溶劑是基于對(duì)苯磺隆溶解度及穩(wěn)定性的考慮，當(dāng)氨水比例過(guò)高或過(guò)低都會(huì)對(duì)其穩(wěn)定性造成影響。而在前處理時(shí)加入磷酸調(diào)pH至3.00~4.00是為提高萃取效率，以求做到更低濃度的定量。

4 小結(jié)

本方法檢測(cè)苯磺隆具有精密度高、準(zhǔn)確、分離效果好、回收率高等優(yōu)點(diǎn)，能準(zhǔn)確測(cè)得藻類培養(yǎng)基中苯磺隆的含量，且本方法線性范圍寬，檢測(cè)限與定量限更低，靈敏度更高，最小檢測(cè)濃度可達(dá)0.100 mga.i./L，是一種理想的分析方法。

[1]王天斌,柳梅,苯磺隆的高效液相色譜分析[J].化工標(biāo)準(zhǔn).計(jì)量.質(zhì)量,2005,25(2):22-24

10.3969/j.issn.2095-1205.2019.04.29

吳妍(1990- )，女，廣東潮州人，研究方向：環(huán)境毒理檢測(cè)及理化分析。

張宏濤(1978- )，男，吉林雙遼人，工程師，研究方向：毒理學(xué)研究。

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2095-1205(2019)04-51-02