李玉君　鐘楚欣　陳家豪　吳　妍　張宏濤

?

麥草畏原藥高效液相色譜分析方法試驗

李玉君鐘楚欣陳家豪吳妍張宏濤

（中科英?？萍加邢薰?廣東佛山 528000）

麥草畏是一種安息香酸系列除草劑。采用高效液相色譜法，以乙腈＋0.1%磷酸（60:40）為流動相，使用ACEExcel 5 SUPERC18不銹鋼柱，流速為1.0 mL/min，紫外檢測器，檢測波長為220 nm。結(jié)果表明，該分析方法的線性相關(guān)系數(shù)為0.9 999，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.210，平均回收率為99.2%。結(jié)果表明，麥草畏保留時間為4.963 min，線性相關(guān)系數(shù)為0.999 987和0.999 971。在10個添加水平范圍內(nèi)，回收率分別為98.5～100.5 %和100.3～100.7 %，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差( RSD）分別為1.05 %和0.178 %，方法檢出限為0.00 704 mga.i./L。該方法簡單、快速、靈敏度高、準(zhǔn)確度好，能夠滿足蔬菜中麥草畏殘留量的檢測要求。

麥草畏；原藥；高效液相色譜；分析

麥草畏（dicamba），化學(xué)名稱為3,6-二氯-2-甲氧基苯甲酸，商品名為百草敵、麥草威，由美國維爾斯科爾化學(xué)公司（VelsicolChemicalCorp）于1961年創(chuàng)制，1963年在加拿大取得登記，1967年首次作為除草劑報道并取得美國登記，20世紀(jì)90年代傳入我國[1]。麥草畏屬安息香酸系列除草劑，作用機理屬于激素型除草劑[3]。據(jù)統(tǒng)計，2016年全球麥草畏市場規(guī)?？蛇_(dá)2.9億美元，美國是麥草畏應(yīng)用第一市場，中國是全球第二應(yīng)用市場，主要登記于轉(zhuǎn)基因種子（大豆、玉米）[2]。

麥草畏，純品為白色結(jié)晶，分子量為221.04 ，易溶于水，在農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)中容易發(fā)生遷移而引起土壤和地下水等污染，對水質(zhì)安全和人類健康造成危害[3-4]。因此，高效的、準(zhǔn)確的測定方法是研究水中麥草畏的殘留的關(guān)鍵。

1 試驗部分

1.1 試劑與儀器

麥草畏標(biāo)準(zhǔn)品，乙腈：色譜純；磷酸：色譜純；實驗用水為超純水。AllianceE2695 型高效液相色譜儀（Waters，具紫外檢測器和自動進(jìn)樣器）；Empower色譜工作站；色譜柱：ACEExcel 5 SuperC18 ，250 mm×4.6mm（5μm），電子分析天平：型號CPA225 D，賽多利斯，精度0.00001。

1.2 液相色譜操作條件

流動相制備：吸取1.00 mL磷酸，用水定容至1000 mL，搖勻，配制得到0.1%磷酸溶液，過濾膜過濾脫氣后備用。流速：1.00 mL/min；柱溫：35 ℃；檢測波長：220 nm；進(jìn)樣體積：20.0 μL，流動相：乙腈：0.1 %磷酸溶液（60:40），保留時間：約4.9 min。

麥草畏標(biāo)樣的高效液相色譜圖見圖1。

圖1 麥草畏標(biāo)樣高效液相色譜圖

1.3 測定步驟

1.3.1 溶液的配制

分別準(zhǔn)確稱取麥草畏標(biāo)樣（98 %）0.01 g（精確至0.0002 g），置于10 mL容量瓶中，用乙腈溶解定容，搖勻，配制成母液1000 mg/L。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線設(shè)計

用乙腈水溶液（V乙腈∶V超純水=1∶1）將母藥進(jìn)行稀釋，配制一系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，分別為：0.0100 mg /L，0.0200 mg/L，0.0500 mg /L，0.100 mg /L，0.200 mg/L，0.500 mg/L，1.00 mg/L，2.00 mg/L，5.00 mg/L，10.0 mg /L。按1.2方法每個濃度采集3針。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜柱的選擇

HPLC檢測麥草畏需要用到0.1%磷酸溶液作為流動相。ACEExcel 5 SuperC18 色譜柱具有擴展pH穩(wěn)定性的超惰性色譜柱，可用于pH1.5~11.5 之間的LC/MS兼容緩沖液，用于麥草畏的測定時，穩(wěn)定性高，重現(xiàn)性好。

2.2 色譜條件的選擇

通過HPLC的紫外檢測器（UV）進(jìn)行全波長掃描，得到麥草畏的紫外波長掃描圖。麥草畏在200～400 nm間有較大的吸收?？紤]到雜質(zhì)響應(yīng)值的影響，將檢測波長定220 nm。

根據(jù)麥草畏的理化性質(zhì)，選擇以乙腈＋0.01 %磷酸溶液為流動相，以ACEExcel 5 SuperC18 為色譜柱，柱溫35 ℃，將不同體積比的流動相在色譜柱上進(jìn)行試驗。當(dāng)乙腈與0.01 %磷酸溶液以60∶40 的比例作流動相，流速為1.000 mL/min時，麥草畏響應(yīng)值較高，且基線平穩(wěn)，峰形對稱。

2.3 分析方法的線性相關(guān)性試驗與檢出限

在設(shè)定的色譜條件下，對不同濃度的麥草畏標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行HPLC測定。使用Empower 3軟件采集并處理圖譜數(shù)據(jù)，以麥草畏有效成分濃度為橫坐標(biāo)，峰響應(yīng)值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

表1 　麥草畏線性結(jié)果

結(jié)果表明，在0.0100 mg/L~10.0mg/L范圍內(nèi)，麥草畏含量與色譜峰面積呈良好的線性關(guān)系。以3倍的信噪比確定麥草畏的最低檢出限為0.00704 mg/L。

2.4 分析方法的專屬性試驗

取空白溶劑（乙腈水溶液（V乙腈：V超純水=1：1））、標(biāo)準(zhǔn)溶液（10.0 mg/L）和供試品試驗溶液（10.0 mg/L）經(jīng)0.22 μm濾膜過濾后進(jìn)樣測試，各采集1針。按1.2的方法進(jìn)行測定麥草畏的含量。

2.5 分析方法的精密度試驗

取濃度0.01 mg/L和10.0 mg/L分別連續(xù)進(jìn)樣6針，測得麥草畏的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為1.864 和0.210 。

表2　 精密度試驗結(jié)果

2.6 分析方法的添加回收與重復(fù)性試驗

麥草畏在25 ℃條件下在水中的溶解度為6.5 g/L，本實驗設(shè)計1個空白對照組和2檔試驗組，每檔濃度5個重復(fù)。對空白對照組與2檔試驗濃度組一共11 個前處理后得到的樣品各采集1針?；|(zhì)為曝氣自來水。分別往兩個兩個試驗組添加一定量的麥草畏標(biāo)樣。前處理方法：取1~2 mL試驗溶液經(jīng)0.22 um過濾膜過濾后，按1.3方法進(jìn)行測定麥草畏的含量。測得麥草畏的平均回收率分別是98.5~100.5 %和100.3~100.7 %，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為1.05 %和0.178 %。如表3所示。

表3 　添加回收試驗結(jié)果

3 結(jié)論

試驗結(jié)果表明，本方法檢測麥草畏原藥有較高的準(zhǔn)確度和精密度，線性關(guān)系良好。方法具有簡單、快速、準(zhǔn)確及分離效果好的優(yōu)點，是進(jìn)行蔬菜中麥草畏的殘留檢測較理想的分析方法。

[1]陳勇,邵守言,朱桂生,等.麥草畏市場現(xiàn)狀及合成路線研究進(jìn)展(Ι)[J].農(nóng)藥研究,2018(05):11-14.

[2]楊益軍.中國除草劑產(chǎn)業(yè)的現(xiàn)狀及主流產(chǎn)品市場分析[J].今日農(nóng)藥,2017(12):36-41.

[3]張吉蘋,蔣新娣,黃薇,等.基于分子絡(luò)合的分散液液微萃取與高效液相色譜聯(lián)用檢測環(huán)境水樣中2種苯氧羧酸類除草劑[J].色譜,2018(5):458-463.

[4]金黨琴,定邦東,龔愛琴,等.快速溶劑萃取高效液相色譜法測定蔬菜中烯禾啶和麥草畏殘留[J].學(xué)試劑,2018,40(4):357- 360.

10.3969/j.issn.2095-1205.2019.04.23

李玉君(1992- )，女，廣東佛山人，助理工程師，研究方向：環(huán)境毒理檢測及理化分析。

張宏濤(1978- )，男，吉林雙遼人，工程師，研究方向：毒理學(xué)研究。

S482

C

2095-1205(2019)04-40-02