李 芳，余 敏，羅 雄（.成都蜀星飼料有限公司，成都 6633；.四川省威艾盛動物營養(yǎng)有限公司，成都 6633）

微量元素在體內(nèi)占比極少，但具有重要的生理功能，關(guān)系到人和動物身體健康；維生素也是動物生長發(fā)育必需的，體內(nèi)合成極少或不能合成必須從日糧中獲取。動物配合飼料的原料比較單一，不能滿足動物對微量元素和維生素的需求，因此需額外添加。將微量元素和維生素配制成復(fù)合預(yù)混合飼料，但由于維生素A自身含有5個共軛雙鍵，本身高度不穩(wěn)定容易發(fā)生加成、氧化、聚合、裂解和脫水等反應(yīng)，光照、氧氣、熱、自由基以及金屬離子等都會引發(fā)或加快上述反應(yīng)，增加維生素A的損失[1]。有研究報道，不同工藝生產(chǎn)的維生素A的穩(wěn)定性存在較大差異[2]。關(guān)于維生素A在高濃度的復(fù)合預(yù)混合飼料中穩(wěn)定性研究報道較少，本研究設(shè)計0.4%的復(fù)合預(yù)混合飼料，考察不同包被微量元素在不同環(huán)境中對維生素A穩(wěn)定性的影響。

1 材料與方法

1.1 復(fù)合預(yù)混合飼料的配制

所用微量元素（CuSO4·5H2O、MnSO4·H2O、FeSO4·H2O、ZnSO4·H2O）均為飼料添加劑，粉末狀硫酸銅和包被CuSO4·5H2O、FeSO4·H2O、ZnSO4·H2O由成都蜀星飼料有限公司提供（按201610796067.X專利生產(chǎn)），維生素預(yù)混合飼料由中糧集團提供，配方組成與含量見表1，試驗分組情況見表2。

表1 仔豬復(fù)合復(fù)合預(yù)混合飼料

按照要求配制試驗樣品，每個組配制2 kg，分成9份，裝入自封塑料袋中，再置于黑色塑料袋中，3份常溫環(huán)境，試驗期間溫度25～30℃，濕度65%；3份陰涼庫，溫度20℃，濕度55%，避光條件；3份于恒溫恒濕箱中（上海恒一，LHS-150HC-Ⅱ），溫度設(shè)置為40℃，濕度65%。取樣時間分別為試驗的第0、8、16和24天，每次取樣后立即檢測其中維生素A的含量。

表2 試驗分組情況

1.2 檢測方法

所有樣品中維生素A含量均采用國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 17817-2010規(guī)定的測定方法進行檢測。

1.3 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 20統(tǒng)計分析軟件進行單因素方差分析，同時采用LSD進行最小顯著性差異比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣品檢測結(jié)果

根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法進行繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線以及回收率的驗證。標(biāo)準(zhǔn)曲線線性回歸相關(guān)系數(shù)R2=1.0000，加標(biāo)回收率為102.2%。試驗樣品零時檢測結(jié)果見表3。

表3 樣品中維生素A含量

由表3可知，平行樣間差異小，試驗料樣品間差異不顯著（P=0.99）。

2.2 常溫環(huán)境存放后的試驗結(jié)果

常溫條件下維生素A的損失率情況見表4。

表4 常溫條件下維生素A的損失率情況 %

由表4可知，常溫條件第8天，3組效果最佳，相比7組、8組維生素?fù)p失率分別降低6.10%、8.91%；第16天，6組相比7組、8組維生素?fù)p失率分別降低12.04%、7.36%；第24天，2組損失率最低，比8組低10.09%?？傮w來說包被各組維生素A的損失率較對照大幅降低。通過LSD法比較，各組維生素A的損失率差異顯著。

2.3 高溫高濕環(huán)境試驗結(jié)果

高溫高濕條件下維生素A的損失率情況見表5。

表5 高溫高濕條件下維生素A的損失率情況 %

由表5可知，第8天時除3組外其余試驗組維生素A的損失率均明顯低于對照組；試驗結(jié)束時各試驗組維生素A的損失率明顯低于對照組，其中1組效果最佳，維生素A的損失率比8組低18.63%。單因素方差方差分析，發(fā)現(xiàn)維生素A損失率除第8天時2組和5組差異不顯著外，其余各組差異均顯著。表4和表5比較不難發(fā)現(xiàn)溫度對維生素的影響遠(yuǎn)大于金屬離子的影響。其原因可能是溫度提高水分、金屬離子的活性，加速其對維生素A破壞。

2.4 陰涼庫試驗結(jié)果

陰涼庫中維生素A損失率情況見表6。

表6 陰涼庫中維生素A損失率情況 %

由表6可知，試驗全期，5組的損失率最低，相比常規(guī)組7組維生素?fù)p失率降低12.78%；陰涼庫房中維生素A損失率除第16天1和4組差異不顯著外，其余各組差異極顯著。

3 討論

3.1 微量元素對維生素A的影響

復(fù)合預(yù)混合飼料存儲過程中維生素A容易受到環(huán)境溫度、水分、pH以及金屬元素等因素的影響。段俊紅等研究發(fā)現(xiàn)，銅是影響維生素A的主要元素，不同元素影響維生素A損失率順序為Cu＞Zn＞Fe，與本試驗結(jié)果一致；維生素A的損失率呈現(xiàn)早期較慢，后期較快的特征，與本試驗結(jié)果不一致，本試驗結(jié)果呈現(xiàn)早期變化幅度大，后期變化相對平緩，其原因可能是配方中微量元素來源、濃度以及存儲溫度不同[3]。

3.2 濕度對維生素A的影響

維生素A的共軛雙鍵容易發(fā)生異構(gòu)化反應(yīng)，光是引起異構(gòu)化的主要因素，除了光以外，研究指出極性介質(zhì)亦是導(dǎo)致維生素A發(fā)生異構(gòu)化的重要因素[4]。研究報道指出，濕度對維生素A的影響大于溫度[5]。Rutkowski等研究發(fā)現(xiàn)，不同相對濕度濕度環(huán)境中維生素A的留存率差異顯著。另有研究指出，復(fù)合預(yù)混合飼料中配方結(jié)晶水含量顯著影響維生素A的留存率。本試驗中采用兩種硫酸銅原料，一種是含5個結(jié)晶水顆粒硫酸銅，一種是含2～3個結(jié)晶水的粉狀硫酸銅，第16天時，在常溫和陰涼庫中單包被硫酸銅組（1、2）和對照組（7、8），粒狀硫酸銅效果均優(yōu)于粉狀硫酸銅效果，其原因可能是硫酸銅中表面銅離子數(shù)量作用于維生素的效果大于結(jié)晶水含量的影響。在高溫環(huán)境中這表現(xiàn)出相反的結(jié)果，顆粒硫酸銅效果差，則證明高溫與結(jié)晶水對維生素A的破壞有協(xié)同作用。說明結(jié)晶水對維生素A穩(wěn)定性的影響與環(huán)境溫度、原料粒度有關(guān)。

3.3 溫度對維生素A的影響

Crank等指出，熱會導(dǎo)致維生素A發(fā)生異構(gòu)化反應(yīng)，導(dǎo)致維生素A變性失活[6]。事實上不同復(fù)合預(yù)混合飼料在不同貯存溫度下維生素A損失不同，溫度越高損失越大，飼料加工過程應(yīng)當(dāng)重點關(guān)注膨化、調(diào)制制粒工段對維生素A的影響[7]。對于濃度較高的復(fù)合預(yù)混合飼料重點關(guān)注載體水分或原料結(jié)晶水含量。Parrish等報道，維生素A冷藏貯存損失極少，但在常溫條件下?lián)p失較大，這與本試驗各包被組結(jié)果一致[8]。

4 結(jié)論

復(fù)合預(yù)混合飼料中對維生素A損失有影響的因素很多，溫度、濕度、金屬離子，此外還與載體的pH、惰性、吸附性以及復(fù)合預(yù)混合飼料中其他成分的理化性質(zhì)等有關(guān)。