汪靈，吳至佛，鄧增艷，劉桂，劉君杰，黃俊輝

（中南大學(xué) 1.湘雅醫(yī)院 腫瘤科；2.湘雅口腔醫(yī)院 病理科，湖南 長沙410008）

乳腺癌是全球女性最常見的惡性腫瘤，而其發(fā)生機(jī)制尚未完全闡明，有研究[1-2]表明可能與細(xì)胞自噬和凋亡有關(guān)。細(xì)胞凋亡抑制蛋白（inhibitors of apoptosis proteins，IAPs）可通過影響細(xì)胞凋亡使腫瘤得以存活和增殖，是潛在的抗腫瘤治療靶點(diǎn)之一[3-4]。細(xì)胞凋亡抑制蛋白1（cellular IAP1，cIAP1）和X染色體連鎖凋亡抑制蛋白（X chromosome-linked IAP，XIAP）均屬IAPs家族，cIAP1參與了多種外在凋亡信號(hào)通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)，XIAP蛋白是IAP家族成員中作用最強(qiáng)的半胱天冬酶（cysteinyl aspartate-specific protease，caspase）抑制劑[5]，雖然已發(fā)現(xiàn)兩者在多種腫瘤組織中高表達(dá)，但在乳腺癌中關(guān)于cIAP1和XIAP的研究相對(duì)較少。caspase家族是細(xì)胞凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)的真正執(zhí)行者，caspase-3作為下游效應(yīng)型caspase，是調(diào)控細(xì)胞凋亡的樞紐。探究caspase-3在乳腺癌中的表達(dá)可有效評(píng)估組織凋亡特性及其在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用，caspase-3的表達(dá)水平與乳腺癌患者預(yù)后的關(guān)系尚存在爭(zhēng)議。文獻(xiàn)研究表明新輔助化療可能會(huì)改變?nèi)橄侔┑慕M織病理學(xué)特性或生物學(xué)因子的表達(dá)情況，而新輔助化療是否對(duì)蛋白表達(dá)與乳腺癌患者的預(yù)后關(guān)系產(chǎn)生影響仍需進(jìn)一步研究。

本研究通過檢測(cè)乳腺癌組織、乳腺纖維腺瘤和正常乳腺組織中cIAP1、XIAP和caspase-3的表達(dá)情況，并結(jié)合乳腺癌數(shù)據(jù)庫中的患者資料，旨在探討3個(gè)凋亡相關(guān)蛋白與乳腺癌的臨床病理參數(shù)的聯(lián)系及其作為乳腺癌診斷和評(píng)估預(yù)后的生物學(xué)標(biāo)志物的可行性。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

收集2016年9月—2018年9月于中南大學(xué)湘雅醫(yī)院診治的99例乳腺癌患者作為實(shí)驗(yàn)組，采集其乳腺癌根治術(shù)術(shù)后標(biāo)本?；颊吣挲g26～76歲，中位年齡48歲。其中50例患者既往接受過新輔助化療，49例患者術(shù)前未接受過任何腫瘤相關(guān)治療。實(shí)驗(yàn)組中非浸潤性癌1例，特殊類型浸潤性癌4例，非特殊類型浸潤性癌94例；HER-2過表達(dá)型7例，Luminal A型11例，Luminal B型29例，三陰性乳腺癌（TNBC）52例。納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴腫瘤原發(fā)于乳腺；⑵經(jīng)病理學(xué)檢查確診為乳腺癌，有完整臨床病理資料；⑶KPS評(píng)分≥70分。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴合并其他類型惡性腫瘤；⑵遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。同時(shí)收集同期10例乳腺纖維腺瘤標(biāo)本，及6例腫瘤邊緣5 cm以上的正常乳腺組織為對(duì)照。該研究方案經(jīng)中南大學(xué)湘雅醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)cIAP1、XIAP和caspase-3蛋白的表達(dá)

抗cIAP1抗體及抗XIAP抗體購自美國Abcam公司，caspase-3抗體購自美國Affinity公司。所有標(biāo)本均采用EliVision免疫組化方法進(jìn)行檢測(cè)。組織標(biāo)本經(jīng)石蠟包埋，連續(xù)切片，厚度約4 μm。60℃烤箱烤片1 h后脫蠟水化，切片在0.01 mol/L檸檬酸鈉緩沖液中（pH6.0）高溫高壓抗原修復(fù)，用3%H2O2孵育20 min阻斷內(nèi)源過氧化物酶活性后，5%BSA封閉30 min，分別滴加cIAP1，XIAP和caspase-3一抗（工作液濃度均為1:100）4℃孵育過夜。在室溫下滴加HRP標(biāo)記的抗兔IgG孵育50 min，隨后通過DAB顯色。蘇木精復(fù)染，脫水、封片。用PBS分別代替3種蛋白的一抗作陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)。

1.3 染色結(jié)果判定

嚴(yán)格控制顯微鏡的攝片照明及參數(shù)設(shè)定條件一致，將組織切片放大200倍，隨機(jī)選取5個(gè)視野攝片，通過Image-Pro Plus 6.0對(duì)各蛋白表達(dá)情況進(jìn)行定量分析。測(cè)量每個(gè)視野中目標(biāo)組織的積分光密度及區(qū)域面積，計(jì)算平均光密度，取5個(gè)視野的平均值進(jìn)行分析。

1.4 生物信息學(xué)分析

利用Kaplan-Meier Plotter數(shù)據(jù)庫，分別根據(jù)cIAP1，XIAP和caspase-3的表達(dá)量，選擇其最佳截?cái)嘀祵⒓{入的乳腺癌病例分為兩組，比較兩組乳腺癌患者的無復(fù)發(fā)生存期的差異，分析這3種蛋白的表達(dá)量和患者預(yù)后的關(guān)系。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 24.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，Kruskal-Wallis檢驗(yàn)用于評(píng)估組間蛋白含量的差異；χ2檢驗(yàn)，F(xiàn)isher精確檢驗(yàn)來分析組間各分類變量間的關(guān)系。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 cIAP1、XIAP和caspase-3在乳腺癌組織、乳腺纖維腺瘤和正常乳腺組織中的表達(dá)

在實(shí)驗(yàn)組、良性對(duì)照組和正常對(duì)照組樣本中均可觀察到不同程度的cIAP1，XIAP和caspase-3蛋白的陽性表達(dá)，陽性染色為棕黃色或棕褐色顆粒。cIAP1陽性染色主要見于細(xì)胞質(zhì)中；XIAP和caspase-3在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核均可見表達(dá)，三者在乳腺癌中的表達(dá)情況見圖1。運(yùn)用Image-Pro Plus對(duì)各組蛋白表達(dá)情況進(jìn)行定量評(píng)估，分析發(fā)現(xiàn)，在乳腺癌組織中cIAP1、XIAP和caspase-3的表達(dá)水平均明顯高于正常乳腺組織中該蛋白的表達(dá)水平（均P＜0.05），而以上3種蛋白在乳腺癌組織和乳腺纖維腺瘤組織中的表達(dá)間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（均P＞0.05）。根據(jù)患者接受根治性手術(shù)前有無行新輔助化療，將實(shí)驗(yàn)組進(jìn)一步分為化療組和未化療組。結(jié)果顯示，cIAP1、XIAP和caspase-3的表達(dá)水平在化療組和未化療組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（均P＞0.05）（表1）。

2.2 cIAP1、XIAP 及 caspase-3的表達(dá)和乳腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系

為了探討cIAP1、XIAP及caspase-3的表達(dá)與乳腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系，分別以cIAP1、XIAP和caspase-3平均光密度值的中位數(shù)為臨界值將99例乳腺癌患者分為高表達(dá)組和低表達(dá)組。cIAP-1、XIAP和caspase-3的高、低表達(dá)在不同腫瘤臨床病理參數(shù)患者中的分布情況見表2。結(jié)果顯示，cIAP1高表達(dá)的乳腺癌患者更集中于絕經(jīng)前或年齡＜50歲的患者中（P＜0.05）；XIAP高表達(dá)的乳腺癌患者更集中于Ki-67＜20%的患者中（P＜0.05）；cIAP-1、XIAP和caspase-3的表達(dá)水平與其他臨床病理參數(shù)無關(guān)，其中包括ER、PR、HER-2狀態(tài)、分子分型等（均P＞0.05）。

2.3 cIAP1、XIAP 和 caspase-3表達(dá)與乳腺癌患者生存期的關(guān)系

利用Kaplan-Meier Plotter數(shù)據(jù)庫分析乳腺癌患者中cIAP1，XIAP和caspase-3的表達(dá)水平和預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果顯示，cIAP1高表達(dá)患者的無復(fù)發(fā)生存期與cIAP1低表達(dá)者無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），但進(jìn)一步分組后發(fā)現(xiàn)在化療組中cIAP1高表達(dá)患者呈現(xiàn)出生存時(shí)間更長的趨勢(shì)（P=0.058）?？傃芯咳巳褐校琗IAP高表達(dá)患者的無復(fù)發(fā)生存期長于低表達(dá)者，進(jìn)一步分組后發(fā)現(xiàn)，在化療組中XIAP高表達(dá)患者的無復(fù)發(fā)生存期較低表達(dá)組更長（均P＜0.05）?？傃芯咳巳褐信c未化療組中，caspase-3高表達(dá)患者的無復(fù)發(fā)生存期較短，預(yù)后較差（均P＜0.05）；而在化療組中caspase-3高表達(dá)組的無復(fù)發(fā)生存期較低表達(dá)組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）（圖2）。

表1 乳腺癌、纖維腺瘤及癌旁正常組織中cIAP-1、XIAP和caspase-3的表達(dá)量[×10-3，M（P25～P75）]Table 1 Expression levels of cIAP-1,XIAP and caspase-3 in breast cancer,breast fibroadenoma and normal mammary tissue[×10-3,M(P25-P75)]

表2 乳腺癌組織中 cIAP-1，XIAP和caspase-3表達(dá)情況與臨床病理參數(shù)的關(guān)系[n（%）]Table 2 Relations of expressions of cIAP-1,XIAP and caspase-3 with clinicopathologic parameters in breast cancer[n(%)]

圖2 乳腺癌組織中cIAP1、XIAP和caspase-3 蛋白的表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系Figure 2 Relations of the expression of cIAP1,XIAP and caspase-3 proteins with prognosis of breast cancer

3 討 論

國際癌癥研究機(jī)構(gòu)制定的GLOBOCAN 2018標(biāo)準(zhǔn)顯示，預(yù)計(jì)2018年全球約有208萬新發(fā)乳腺癌病例，該病的死亡人數(shù)為626679，乳腺癌仍然是威脅全球女性生命健康最高發(fā)的惡性疾病[6-7]。隨著乳房檢查、腫瘤標(biāo)志物及鉬靶X線等檢查手段的廣泛運(yùn)用，乳腺癌的檢出率得以提高，但仍有約40%的早期患者及大多數(shù)青年女性患者無法從中獲益，因此臨床亟待探尋高靈敏度、高特異性及準(zhǔn)確率的乳腺癌診斷方法。

細(xì)胞凋亡是一種為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的細(xì)胞自主的程序性死亡過程，凋亡信號(hào)的順利轉(zhuǎn)導(dǎo)有助于保護(hù)基因組穩(wěn)定性，而細(xì)胞凋亡缺陷可能促使癌癥的發(fā)生，規(guī)避凋亡是腫瘤的發(fā)病機(jī)制之一[8]。IAPs家族可參與調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中IAPs家族共有8位成員，既往研究顯示在肺癌，肝癌和卵巢癌等組織中cIAP1和XIAP均呈高表達(dá)，兩者亦被發(fā)現(xiàn)高表達(dá)于乳腺癌組織及其細(xì)胞系中。IAPs家族的N端均包含1個(gè)或3個(gè)桿狀病毒IAP重復(fù)結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)域可通過結(jié)合凋亡途徑中的關(guān)鍵蛋白酶—caspase的活性位點(diǎn)來發(fā)揮其生物學(xué)作用[9]。其中，cIAP1和XIAP可通過與caspase-3結(jié)合抑制凋亡，三者相互作用發(fā)揮著調(diào)控及效應(yīng)細(xì)胞凋亡的職能。

3.1 cIAP1，XIAP 和 caspase-3在乳腺癌中高表達(dá)

本研究發(fā)現(xiàn)，相較于正常乳腺組織，cIAP1、XIAP和caspase-3在腫瘤組織中的表達(dá)水平更高。Pluta等[10]采用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)乳腺癌組織中的cIAP1表達(dá)水平進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，相較于乳腺良性腫瘤，乳腺癌組織中cIAP1顯著高表達(dá)（P＜0.05）。Hussain等[11]通過測(cè)定中東地區(qū)乳腺癌中XIAP蛋白表達(dá)，研究結(jié)果示29.5%的乳腺癌組織呈XIAP高表達(dá)狀態(tài)；Xu等[12]運(yùn)用組織微陣列技術(shù)對(duì)100例乳腺癌組織及70例配對(duì)正常乳腺組織進(jìn)行胞質(zhì)中XIAP蛋白表達(dá)情況的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)乳腺癌組織中的XIAP表達(dá)明顯高于正常對(duì)照組（P＜0.001）。Yang及其團(tuán)隊(duì)[13]通過對(duì)來自21項(xiàng)研究的3091例患者的數(shù)據(jù)進(jìn)行Meta分析，結(jié)果指出，既往多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)乳腺癌組織中caspase-3蛋白表達(dá)明顯高于正常乳腺組織。綜合數(shù)據(jù)表明，以上3種凋亡相關(guān)蛋白在乳腺癌中均有上調(diào)趨勢(shì)，提示其異常表達(dá)可能破壞了細(xì)胞增殖與凋亡的動(dòng)態(tài)平衡，阻滯了腫瘤細(xì)胞的凋亡進(jìn)程，使腫瘤細(xì)胞得以存活和增殖，進(jìn)而促使乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展。

3.2 cIAP1，XIAP 和 caspase-3與臨床病理參數(shù)的關(guān)系

乳腺癌是一種激素反應(yīng)性腫瘤，其發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后與體內(nèi)性激素的分泌，特別是雌、孕激素和雄激素的水平密切相關(guān)。月經(jīng)是雌、孕激素作用于子宮內(nèi)膜后引起的周期性出血，是卵巢功能的外在表現(xiàn)，女性月經(jīng)狀態(tài)可在一定程度上反映機(jī)體內(nèi)分泌水平。研究顯示，雄激素作為合成雌激素的前體，其在絕經(jīng)前[14]及絕經(jīng)后[15]婦女體內(nèi)的激素水平均與乳腺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)存在正相關(guān)，反映月經(jīng)狀態(tài)可能與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)絕經(jīng)前乳腺癌患者中高cIAP1表達(dá)水平的患者比例較高，推測(cè)cIAP1的表達(dá)水平可能與患者月經(jīng)狀態(tài)有關(guān)。

Ki-67被廣泛用于評(píng)估腫瘤的增殖活性，除G0期外，它存在于細(xì)胞周期的各個(gè)階段。參考St.Gallen標(biāo)準(zhǔn)[16]，本研究以20%作為Ki-67的臨界值，發(fā)現(xiàn)在Ki-67＜20%的乳腺癌患者中，高XIAP表達(dá)水平的患者比例較高；Wang等[17]發(fā)現(xiàn)XIAP的高水平表達(dá)與增殖指數(shù)相關(guān)，本研究結(jié)果與其結(jié)果相符，提示XIAP不僅參與細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)，還可能與細(xì)胞增殖有關(guān)。

本研究未發(fā)現(xiàn)caspase-3與年齡、月經(jīng)狀態(tài)、ER、PR、HER-2及Ki-67等臨床病理參數(shù)相關(guān)，該結(jié)果與既往其他研究類似[18]；此外，也有文獻(xiàn)[19]報(bào)道乳腺癌中caspase-3的高表達(dá)與腫瘤組織中ER、PR、Her-2的陽性狀態(tài)相關(guān)。結(jié)果的差異可能因研究人群、腫瘤異質(zhì)性、caspase-3陽性臨界值等不同而造成，上述結(jié)論有待于后續(xù)大樣本的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。

TNBC作為乳腺癌的一種特殊亞型，具有侵襲性強(qiáng)、易局部復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移等特性，因其獨(dú)特的生物學(xué)行為成為臨床難點(diǎn)之一[20]。TNBC約占乳腺癌總體發(fā)病率的15%左右，本研究為探討cIAP1、XIAP和caspase-3的表達(dá)在非TNBC與TNBC中是否存在差異，特增加TNBC病例數(shù)。研究結(jié)果示，3種凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)在非TNBC和TNBC間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。

3.3 cIAP1，XIAP和caspase-3的潛在臨床價(jià)值

cIAP1的C-末端攜帶具有E3泛素連接酶的功能的RING（really interesting new gene）結(jié)構(gòu)域，它能夠通過泛素蛋白酶體途徑降解目標(biāo)蛋白并參與多種凋亡通路的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。本研究發(fā)現(xiàn)在接受新輔助化療的乳腺癌患者中cIAP1高表達(dá)患者的無復(fù)發(fā)生存期可能更長。Kempkensteffen等[21]認(rèn)為cIAP1的高表達(dá)與腎細(xì)胞癌的良好預(yù)后相關(guān)；研究[22]發(fā)現(xiàn)下調(diào)cIAP1與尿路上皮癌細(xì)胞系的凋亡相關(guān)；然而也有研究[23]結(jié)果顯示，cIAP1高表達(dá)是膀胱癌患者的不良預(yù)后因素。以上結(jié)果揭示cIAP1的表達(dá)可能與腫瘤預(yù)后存在相關(guān)性，但在不同腫瘤類型中其表達(dá)及意義存在差異，其相關(guān)機(jī)制有待進(jìn)一步闡明。

XIAP是IAPs家族中最有潛力的成員，它可以直接結(jié)合caspase-3，caspase-7和caspase-9從而抑制caspase的蛋白水解活性來發(fā)揮抗凋亡的作用[24-25]。利用其抗細(xì)胞凋亡的特性，通過運(yùn)用XIAP反義寡核苷酸和小分子抑制劑治療腫瘤的新療法成為了研究熱點(diǎn)，相關(guān)試驗(yàn)已進(jìn)入臨床前研究和I、II期臨床試驗(yàn)階段[26-28]。誠然更多的研究致力于探討XIAP對(duì)乳腺癌進(jìn)展和化療耐藥方面的影響，而XIAP與乳腺癌的預(yù)后關(guān)系于臨床治療的指導(dǎo)仍有意義。本研究發(fā)現(xiàn)，XIAP對(duì)評(píng)估化療后患者的預(yù)后可能存在參考價(jià)值，在化療組中，XIAP高表達(dá)患者的無復(fù)發(fā)生存期較長，預(yù)后較好。Nestal de Moraes等[29]發(fā)現(xiàn)XIAP的高表達(dá)與乳腺癌患者的不良臨床結(jié)局相關(guān)，本研究與該結(jié)論相反。Tamm等[30]在早期的研究中通過對(duì)76例原發(fā)性急性髓系白血病患者的XIAP表達(dá)情況及預(yù)后進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)高XIAP蛋白表達(dá)組的中位生存期及中位緩解時(shí)間較低表達(dá)組更短，即高XIAP蛋白水平可能與急性髓系白血病患者的生存率存在負(fù)相關(guān)。而其團(tuán)隊(duì)在后續(xù)的研究中，通過擴(kuò)大試驗(yàn)樣本量（n=172）發(fā)現(xiàn)這一相關(guān)性并不成立，考慮結(jié)果上的差異可能與疾病所處階段及接受的治療方案不同有關(guān)[31]。Ferreira等[32]通過免疫組化分析144例非小細(xì)胞肺癌患者XIAP的表達(dá)與預(yù)后關(guān)系時(shí)指出，XIAP高表達(dá)的患者其總生存期更長。為進(jìn)一步探討出現(xiàn)這一現(xiàn)象的原因，通過檢測(cè)凋亡指數(shù)與增殖指數(shù)（如：有絲分裂指數(shù)和Ki-67陽性細(xì)胞百分率）研究細(xì)胞的凋亡及增殖情況，發(fā)現(xiàn)XIAP的表達(dá)水平與凋亡指數(shù)無明顯相關(guān)性，而XIAP的高表達(dá)與低腫瘤增殖指數(shù)相關(guān)。

由于細(xì)胞的凋亡作用主要通過激活caspase-3來實(shí)現(xiàn)，因此檢測(cè)乳腺腫瘤中凋亡效應(yīng)因子caspase-3的表達(dá)能準(zhǔn)確地反映其在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用。大量研究表明caspase-3的表達(dá)與乳腺癌密切相關(guān)，而caspase-3的表達(dá)水平與患者的預(yù)后關(guān)系在仍有爭(zhēng)議。既往研究報(bào)道caspase-3的高表達(dá)與乳腺癌患者的不良預(yù)后相關(guān)[33-34]，而部分研究得到相反的結(jié)論，即caspase-3表達(dá)的下調(diào)與腫瘤發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移存在相關(guān)性[35]。本研究發(fā)現(xiàn)，在總研究人群中，caspase-3高表達(dá)患者的無復(fù)發(fā)生存期較短，預(yù)后較差。與文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果一致[36]：高表達(dá)水平的caspase-3與進(jìn)展期乳腺癌患者腫瘤復(fù)發(fā)及存活率下降相關(guān)。caspase-3通常以無活性的酶原前體形式存在于細(xì)胞質(zhì)中，一旦被激活為活化型caspase-3，細(xì)胞則進(jìn)入了不可逆轉(zhuǎn)的凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)。研究表明，經(jīng)放、化療等抗腫瘤治療后，細(xì)胞凋亡通路被激活引發(fā)凋亡，瀕死的腫瘤細(xì)胞可通過旁分泌途徑釋放鈣非依賴性磷脂酶A2（calcium-independent phospholipase A2，iPLA2）等介質(zhì)，從而改變腫瘤周圍微環(huán)境引發(fā)“鳳凰涅槃”現(xiàn)象，刺激殘存腫瘤細(xì)胞再增殖。caspase-3作為caspase-3/iPLA2或caspase-3/Pannexin 1“鳳凰涅槃”信號(hào)通路的樞紐，活化的caspase-3可通過釋放大量炎癥介質(zhì)進(jìn)而促使腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。通過進(jìn)一步的分析發(fā)現(xiàn)，在化療組中caspase-3高、低表達(dá)組間的無復(fù)發(fā)生存期未表現(xiàn)出明顯差異，而在未化療組中caspase-3高表達(dá)患者的生存時(shí)間較短，反映總?cè)巳褐袃山M間的差異主要集中在未化療的患者，推測(cè)caspase-3對(duì)既往未接受過任何抗腫瘤治療的患者的預(yù)后判斷更有價(jià)值。

本研究通過對(duì)實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行亞組分析，發(fā)現(xiàn)cIAP1、XIAP和caspase-3的表達(dá)在未化療組和化療組間、非TNBC組和TNBC組間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（均P＞0.05）。結(jié)果提示化療可能不影響目標(biāo)蛋白在乳腺癌患者中的表達(dá)，化療前后的穩(wěn)定表達(dá)使得靶蛋白作為乳腺癌潛在生物標(biāo)志物成為可能。因本研究存在地域局限性，且入組病例數(shù)有限，尚需大樣本隨機(jī)試驗(yàn)驗(yàn)證文中觀點(diǎn)。

綜合本研究的結(jié)果表明，cIAP1、XIAP和caspase-3蛋白表達(dá)可能與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)，提示XIAP和caspase-3可作為判斷乳腺癌預(yù)后的潛在指標(biāo)，其中，XIAP適用于新輔助化療后患者的預(yù)后評(píng)估，caspase-3有益于未接受化療的患者的預(yù)后評(píng)價(jià)，但其實(shí)際的臨床應(yīng)用價(jià)值仍有待在更大的樣本中探明。隨著腫瘤分子醫(yī)學(xué)的發(fā)展，人們對(duì)乳腺癌研究的逐漸深入，疾病診治轉(zhuǎn)向規(guī)范化和精準(zhǔn)化。尋找可靠的生物標(biāo)志物不僅能發(fā)掘乳腺癌早期篩查和診斷的新指標(biāo),同時(shí)還具有指導(dǎo)乳腺癌靶向治療及評(píng)判預(yù)后的作用，對(duì)IAPs家族的進(jìn)一步了解有望為乳腺癌的診治提供新的思路。