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        精胺聯(lián)合β-內(nèi)酰胺類抗生素治療臨床多重耐藥銅綠假單胞菌的效果觀察

        2019-06-11 03:01:50劉暢
        醫(yī)藥前沿 2019年12期
        關(guān)鍵詞:精胺內(nèi)酰胺類抗生素

        劉暢

        (南京鼓樓醫(yī)院檢驗(yàn)科 江蘇 南京 210008)

        銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)屬于革蘭氏陰性非發(fā)酵菌,是引起院內(nèi)獲得性感染的常見致病菌之一。銅綠假單胞局內(nèi)感染多出現(xiàn)于患者體質(zhì)較差、免疫系統(tǒng)功能低下、體內(nèi)微生態(tài)失調(diào)等狀態(tài),常引起術(shù)后感染、呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎、皮下組織炎、中耳炎,以及菌血癥和敗血癥等,嚴(yán)重危害了患者的生命安全[1]。傳統(tǒng)的抗生素大多基于較為單一的抗菌機(jī)制,細(xì)菌往往僅需通過(guò)單一位點(diǎn)的突變即可對(duì)作用機(jī)制相似的一類抗生素產(chǎn)生耐藥,導(dǎo)致抗菌藥物研發(fā)速度大大滯后于細(xì)菌耐藥率的增長(zhǎng),不足以應(yīng)對(duì)目前日趨嚴(yán)重的細(xì)菌耐藥問(wèn)題。β-內(nèi)酰胺類抗生素是目前臨床應(yīng)用最為廣泛的抗生素,有文獻(xiàn)報(bào)道其可以與多種化學(xué)物質(zhì)聯(lián)合應(yīng)用增強(qiáng)抗菌能力[2]。本研究選取精胺為研究對(duì)象,對(duì)其與β-內(nèi)酰胺類抗生素之間是否具有聯(lián)合抗菌作用進(jìn)行研究。

        1.資料與方法

        1.1 一般資料

        銅綠假單胞菌標(biāo)準(zhǔn)菌株P(guān)AO1為本實(shí)驗(yàn)室保存。臨床耐藥菌株P(guān)A-1、PA-2、PA-3、PA-4、PA-5、PA-6來(lái)自2017-2018年本院檢驗(yàn)科微生物室病人標(biāo)本分離保存。氨芐西林(Ampcillin)、苯唑西林(Carbenicillin)、青霉素(Penicillin G)、精胺(Spermine)等均購(gòu)自Sigma-Aldrich公司。

        1.2 研究方法

        菌種鑒定過(guò)程:臨床標(biāo)本采集自我院住院病人痰液,首先根據(jù)革蘭染色、葡萄糖氧化發(fā)酵(O-F)實(shí)驗(yàn)初步判斷為革蘭陰性非發(fā)酵菌,隨后使用VITEK2 Compact全自動(dòng)微生物分析儀GN板卡完成菌種鑒定。

        最小抑菌濃度(MIC)測(cè)定:以大腸桿菌ATCC25922為質(zhì)控菌株,采用美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(CLSI)推薦的微量肉湯稀釋法,檢測(cè)精胺與β-內(nèi)酰胺類抗生素聯(lián)合用藥前/后的MIC值變化。聯(lián)合用藥組加入的精胺終濃度為1mM。

        2.結(jié)果

        在本研究中,由于銅綠假單胞菌對(duì)于β-內(nèi)酰胺類抗生素天然耐藥,青霉素、氨芐西林、苯唑西林等β-內(nèi)酰胺類抗生素均無(wú)法有效抑制其生長(zhǎng)。另一方面,終濃度為1mM的精胺(圖1)溶液抗菌效果較弱,對(duì)于實(shí)驗(yàn)菌株也不產(chǎn)生抑制作用。然而,當(dāng)在β-內(nèi)酰胺類抗生素中加入1mM精胺后,三種β-內(nèi)酰胺類抗生素對(duì)于PAO1的MIC值均出現(xiàn)大幅度的下降。使用同樣的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行臨床標(biāo)本驗(yàn)證,結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)菌株P(guān)AO1相似,精胺與抗生素的結(jié)合使用可以有效提高抗菌效率,使治療成為可能,見表。

        圖1 精胺的分子式及分子量

        表 β-內(nèi)酰胺類抗生素單獨(dú)與聯(lián)合用藥的MIC值比較

        3.討論

        精胺屬于生物多胺的一種,首次發(fā)現(xiàn)可追溯到17世紀(jì)末。荷蘭科學(xué)家列文虎克在發(fā)明顯微鏡后,在精液中首次發(fā)現(xiàn)一種晶體,這種晶體于1888年被德國(guó)化學(xué)家Ladenburg和Abel命名為精胺,化學(xué)結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)于1920年(圖1),氨基是其最為主要的官能團(tuán)。精胺是一類脂肪族化合物,分子量低,存在于幾乎所有的真核生物的每一個(gè)活細(xì)胞中,其濃度的與細(xì)胞生物合成、分解代謝和腸道微生物等因素有關(guān)。由于精胺攜帶大量的陽(yáng)離子,其在生理pH值條件下可與帶負(fù)電荷的DNA、RNA、蛋白質(zhì)等多種生物大分子相互作用,在細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和分化中扮演了重要的角色。研究表明,精胺廣泛參與人體多種生理調(diào)節(jié)作用,不僅與心血管疾病和肝臟再生有關(guān),還與運(yùn)動(dòng)障礙、癡呆、多發(fā)性硬化、腫瘤、精神疾病以及免疫調(diào)節(jié)作用相關(guān)[3]。

        銅綠假單胞菌是重要的院內(nèi)感染致病菌之一,該菌不僅對(duì)于青霉素、頭孢菌素碳青酶烯類等β-內(nèi)酰胺類抗生素極易產(chǎn)生耐藥,對(duì)于氟喹諾酮類、氨基糖苷類以及粘菌素類抗生素也常具有較強(qiáng)的抵抗能力[1]。實(shí)驗(yàn)證明,單一抗生素治療銅綠假單胞菌臨床感染效果較差,應(yīng)以復(fù)合β-內(nèi)酰胺類、三或四代頭孢菌素、三或四代喹諾酮類等藥物為佳。即使如此,在臨床工作中仍經(jīng)常能夠分離出多重耐藥銅綠假單胞菌,這些菌株可抵抗所有的常用抗生素,導(dǎo)致治療失敗,使臨床醫(yī)生面臨無(wú)藥可選的困難處境。

        本文對(duì)精胺和β-內(nèi)酰胺類抗生素聯(lián)合使用時(shí)的抗菌效果進(jìn)行評(píng)估,證明精胺對(duì)于多種β-內(nèi)酰胺類抗生素的抗菌效果具有明顯的增強(qiáng)的作用,能夠顯著的降低藥物MIC值。研究表明該效應(yīng)可能與精胺擾亂細(xì)菌內(nèi)部谷胱甘肽的代謝有關(guān),但具體的相關(guān)機(jī)制還有待進(jìn)一步的研究[4]。

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