袁曉丹，王春仁，朱興全

（1. 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，大慶 163319；2. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所 家畜疫病病原生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 甘肅省動(dòng)物寄生蟲病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，蘭州 730046）

片形吸蟲?。╢ascioliasis）是由片形吸蟲（Fasciolaspp.），包括肝片吸蟲（Fasciola hepatica）、大片吸蟲（Fasciola gigantica）及其“中間型”（intermediate）感染而引起的一種世界性人獸共患病，在我國(guó)又稱為肝蛭病[1]。肝片吸蟲主要分布于溫帶及亞熱帶地區(qū)，可以感染包括人在內(nèi)的多種哺乳動(dòng)物，如反芻動(dòng)物、靈長(zhǎng)類及嚙齒類等；大片吸蟲主要感染熱帶地區(qū)的水牛，也見于其他動(dòng)物[2]。牛羊等動(dòng)物食入囊蚴即可發(fā)生感染，我國(guó)片形吸蟲分布廣泛，在黑龍江省、遼寧省、青海省、甘肅省、云南省和廣西壯族自治區(qū)等省區(qū)均有報(bào)道，感染率為5%～45.97%[3-8]。牛羊等動(dòng)物感染片形吸蟲病，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，并且威脅人類身體健康。鑒于片形吸蟲病的嚴(yán)重危害但基礎(chǔ)研究又很薄弱，2015年立項(xiàng)的國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃（973計(jì)劃）項(xiàng)目（編號(hào)：2015CB150300）將片形吸蟲作為重要研究對(duì)象之一。

1 片形吸蟲的形態(tài)學(xué)特征

片形吸蟲具有典型的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，背腹扁平，形似葉片，活體時(shí)為淡紅色。肝片吸蟲蟲體前端有一呈三角形的錐狀突，稱頭錐；頭錐基部寬，像有一對(duì)“肩”；肩部以后逐漸變窄，后端尖，呈“V”字形（圖1A）。大片吸蟲呈長(zhǎng)葉狀，“肩”不明顯，后端鈍圓（圖1B）。片形吸蟲蟲體大小隨宿主、寄生數(shù)量和蟲齡等不同而有所差別；肝片吸蟲一般為21～45 mm×7～14 mm，大片吸蟲則更長(zhǎng)更窄，通常為25～75 mm×5～12 mm。蟲體有口腹兩個(gè)吸盤，口吸盤較小，約1 mm，腹吸盤稍大，位于口吸盤稍后方。口腹吸盤之間有生殖孔。片形吸蟲具有雌雄兩套生殖器官，睪丸前后排列于蟲體中后部，分支較多，卵巢位于腹吸盤右側(cè)，呈鹿角狀。眼觀蟲體兩側(cè)有明顯的褐色顆粒組成的卵黃腺。蟲卵呈黃色或黃褐色，無(wú)卵蓋，較大，肝片吸蟲蟲卵大小為133～157 μm×74～91 μm，大片吸蟲為150～190 μm×75～90 μm[9]。

圖1 肝片吸蟲蟲體形態(tài)（A）和大片吸蟲蟲體形態(tài)（B）Fig. 1 Morphology of Fasciola hepatica (A) and Fasciola gigantica (B)

2 片形吸蟲的生活史

片形吸蟲的生活史（圖2）包括成蟲、蟲卵、毛蚴、胞蚴、雷蚴、尾蚴、囊蚴、后尾蚴（童蟲）這8個(gè)生活階段，肝片吸蟲和大片吸蟲各階段蟲體形態(tài)基本相似，但發(fā)育時(shí)間有較明顯的差異。

片形吸蟲成蟲寄生于終末宿主，如牛、羊等動(dòng)物的肝膽管中，產(chǎn)出大量的蟲卵（產(chǎn)卵覆蓋成蟲的整個(gè)生存期，甚至能達(dá)到數(shù)百萬(wàn)個(gè)），蟲卵隨著膽汁進(jìn)入腸道，進(jìn)而隨糞便排至外界。此時(shí)，蟲卵只有在適宜的溫度、濕度下才能迅速發(fā)育為毛蚴，干燥環(huán)境或陽(yáng)光直射時(shí)，迅速死亡。毛蚴的孵出與氧氣、溫度、光線和水質(zhì)有關(guān)，4～5℃停止孵出，12～30℃都能孵出，光照和溫水均可刺激毛蚴的大量孵出。毛蚴進(jìn)入螺體，經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖可逸出成百上千條尾蚴。尾蚴附著在水中的植物上，脫尾，形成的囊蚴隨動(dòng)物的采食進(jìn)入體內(nèi)而感染。囊蚴在十二指腸中各種物質(zhì)的刺激下脫囊形成童蟲，一部分童蟲隨腸壁到達(dá)腹腔，由肝包膜進(jìn)入肝臟膽管；另一部分童蟲鉆入腸粘膜，經(jīng)腸系膜靜脈進(jìn)入肝臟，發(fā)育為成蟲。從童蟲到成蟲大約需要兩個(gè)月，成蟲可在宿主體內(nèi)寄生3～5年[1,9]。

片形吸蟲的中間宿主為椎實(shí)螺科的淡水螺，其中肝片吸蟲的中間宿主為小土窩螺、斯氏蘿卜螺；大片吸蟲的中間宿主為耳蘿卜螺，也有小土窩螺的報(bào)道[10]。

圖 2 片形吸蟲的生活史Fig. 2 The life cycle of Fasciola spp.

3 片形吸蟲病的危害

動(dòng)物感染片形吸蟲后的臨床表現(xiàn)取決于寄生數(shù)量、毒素作用及宿主的健康狀況。通常牛體內(nèi)寄生250條成蟲、羊體內(nèi)寄生50條成蟲時(shí)就會(huì)表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀，綿羊?qū)ζ挝x最敏感，山羊和牛次之，但該病對(duì)幼畜的危害特別嚴(yán)重。片形吸蟲病可分為急性和慢性兩種，急性型主要發(fā)生在夏末和秋季，此時(shí)正值雨季，其中間宿主大量繁殖，牛、羊等動(dòng)物通過(guò)采食吃進(jìn)大量的囊蚴，導(dǎo)致大量童蟲在體內(nèi)移行，引起各組織損傷出血，甚至急性肝炎，患畜食欲廢絕，粘膜蒼白，迅速死亡。慢性型多發(fā)生在冬春季節(jié)，吞食囊蚴后幾個(gè)月發(fā)病，主要由成蟲引起。成蟲以宿主的血液、細(xì)胞等為食，同時(shí)分泌毒素與代謝產(chǎn)物，使得患畜漸進(jìn)性消瘦、貧血、食欲不振，眼瞼、頜下甚至胸腹部水腫，這是慢性片形吸蟲病的典型癥狀。嚴(yán)重時(shí)，因惡病質(zhì)而死亡[9-10]。

病畜急性期的病理危害主要表現(xiàn)為腸壁和肝臟的嚴(yán)重?fù)p傷、出血，其他組織也見漿膜出血和組織損傷[11]，粘膜蒼白，血液稀薄，血液中含有大量嗜酸性細(xì)胞，“蟲道”內(nèi)可見童蟲。慢性型由于成蟲的機(jī)械刺激和毒素的作用，可出現(xiàn)慢性膽管炎、慢性肝炎和貧血。肝臟腫大，肝膽管粗如繩索，突出表面，肝硬化。偶見片形吸蟲肺部移行的病例[1]。

片形吸蟲病的感染使牲畜產(chǎn)奶、產(chǎn)肉量降低，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重影響人類健康和畜牧業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展。

4 片形吸蟲病的診斷與治療

片形吸蟲病在臨床上的診斷主要是臨床診斷法與糞便蟲卵檢查法相結(jié)合。采集符合臨診癥狀病畜的糞便，經(jīng)過(guò)水洗沉淀法或尼龍篩兜集卵法，觀察蟲卵。如遇到急性病例則需進(jìn)行剖檢，可見童蟲或成蟲而確診。免疫學(xué)診斷法及分子診斷檢測(cè)方法可用于急慢性片形吸蟲病的生前診斷，如酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)[12-14]、間接血凝試驗(yàn)[15]、間接熒光抗體試驗(yàn)、實(shí)時(shí)定量PCR[14,16]、特異PCR技術(shù)[17-18]、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)等[19-21]。生化檢測(cè)亦可作為片形吸蟲病的輔助檢測(cè)指標(biāo)，如動(dòng)物感染片形吸蟲時(shí)，肝細(xì)胞的變性或壞死，谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）和谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）升高；膽管上皮細(xì)胞受損時(shí)，γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（γ-GT）升高[22]。

片形吸蟲病應(yīng)在早期診斷的基礎(chǔ)上及時(shí)醫(yī)治，避免產(chǎn)生不可逆臟器損傷。常用的驅(qū)片形吸蟲藥有硝氯酚（拜耳9015），但此藥只對(duì)成蟲有效；丙硫咪唑（抗蠕敏）對(duì)成蟲效果好，但是對(duì)童蟲效果較差；溴酚磷對(duì)成蟲、童蟲均有較好的療效；三氯苯唑（肝蛭凈）對(duì)成蟲、幼蟲和童蟲均有高效驅(qū)殺作用，亦可用于急性病例，但是在停藥14 d后的肉才能食用，停藥10 d后的乳才能飲用；碘硝酚腈對(duì)成蟲和童蟲驅(qū)殺效果好，但是藥殘時(shí)間長(zhǎng)，停藥一個(gè)月后的肉、乳才可食用[9]。驅(qū)蟲藥的長(zhǎng)期使用易導(dǎo)致蟲株的耐藥性，耐藥性蟲株更易孵化、感染性更強(qiáng)、危害更為嚴(yán)重[21]。

5 片形吸蟲病的防制

對(duì)動(dòng)物片形吸蟲病的防控要結(jié)合當(dāng)?shù)氐牧餍刑攸c(diǎn)，制定適宜的綜合性防控措施。第一，根據(jù)流行區(qū)域的流行特點(diǎn)定期進(jìn)行預(yù)防性驅(qū)蟲。如夏末秋初，急性病例多發(fā)地帶的牲畜用三氯苯唑進(jìn)行驅(qū)蟲；而在慢性病例多發(fā)地帶，北方春秋兩季驅(qū)蟲，南方每年3次驅(qū)蟲，驅(qū)蟲期間要避免二次感染，統(tǒng)一發(fā)酵處理糞便。第二，破壞螺的生存環(huán)境，如改造沼澤和洼地。第三，消滅中間宿主淡水螺，如養(yǎng)殖水禽消滅螺類等，也可以使用化學(xué)滅螺法，將生石灰、硫酸銅或氨水撒于死水中。第四，要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，避免在低洼潮濕的地方放牧，若有條件可以實(shí)施劃地輪牧，降低感染幾率[23]。

6 展望

目前，片形吸蟲病的基礎(chǔ)研究十分薄弱，尤其是對(duì)片形吸蟲感染與致病的分子機(jī)制尚缺乏系統(tǒng)研究。但值得高興的是，國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃（973計(jì)劃）項(xiàng)目“牛羊重要寄生蟲致病機(jī)制的分子基礎(chǔ)”（編號(hào)：2015CB150300）自2015年啟動(dòng)實(shí)施以來(lái)，項(xiàng)目組圍繞“片形吸蟲感染與致病的分子機(jī)制”和“片形吸蟲免疫逃避與宿主先天免疫應(yīng)答機(jī)制”2個(gè)關(guān)鍵科學(xué)問(wèn)題，已在不同發(fā)育期大片形吸蟲轉(zhuǎn)錄組研究[24]、大片吸蟲感染對(duì)水牛肝臟轉(zhuǎn)錄組研究[25]、肝臟細(xì)胞因子及轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)[26]、肝臟和外周血淋巴細(xì)胞TLRs和NLRs信號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)[27]、大片吸蟲排泄分泌蛋白對(duì)宿主細(xì)胞功能的影響[28]等方面取得重要進(jìn)展。相信隨著研究工作不斷深入研究，定會(huì)在片形吸蟲感染與致病的分子機(jī)制研究方面取得重要突破，將為研發(fā)片形吸蟲病新的診斷檢測(cè)方法、藥物及疫苗奠定基礎(chǔ)。