黃雪秋，韋有杰，馬 璐，雷 祿

（百色學(xué)院，廣西 百色 533000）

關(guān)鍵字：葡萄多酚；化妝品；面霜

生產(chǎn)葡萄酒的時(shí)候都會(huì)產(chǎn)生大量的葡萄籽、葡萄皮廢渣，而葡萄籽、葡萄皮都具有較高的營(yíng)養(yǎng)和藥用價(jià)值，特別是，葡萄籽中多酚類(lèi)物質(zhì)的含量很高，特別是花青素類(lèi)?；ㄇ嗨仡?lèi)含有多個(gè)酚羥基，低聚花青素可溶于水，而原花青素則是普遍被認(rèn)為具有很高抗氧化性的物質(zhì)，相較于維生素C有過(guò)之而無(wú)不及[1-3]。相關(guān)原花青素的提取方法的報(bào)道很多[4,5]，但目前提取很純的且能很好保存原花青素的方法則還有待發(fā)掘，因?yàn)樵ㄇ嗨厥嵌喾N聚合度類(lèi)型并存。

目前，生產(chǎn)葡萄酒的葡萄籽、葡萄皮廢渣主要用于生產(chǎn)飼料，未開(kāi)發(fā)更多用途。我們嘗試從葡萄籽中提取出較純的葡萄多酚，之后將其用于制作面霜，研究該款面霜的性質(zhì)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑和儀器

試劑：?jiǎn)胃术?、角鯊?fù)椤ⅫS原膠、硬脂酸異丙酯、卡波姆、二甲基硅油和海藻糖為化妝品級(jí)純度；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、甘油、戊二醇、丁二醇、泛醇、EDTA二鈉、苯氧乙醇、維生素C以上試劑均為分析純；D101大孔吸附樹(shù)脂。

儀器：研磨機(jī)、UV-3600plus型紫外分光光度計(jì)、恒溫冷藏箱、分析天平、高壓消毒柜、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、移液器 （1～1000 μL）。

1.2 實(shí)驗(yàn)原理

DPPH·乙醇溶液在517nm處有強(qiáng)吸收，通過(guò)測(cè)定在DPPH·乙醇溶液中加入面霜前后的吸光度值，可以得出DPPH·乙醇溶液濃度的變化，從而驗(yàn)證面霜是否具有抗氧化性。自由基清除率公式：清除率=（1-A樣品/A空白） X100%

式中A空白為加入面霜前DPPH·乙醇溶液的吸光度，A樣品為加入面霜后DPPH·乙醇溶液的吸光度。

1.3 實(shí)驗(yàn)步驟

1.3.1 葡萄多酚的提取流程

干燥葡萄籽→磨碎→石油醚脫脂→50℃干燥→60%乙醇做提取劑在50℃水浴中超聲波輔助提取90min→離心分離→上層液減壓濃縮→粗提葡萄多酚→柱層析（大孔樹(shù)脂吸附分離，60%-90%的乙醇梯度洗脫）→減壓濃縮→純提葡萄多酚

1.3.2 面霜制備工藝

參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和基礎(chǔ)理化指標(biāo)配制，并進(jìn)行穩(wěn)定性和安全性試驗(yàn)[6]。配方如表1，A相混合攪拌并加熱至85℃，保持15min，使之熔融均勻。同時(shí)B相混合攪拌并加熱至40℃，保持10min，使之熔融均勻后，A相和B相混合置于乳化設(shè)備中乳化30min。最后加入C相物質(zhì)，攪拌均勻，冷卻至室溫即可得到產(chǎn)品。

表1 面霜配方

1.3.3 抗氧化性測(cè)試

用無(wú)水乙醇配制1×10-4mol/L的DPPH·溶液，分別量取 4.98、4.96、4.94、4.92、4.90mLey 1×10-4mol/L的DPPH·溶液，相應(yīng)往其中分別加入面霜樣品 0.02g、0.04 g、0.06 g、0.08 g、0.1 g。超聲波輔助均勻，之后在室溫下避光靜置30min。倒入比色皿，測(cè)定波長(zhǎng)為517nm時(shí)的吸光度A樣品。用相應(yīng)量的無(wú)水乙醇與相應(yīng)量的面霜凋零扣除溶劑的影響。以相應(yīng)量的DPPH·溶液和相應(yīng)量的面霜基質(zhì)作為空白對(duì)照，其吸光度即為A空白。

2 結(jié)果與討論

2.1 穩(wěn)定性與安全性

根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的耐熱、耐冷和冷熱試驗(yàn)觀(guān)察，所配置的葡萄多酚面霜穩(wěn)定性較好，未出現(xiàn)分層、滲油、結(jié)塊、析出顆粒等現(xiàn)象，亦無(wú)色澤、氣味上的變化。

選30名志愿者，男10人，女20人，年齡分布22～55歲，每天早晚進(jìn)行斑貼試驗(yàn)，連續(xù)7天，根據(jù)《化妝品安全評(píng)價(jià)程序和方法》GB7919-87標(biāo)準(zhǔn)觀(guān)察受試者皮膚反應(yīng)，受試者均沒(méi)有出現(xiàn)起皰，糜爛、紅斑、色素沉著等不良反應(yīng)，初步證明葡萄多酚面霜是安全的。

2.2 清除自由基能力

葡萄提取物中的多酚結(jié)構(gòu)，特別是原花青素結(jié)構(gòu)，能與自由基形成半醌式自由基結(jié)構(gòu)，減少自由基的積累，起到減緩皮膚衰老的作用。如圖1所示，加入葡萄多酚DPPH·溶液顏色顯著變淺，說(shuō)明葡萄多酚具有顯著的清除自由基能力。

圖1 加葡萄多酚前后對(duì)比圖

圖2是面霜中維生素C、粗提葡萄多酚和純提葡萄多酚等幾種活性成分含量DPPH·自由基清除率的影響。由圖2可知，DPPH·自由基清除率隨活性成分含量的增加而增大，其中以純提葡萄多酚面霜的自由基清除率最佳。這說(shuō)明，經(jīng)提純后，葡萄多酚中的原花青素含量提高，抗氧化性增強(qiáng)。

圖2 面霜中活性成分含量對(duì)自由基清除率的影響

從圖3可知，葡萄多酚與維生素C都具有良好的清除自由基能力。等濃度下，短時(shí)間內(nèi)，葡萄多酚的自有基比不上維生素C，隨著時(shí)間的延伸，葡萄多酚清除自由基的能力優(yōu)異于維生素C。

圖3 葡萄多酚與Vc自由基清除能力對(duì)比

3 結(jié)語(yǔ)

葡萄多酚面霜溫和無(wú)刺激，具有良好的清除自由基能力，在化妝品市場(chǎng)具有相當(dāng)大的發(fā)展?jié)摿Α?/p>