鮑玉林，劉妍妍

（青海畜牧獸醫(yī)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，青海湟源 812100）

隨著我國生態(tài)環(huán)境建設(shè)和封山禁牧工作逐步推進(jìn)，以及國家對畜牧業(yè)各項優(yōu)惠政策的陸續(xù)出臺和落實(shí)，藏羊養(yǎng)殖方式已由傳統(tǒng)的放牧飼養(yǎng)逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)楝F(xiàn)代化設(shè)施的舍飼圈養(yǎng)[1]。舍飼養(yǎng)殖能夠合理調(diào)節(jié)藏羊的營養(yǎng)物質(zhì)需求，達(dá)到快速育肥的效果，縮短養(yǎng)殖周期，可顯著提高藏羊養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益，且舍飼養(yǎng)殖能夠有效緩解草原畜草之間相互競爭的矛盾，保護(hù)草原生態(tài)環(huán)境、促進(jìn)生態(tài)畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展[2]。但舍飼養(yǎng)殖改變了藏羊的生活習(xí)性，藏羊的活動空間和運(yùn)動量明顯減少，養(yǎng)殖密度明顯變大，導(dǎo)致舍飼藏羊的免疫力和抗病力降低，患病率升高[3-4]。因此，提高舍飼藏羊的免疫力和抗病力對提高舍飼藏羊養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益、保障當(dāng)前藏羊養(yǎng)殖業(yè)穩(wěn)定與健康發(fā)展均至關(guān)重要。黃芪多糖（Astragalus Polysaccharin）是中藥黃芪的主要活性成分，具有抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、抗衰老、增強(qiáng)機(jī)體免疫力等廣泛的生物學(xué)功能[5-7]，目前，黃芪多糖在提高雞、豬等畜禽生長性能和免疫功能方面的研究與應(yīng)用較多，但在反芻動物方面的研究與應(yīng)用較少，且未見黃芪多糖在舍飼藏羊中的應(yīng)用。鑒于此，本試驗旨在研究黃芪多糖不同添加水平對舍飼藏羊生長性能和免疫功能的影響，為黃芪多糖在舍飼藏羊養(yǎng)殖中的推廣應(yīng)用奠定基礎(chǔ)，為提高舍飼藏羊生長性能、免疫力以及養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益提供方法與依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥物和試劑 黃芪多糖粉（純度為70%）購自山東方舟生物科技有限公司；6 月齡健康藏羊由富國種養(yǎng)殖專業(yè)合作社提供；羊免疫球蛋白G（IgG）（批號為mL025602）、免疫球蛋白A（IgA）（批號為mL025601）、免疫球蛋白M（IgM）（批號為mL025607）、白介素2（IL-2）（批號為mL025537）、γ 干擾素（IFN-γ）（批號為mL025661）ELISA 試劑盒均購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司。

1.2 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理 將90 只6 月齡健康藏羊（已去勢公羊與母羊各半）隨機(jī)分成3 組，每組30 只，每組3 個重復(fù)，每個重復(fù)10 只。試驗藏羊采取完全舍飼，對照組飼喂由粗飼料和精飼料混合搭配后制備的基礎(chǔ)日糧（日糧組成與營養(yǎng)成分見表1），0.05%黃芪多糖組、0.1% 黃芪多糖組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.05%、0.1%黃芪多糖。各處理組分欄飼養(yǎng)，日常飼養(yǎng)管理均一致，試驗預(yù)試期10 d，正試期60 d。

表1 基礎(chǔ)日糧組成和營養(yǎng)成分

1.3 生長性能測定 每日稱量和記錄每個重復(fù)的給料量和剩料量并計算每個重復(fù)試驗期總耗料量，根據(jù)每個重復(fù)試驗期總耗料量計算每只羊的日均采食量；在試驗開始與結(jié)束時對試驗羊逐只空腹稱重，計算每只羊的日均增重；根據(jù)日均采食量和日均增重計算耗料增重比。

1.4 免疫功能測定

1.4.1 血清樣品的制備 試驗結(jié)束后采集所有試驗羊血清樣品，采用一次性注射器在每只羊頸靜脈處采集血液1.0 mL 于1.5 mL 離心管中，將其依次置于37℃ 2 h、4℃ 4 h 后，5 000 r/m 離心10 min，吸取上清液。

1.4.2 血清中免疫球蛋白含量和細(xì)胞因子含量的測定 分 別 利 用 羊IgG、IgA、IgM、IL-2、IFN-γ ELISA 試劑盒測定各處理組試驗羊血清樣品中的IgG、IgA、IgM、IL-2、IFN-γ 含量。

1.4.3 免疫器官指數(shù)的測定 試驗羊采集血清后，從每個重復(fù)中隨機(jī)選取5 只羊（不分公母），進(jìn)行屠宰，即每組隨機(jī)屠宰15 只藏羊，摘取屠宰后藏羊的脾臟并稱重，計算脾臟指數(shù)。

脾臟指數(shù)=（脾臟重/活體重）×100%

1.5 統(tǒng)計分析 數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0 軟件中One-Way ANOVA 程序進(jìn)行單因素方差分析，用Duncan's 法進(jìn)行多重比較，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，以P＜0.05 作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 黃芪多糖對舍飼藏羊生長性能的影響 如表2 所示，與對照組相比，0.05%黃芪多糖組日均采食量、末體重、日均增重分別提高了2.0%、1.28%、5.36%（P＜0.05）；與對照組相比，0.1% 黃芪多糖組日均采食量、末體重、日均增重分別顯著提高了2.84%、3.0%、13.59%（P＜0.05），耗料增重比降低了9.51%（P＜0.05）；與0.05%黃芪多糖組相比，0.1% 黃芪多糖組末體重、日均增重分別顯著提高了1.70%、7.81%（P＜0.05），耗料增重比降低了6.41%（P＜0.05）。

2.2 黃芪多糖對舍飼藏羊免疫功能的影響 如表3 所示，與對照組相比，0.05% 黃芪多糖組IgG、IL-2、IFN-γ含量分別提高了16.67%、3.52%、7.22%（P＜0.05）；與對照組相比，0.1% 黃芪多糖組脾臟指數(shù)、IgG、IgA、IgM、IL-2、IFN-γ 含 量 分 別 提 高 了12.59%、30.21%、10.89%、10.53%、4.45%、14.09%（P＜0.05）；與0.05%黃芪多糖組相比，0.1%黃芪多糖組IgG 含量、IFN-γ 含量分別提高了11.61%、6.41%（P＜0.05）。

3 討 論

黃芪多糖具有廣泛的生物學(xué)功能，將其作為飼料添加劑能夠改善動物的腸道健康，提高飼料轉(zhuǎn)化率和營養(yǎng)物質(zhì)利用率，改善動物產(chǎn)品品質(zhì)，提高免疫器官指數(shù)，增強(qiáng)動物機(jī)體免疫力，且具有無殘留、不產(chǎn)生耐藥性、綠色環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)，符合食品安全和國家政策要求。研究表明，黃芪多糖能夠消除氟苯尼考誘導(dǎo)的免疫抑制作用，顯著改善肉仔雞在免疫抑制狀態(tài)下的生長性能，調(diào)節(jié)免疫抑制肉雞腸道的微生態(tài)平衡，提高免疫抑制肉雞的免疫功能[8]，且能顯著提高仔雞的胸腺、脾臟、法氏囊免疫器官指數(shù)[9]；黃芪多糖可顯著提高斷奶仔豬的回腸消化率[10]，減少斷奶仔豬炎性細(xì)胞因子和激素的釋放并提高斷奶仔豬的淋巴細(xì)胞活性[11]，可顯著改善斷奶仔豬生長性能和血液生理生化指標(biāo)[12]；Guo 等[13]研究表明，黃芪多糖能夠消除環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制作用，顯著改善動物機(jī)體在免疫抑制狀態(tài)下T 淋巴細(xì)胞數(shù)量，提高血清中IL-2、IFN-γ、IgG 和IgM 含量。黃芪多糖對雞、豬等動物生長性能和免疫功能的改善與促進(jìn)作用研究報道較多，但由于反芻動物瘤胃消化系統(tǒng)的特殊性，黃芪多糖對反芻動物的消化功能的積極促進(jìn)作用尚未可知。本研究證實(shí)，基礎(chǔ)飼糧中添加黃芪多糖可明顯提高藏羊的日采食量和日增重，降低耗料增重比，可能因為黃芪多糖改善了瘤胃內(nèi)環(huán)境的微生態(tài)平衡和瘤胃發(fā)酵狀況，提高了瘤胃內(nèi)有益菌的生長和纖維素酶水解活性[14]，使瘤胃內(nèi)環(huán)境更易于降解纖維，提高營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率，改善瘤胃的消化功能，進(jìn)而提高生長性能。

表2 黃芪多糖對舍飼藏羊生長性能的影響

表3 黃芪多糖對舍飼藏羊免疫功能的影響

免疫器官是免疫系統(tǒng)的重要組成部分，其發(fā)育狀況直接影響到機(jī)體的免疫水平，免疫器官指數(shù)是衡量機(jī)體免疫功能的主要指標(biāo)，免疫器官指數(shù)越高則表示免疫系統(tǒng)發(fā)育越成熟，機(jī)體對致病原的抵抗力越強(qiáng)[15]；免疫球蛋白是具有抗體活性的一類球蛋白，其含量變化與動物機(jī)體健康狀況和免疫力密切相關(guān)，含量越高表明機(jī)體的體液免疫功能越強(qiáng)[16]；細(xì)胞因子是由免疫活性細(xì)胞經(jīng)刺激而合成、分泌的一類小分子蛋白質(zhì)或多肽，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞生長與分化、調(diào)控免疫應(yīng)答等多種生物學(xué)功能，在免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)和效應(yīng)中起著重要作用，細(xì)胞因子含量的檢測是基礎(chǔ)免疫研究的有效手段[15]。在免疫器官指數(shù)、免疫球蛋白和細(xì)胞因子的選擇中，脾臟是機(jī)體最大的外周免疫器官，其可以產(chǎn)生抗體、補(bǔ)體等免疫物質(zhì)；IgG 和IgA 具有抑菌、抗病毒等免疫活性，IgM 具有激活補(bǔ)體等功能，IgG、IgA、IgM 均是主要的體液免疫檢測指標(biāo)；IL-2 和IFN-γ 均是調(diào)節(jié)T、B 淋巴細(xì)胞免疫功能的主要因子，均是主要的細(xì)胞免疫檢測指標(biāo)。故本研究選擇脾臟指數(shù)、IgG、IgA、IgM 含量和IL-2、IFN-γ 含量分別從免疫器官、體液免疫、細(xì)胞免疫三方面全面研究黃芪多糖不同添加水平對舍飼藏羊免疫功能的影響，結(jié)果表明隨著黃芪多糖添加劑量的增加，其對舍飼藏羊免疫功能的改善作用逐步增強(qiáng)，由于受到黃芪多糖純度、試驗動物機(jī)體情況等因素影響，本試驗中黃芪多糖0.1 %的添加劑量是否為舍飼藏羊養(yǎng)殖中的最適添加劑量仍需進(jìn)一步研究，但本試驗結(jié)果已表明舍飼藏羊基礎(chǔ)日糧中添加0.1%黃芪多糖可顯著提高藏羊的生長性能和免疫功能，增加舍飼藏羊的免疫力和抗病力，有利于形成環(huán)境友好型的藏羊養(yǎng)殖新模式，可在舍飼藏羊養(yǎng)殖生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。

4 結(jié) 論

本試驗條件下，舍飼藏羊基礎(chǔ)日糧中添加0.1%黃芪多糖能顯著提高舍飼藏羊的生長性能和免疫功能。