杜軍霞 武宇紅 朱秀敏 晉 思
(邢臺(tái)學(xué)院,河北 邢臺(tái) 054001)
綠茶在我國(guó)已有上千年歷史,在我國(guó)被譽(yù)為“國(guó)飲”。綠茶屬于非發(fā)酵茶,含有多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并具有抗氧化、防治腫瘤、抗病毒等多種功能[1-4]。然而綠茶對(duì)于消化道生理功能的作用尚未明確結(jié)論。本研究以家兔離體小腸平滑肌為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,從消化生理角度研究綠茶對(duì)消化道功能的影響,并對(duì)其可能的作用機(jī)制進(jìn)行初步探討。
1.1 藥品及儀器:龍井綠茶(8.3 g龍井,加入100 mL的80 ℃熱水中,電爐加熱6 min,用紗布過(guò)濾綠茶水作為原液備用)、臺(tái)氏液、10 mg/mL組胺(合肥博美生物科技有限公司,ZH4251)、1 mg/mL鹽酸腎上腺素(天津金耀氨基酸有限公司,國(guó)藥準(zhǔn)字H12020526)、BL-420F生物功能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)和恒溫平滑肌槽(均為成都泰盟軟件有限公司生產(chǎn))。組胺和鹽酸腎上腺素均用臺(tái)式液配制。
1.2 家兔離體小腸平滑肌制備:健康家兔,雌雄不限,體質(zhì)量2~3 kg,購(gòu)于河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。實(shí)驗(yàn)前禁食24 h,飲水不限,實(shí)驗(yàn)時(shí)用木棍擊打兔頭部待其死亡后立即放到解剖盤中切開腹部,迅速找到空腸并剪取20~30 cm的腸段,將腸段放在盛有預(yù)冷臺(tái)式液的培養(yǎng)皿中,快速?zèng)_洗小腸內(nèi)容,將空腸剪成2~3 cm的腸段作為標(biāo)本[5-6]。
1.3 離體小腸平滑肌收縮活動(dòng)的記錄:將標(biāo)本的一端固定于恒溫水浴槽的掛鉤上,另一端通過(guò)張力換能器連接BL-420生物信號(hào)采集系統(tǒng),記錄收縮活動(dòng)的幅度,待活動(dòng)穩(wěn)定后給藥。
2.1 正常小腸平滑肌收縮曲線:在37 ℃的臺(tái)氏液條件下,收縮曲線顯示小腸平滑肌的收縮幅度、收縮頻率都較穩(wěn)定,在正常狀態(tài)下的波形無(wú)明顯變化(圖1)。
圖1 正常家兔小腸平滑肌的收縮曲線
2.2 不同濃度綠茶水對(duì)小腸平滑肌收縮幅度的影響:離體小腸平滑肌條在37 ℃的臺(tái)式液中收縮穩(wěn)定,加入不同終濃度的綠茶水溶液并觀察平滑肌條的收縮幅度變化。結(jié)果顯示,終濃度為1%的綠茶水(LGW)引起平滑肌條收縮強(qiáng)度逐漸增大,加藥后3 min左右波幅由(1.52±0.36)g逐漸增加至(2.04±0.57)g,與加藥前相比具有極顯著性差異(P<0.01)(表1、圖2)。而2.5%綠茶水(MGW)、5%綠茶水(HGW)對(duì)離體小腸平滑肌收縮活動(dòng)表現(xiàn)出先短暫增強(qiáng)、后抑制的效應(yīng),且抑制效應(yīng)隨濃度加大而增加(表1、圖3、圖4)。結(jié)果顯示,在加入MGW后約1 min時(shí)平滑肌條收縮幅度由基礎(chǔ)值(2.46±0.49)升高至(3.47±0.54)g,隨后趨于平穩(wěn),3 min時(shí)收縮幅度降低至(2.01±0.45)g,與加藥前相比具有顯著性差異(P<0.05);加入HGW后平滑肌收縮幅度由(2.11±0.84)g升高至1 min時(shí)(3.17±1.40)g,之后明顯降低至3 min時(shí)(1.02±0.52)g,與加藥前相比具有極顯著性差異(P<0.01)(表1)。
表1 不同濃度綠茶水對(duì)家兔小腸平滑肌收縮幅度的影響(±s)
表1 不同濃度綠茶水對(duì)家兔小腸平滑肌收縮幅度的影響(±s)
注:* P< 0.05,** P< 0.01
綠茶水濃度(%)用藥前平滑肌收縮波幅(g)用藥后1 min收縮波幅(g)用藥后3 min收縮波幅(g)1% (n=6) 1.52±0.36 1.85±0.53* 2.04±0.57**2.5% (n=4) 2.46±0.49 3.47±0.54* 2.01±0.45*5% (n=7) 2.11±0.84 3.17±1.40** 1.02±0.52**
圖2 加入LGW后小腸平滑肌收縮曲線變化
2.3 不同濃度綠茶水對(duì)小腸平滑肌收縮頻率的影響:該部分結(jié)果見(jiàn)表2。結(jié)果顯示,LGW對(duì)小腸平滑肌收縮頻率幾乎沒(méi)有影響(P>0.05),而 MGW、HGW組小腸平滑肌收縮的頻率顯著下降,下降程度與綠茶水濃度呈正相關(guān),與對(duì)照組相比分別具有顯著差異(P<0.05)和極顯著差異(P<0.01)。加藥后1 min左右,平滑肌條的收縮頻率并未出現(xiàn)波動(dòng)現(xiàn)象,而是持續(xù)降低,于加藥后2 min內(nèi)趨于平穩(wěn),這一點(diǎn)與綠茶水對(duì)平滑肌條收縮波幅的影響不同(表2)。
表3 腎上腺素作用下綠茶水對(duì)家兔小腸平滑肌收縮幅度的影響(±s)
表3 腎上腺素作用下綠茶水對(duì)家兔小腸平滑肌收縮幅度的影響(±s)
注:*** :加腎上腺素后與用藥前相比P< 0.001;##:加LGW后與加腎上腺素后相比P<0.01
用藥前收縮波幅(g) 加腎上腺素后收縮波幅(g) 加LGW后收縮波幅(g)2.26±0.49 1.34±0.61*** 1.91±0.50##
表4 LGW增強(qiáng)組胺對(duì)家兔小腸平滑肌收縮幅度的促進(jìn)作用(±s)
表4 LGW增強(qiáng)組胺對(duì)家兔小腸平滑肌收縮幅度的促進(jìn)作用(±s)
注:** :加組胺后與加組胺前相比P<0.01; ##:加綠茶水后與加組胺后相比P<0.01
綠茶水濃度(%) 正常收縮波幅(g) 加組胺后收縮波幅(g) 加綠茶水后收縮波幅(g)1% (n=6) 1.52±0.32 2.24±0.53** 2.97±0.73##
圖3 加入HGW后小腸平滑肌收縮曲線變化
圖4 加入HGW后小腸平滑肌收縮曲線變化
表2 不同濃度綠茶水對(duì)家兔小腸平滑肌收縮頻率的影響(±s)
表2 不同濃度綠茶水對(duì)家兔小腸平滑肌收縮頻率的影響(±s)
注:* P< 0.05,** P< 0.01
綠茶水濃度(%)用藥前收縮頻率(次/分)用藥后1 min收縮頻率(次/分)用藥后3 min收縮頻率(次/分)1%(n=6) 10.17±0.98 9.68±1.54 9.50±1.22 2.5% (n=4) 14.75±1.90 12.88±2.14 13.00±2.16*5%(n=7) 11.86±1.57 9.17±2.13** 7.00±2.00**
2.4 LGW挽救腎上腺素對(duì)小腸平滑肌收縮的抑制作用:臺(tái)式液中加入終濃度為10-4 g/L的腎上腺素,引起平滑肌條的收縮波幅由(2.26±0.49)g立刻降低至(1.34±0.61)g,與用藥前相比,具有極顯著性差異(P<0.001),在此基礎(chǔ)上加入LGW,則平滑肌條的收縮波幅明顯回增,增加至(1.91±0.50)g,與加腎上腺素后收縮波幅相比,具有極顯著性差異(P<0.01)(表3、圖5)。回增幅度約為用藥前正常波幅的84.4%,說(shuō)明LGW對(duì)腎上腺素具有拮抗作用。
圖5 腎上腺素作用下加LGW后小腸平滑肌收縮曲線變化
2.5 LGW與組胺協(xié)同促進(jìn)小腸平滑肌收縮:向臺(tái)式液中加入終濃度為1.5×10-4g/L的組胺能夠引起平滑肌條收縮波幅顯著增加(表4、圖6),在此基礎(chǔ)上,LGW引起平滑肌條收縮活動(dòng)繼續(xù)增強(qiáng),波幅由(2.24±0.53)g增至(2.97±0.73)g,與加組胺后波幅相比,具有極顯著性差異(P<0.01)。
圖6 組胺作用下加LGW后小腸平滑肌收縮曲線變化
不同種類的茶對(duì)于消化道的作用不同[1-3],但是關(guān)于不同濃度綠茶對(duì)于消化系統(tǒng)的綜合作用研究較少,目前結(jié)論不明。本研究從消化系統(tǒng)生理功能角度對(duì)綠茶水進(jìn)行了實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明,綠茶水對(duì)于消化道平滑肌的收縮活動(dòng)有顯著影響,有趣的是,其效應(yīng)因濃度不同而不同。在一定濃度范圍內(nèi),綠茶水對(duì)小腸平滑肌條收縮活動(dòng)表現(xiàn)出顯著的抑制作用(表1、表2),這與其他一些研究結(jié)論相符[1],說(shuō)明喝濃茶的確會(huì)抑制消化道的機(jī)械性運(yùn)動(dòng),影響食物的消化吸收。然而,當(dāng)綠茶水終濃度降低至一定程度(本實(shí)驗(yàn)中為1%)時(shí),則表現(xiàn)出對(duì)小腸平滑肌條收縮強(qiáng)烈的促進(jìn)作用,主要體現(xiàn)在平滑肌條的收縮幅度上,對(duì)于收縮頻率影響不大(表2),這一結(jié)果與Kim等在培養(yǎng)的Cajal細(xì)胞上的研究結(jié)論相符[2-4]。上述結(jié)果表明,綠茶水中存在重要的活性物質(zhì),能夠促進(jìn)胃腸道蠕動(dòng),并且在濃度較低時(shí)作用明顯,隨著濃度增加,其作用會(huì)被綠茶中其他活性物質(zhì)削弱甚至翻轉(zhuǎn),但這一促進(jìn)蠕動(dòng)作用的活性物質(zhì)成分是什么?需要進(jìn)一步研究確定。
組胺是一種能使支氣管、胃腸平滑肌強(qiáng)烈收縮的生物胺,通過(guò)激動(dòng)胃腸平滑肌上的H1受體,進(jìn)而增強(qiáng)平滑肌的收縮[5]。腎上腺素為腎上腺髓質(zhì)分泌的一種激素,腎上腺素通過(guò)興奮α受體和β受體,降低平滑肌的收縮。結(jié)果顯示,LGW能協(xié)同促進(jìn)組胺對(duì)家兔離體小腸平滑肌收縮的促進(jìn)作用(表4),拮抗腎上腺素對(duì)家兔離體小腸平滑肌收縮的抑制作用(表3),提示低濃度綠茶水這種作用可能通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性拮抗腎上腺素與其受體的結(jié)合而實(shí)現(xiàn),而是否與H1受體途徑相關(guān)還有待進(jìn)一步研究。高濃度的綠茶水對(duì)小腸平滑肌的抑制作用很可能與其中的茶多酚、茶堿或鞣酸等物質(zhì)相關(guān),作用機(jī)制可能與拮抗乙酰膽堿作用、鈣流失衡等因素有關(guān)[2,6]。
由此可知,綠茶水對(duì)于消化道作用不可一概而論,低濃度綠茶水能夠促進(jìn)小腸平滑肌收縮活動(dòng),具有一定的促消化作用,該作用可能與腎上腺素受體途徑相關(guān)。較高濃度綠茶水則對(duì)小腸機(jī)械活動(dòng)表現(xiàn)出抑制作用,且呈劑量依賴性。上述作用的活性物質(zhì)以及作用機(jī)制具體如何,仍待進(jìn)一步研究。